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Protein蛋白質2－Bradford定量分析
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實驗原理： 利用呈色劑Coomassie Blue會與蛋白質結合，結合後最大吸光位置會由465 nm移到595 nm，因此偵測595 nm處的吸光強度就可以量出蛋白質的濃度。此法較傳統的Lowry assay精確，試劑的使用也較簡易。 實驗材料： Bradford reagent、不同濃度酪蛋白溶液。 儀器：分光光度計。
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實驗方法： 各組分別取未知濃度之樣品，加入Bradford reagent混合，靜置約15分鐘反應後，以分光光度計測其595 nm之吸光值。各樣品需作三重複試驗，平均後比對Standard curve找出未知樣品的蛋白質濃度。
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BSA (ml) ddH20 (ml) Final Conc. (mg/ml) 1 ml 2(mg/ml) × 0.25 (ml) 0.75 ml 0.5 2(mg/ml) × 0.5 (ml) 0.5 ml 1.0 2(mg/ml) × 0.75 (ml) 0.3 ml 1.4
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2. Sample dilution (150X) 0.01 g ml ddH2O or 0.1 g ml ddH2O 3. Standard & Sample 分別取0.01 ml加 入3 ml Bradford reagent 混合均勻後 室溫下避光靜置15分鐘 4. 測595 nm 吸光值
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