病毒.

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1 病毒

2 HA - hemagglutinin （血凝素）

3 血凝素（hemagglutinin，HA）
由某些病毒基因编码的糖蛋白刺突； 与病毒吸附和进入宿主细胞有关； HA能与人或其它动物多种红细胞表面N－乙酰神经氨酸酶结合引起红细胞凝集。

4 病毒血凝试验原理 根据HA能与人或其它动物多种红细胞表面N－乙酰神经氨酸酶结合引起红细胞凝集的原理，滴定病毒的导致血凝效价（稀释度）。

5 病毒血凝试验（操作） 2人一组

6 实验步骤 将有机玻璃板孔从1~9进行编号，从第1孔起至第9孔，按下表加样。 将病毒液按下表进行稀释。 1 2 3 4 5 6 7 8 9
孔号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 生理盐水（ml） 病毒液 （ml） 0.9 + 0.1 0.5 0.5弃掉 病毒稀释度 1∶10 1∶20 1∶40 1∶80 1∶160 1∶320 1∶640 1∶1280 1：2560

7 自第9孔开始反方向向前每孔加入0.5%鸡红血球0.5ml，摇匀后放置室温45分钟
孔号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 生理盐水（ml） 病毒液 （ml） 0.9 + 0.1 0.5 0.5弃掉 病毒稀释度 1∶10 1∶20 1∶40 1∶80 1∶160 1∶320 1∶640 1∶1280 1：2560 鸡红血球细胞悬液（ml） 各0.5ml

8 血凝试验结果判定 结果判定：薄层（凝集） 圆点（不凝集） 凝集特别显著：“＋＋＋＋” 凝集现象次之：“＋＋＋” 凝集清楚可见：“＋＋”
结果判定：薄层（凝集） 圆点（不凝集） 凝集特别显著：“＋＋＋＋” 凝集现象次之：“＋＋＋” 凝集清楚可见：“＋＋” 稍显凝集者：“＋” 血凝单位：呈“＋＋”凝集时的最高稀释度。此时的稀释度即为1个血凝单位。

9 示教 一，血凝抑制试验 二、培养特性观察 破伤风梭菌 (Clostridium tetani)
产气荚膜梭菌 (Clostridium perfringens) 结核分枝杆菌 (Mycobacterium tuberculosis) 病原性真菌 (黑曲霉、白色念珠菌、新型隐球菌)

10 实验原理 病毒引起的血凝现象能被相应的抗血凝素抗体所抑制，称血凝抑制。
利用血凝素特异性抗体与病毒表面相应的HA相互作用，使病毒血凝现象抑制的试验称血凝抑制试验。

11 圆点 （不凝集） 薄层 （凝集） 圆点 （不凝集）

12 二、培养特性观察 破伤风梭菌 (Clostridium tetani) 产气荚膜梭菌 (Clostridium perfringens)
结核分枝杆菌 (Mycobacterium tuberculosis) 病原性真菌 (黑曲霉、白色念珠菌、新型隐球菌)

13 示教：破伤风梭菌及产气荚膜梭菌的培养特性的培 养 特 性
血平板 庖肉培养基 牛奶培养基 破伤风梭菌 37℃ 48h，薄膜状爬行生长物，边缘不齐，伴轻度β 溶血 肉汤混浊，肉渣部分被消化，呈灰白色 产气荚膜梭菌 菌落平整，光滑，边缘齐。有双层溶血环：内层完全溶血(θ 毒素引起)，外层不完全溶血(α 毒素引起) 分解肉渣中糖类而产生大量气体。 分解乳糖产酸，指示剂变黄，培养基凝固,产生大量气体,呈蜂窝状,将液面凡士林上推,甚至冲走管口棉筛。“汹涌发酵”

14 Form double hemolysis circles on blood agar plates.
The α-hemolysis is caused byα-toxin while the β-hemolysis byθ-toxin.

15 Stormy fermentation Clostridium perfringens shows “stormy fermentation” in litmus (石蕊) milk. Acid turns the pH indicator litmus from blue to pink. The acid and enzymes coagulate proteins to curd. The gas generated in the milk breaks the coagulated proteins. 凝乳

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17 示教：结核分枝杆菌的培养特性 专性需氧，最适37℃ ，营养要求高，生长缓慢，18h分裂一代。罗氏(Lowenstein-Jensen)培养基含蛋黄、甘油、马铃薯、无机盐、孔雀绿，2~6周可见菌落生长 菌落特点：菜花、颗粒或结节状菌落，乳白色或黄色，不透明。

18 The colonies are formed after 3-6 weeks of incubation on Lowenstein-Jensen medium. The colonies are buff colored and dry breadcrumb-like.

19 示教：真菌的培养特性 单细胞真菌 酵母型菌落 新型隐球菌：菌落圆形，较大，湿润呈蜡状，乳白色 类酵母型菌落
白假丝酵母菌：菌落圆形，较大，白色菌落底层有假菌丝 多细胞真菌：观察气生菌丝，营养菌丝，表面隆起，浅沟及菌落基底颜色。 黄曲霉