LD50的测定 MBL.

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1 LD50的测定 MBL

2 为节约时间，可同时做几个浓度，剂间比设为2
实验方案： 1、动物 一般为健康小鼠，体重18-22 g，雌雄各半 2、给药途径和给药容量 两种给药途径，其中一种须是临床给药途径。多含灌胃给药途径。小鼠灌胃给药容量： mL/10 g体重；腹腔注射给药容量： mL/10 g体重。 3、实验方法： 3.1 预实验 取4只小鼠，称重，按 mL/10 g体重灌胃给予药液，观察动物反应。如全部死亡，将溶液稀释2-3倍后，再取4只小鼠，称重，按 mL/10 g体重灌胃给予药液，观察动物反应。直到确定动物全部死亡的最小剂量及动物全部不死亡的最大剂量。 保证药物充分溶解 为节约时间，可同时做几个浓度，剂间比设为2 动物以及实验环境应与正式实验严格一致 SHUTCM _MBL

3 3.2 正式实验： 在预试试验所获得的0％到100％死亡率剂量的范围，按等比级数(如1：0.8)，选择5个剂量组，每组取适量（大于10只，可20只）小鼠，雌雄各半。给药，观察7～14天内各组动物反应情况，记录中毒症状、外观体征和死亡只数、死亡时间等。动物死亡，应解剖检查。 附：分组与剂间比参考 剂量比值 （最高/最低） 组间剂量比值（低剂量/高剂量） 0.6 0.65 0.7 0.75 0.8 0.85 0.9 2 - 4组 5－6组 3 4-5组 5组 6－8组 4 4－5组 5 4－5 6组 10 SHUTCM _MBL

4 4、结果与计算 LD50=log-1[Xm-i(Σp-0.5)] LD50的95％可信限＝lg-1(X50± 1.96 SX50)
SX50= i× [(Σp-Σp2)/(n-1 ) ]½ 其中： Xm：最大剂量组剂量的对数值 i: 相邻两组剂量对数值之差 P：各组动物死亡率，用小数表示，如0.8 ∑P：各组动物死亡率之和 n：各组动物数 X50：LD50的对数值 注意： 本公式应用前提： 最大剂量组死亡率 >80%，最低剂量组 死亡率<20%。

5 实验：士的宁半数致死量测定 目的： 掌握药物半数致死量（LD50）测定的基本步骤，掌握改良寇氏法的计算方法 原理：将一定浓度和一定体积的药物，按一定剂间比灌胃给与小鼠，观察一定时间，记录不 同剂量小鼠的死亡情况，计算半数致死量，以确定药物的急性毒性。 动物：昆明种小鼠，18-22 g,雌雄各半 药物：0.0125％士的宁溶液 仪器：烧杯，量筒，注射器及针头，苦味酸溶液 方法： 1、预实验： 找出引起0％到100％死亡率剂量的所在范围。 （参考剂量：最大0.0125％，给药量0.1 mL/10 g） 2、正式实验： 在预试试验所获得的0％到100％死亡率剂量的范围，按等比级数(1:0.8)，选择5个剂量组，每剂量组取适量（大于10只）小鼠，雌雄各半。腹腔注射，容量为0.1 mL/10 g，给药后观察30分钟，观察动物反应并记录各剂量组死亡只数。

6 4、结果与计算 LD50=log-1[Xm-i(Σp-0.5)] LD50的95％可信限＝lg-1(X50± 1.96 SX50)
SX50= i× [(Σp-Σp2)/(n-1 ) ]½ 其中： Xm：最大剂量组剂量的对数值 i: 相邻两组剂量对数值之差 P：各组动物死亡率，用小数表示，如0.8 ∑P：各组动物死亡率之和 n：各组动物数 X50：LD50的对数值 注意： 本公式应用前提： 最大剂量组死亡率 >80%，最低剂量组 死亡率<20%。