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生物科技與生命倫理 ~DNA的真相~ 6/5科學實作練習活動
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DNA萃取原理 將複雜的細胞分子混合物加入有機溶媒,除去蛋白質及其他成分,就可以純化DNA。
一般常用酚及氯仿(phenol/chloroform)可使蛋白質變性(denaturaion)的特性來進行萃取的步驟,DNA和RNA不溶於有機溶媒中,而溶於水層。 另外,分子選殖(molecular cloning)常利用洋菜膠(agarose)來分離不同大小的DNA片段或用以純化DNA。
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*口腔細胞DNA萃取步驟 口腔黏膜細胞 DNA萃取溶液 放置恆溫水槽65℃ for 6 minutes
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DNA水平電泳槽 *組裝水平電泳膠片等膠片凝 固約15分鐘
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Agarose(膠片) (三分一的高度)
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1.拿Loding dye +自己口腔萃取DNA溶液
染色1:5 2.電壓100V:電流由負極往正極流 3.加好SAMPLE 等待25分鐘左右
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Etbr染色原理 EtBr會嵌入核酸配對(雙股DNA或單股DNA、RNA的自我配對二級結構)之間。
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1.注意事項: (1)ETBR是一個致癌化學物質 ,使用前請戴手 套,使用請小心,觸碰到ETBR請別亂摸周遭環境
(2)在使用UV照射 (3)最後使用電泳膠片顯像儀, 看自己DNA序列 (跑好電泳膠片) 1.注意事項: (1)ETBR是一個致癌化學物質 ,使用前請戴手 套,使用請小心,觸碰到ETBR請別亂摸周遭環境 2.ETBR廢棄物要在陽光下,照射N禮拜才會分解掉
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