第七章 苯乙胺类拟肾上腺素药物 的分析 Benzene ethylamines

本章要求  掌握：苯乙胺类拟肾上腺素药物的结 构和性质；主要苯乙胺类拟肾上腺素药物 的鉴别、杂质检查和含量测定的原理与特 点  熟悉：杂质的结构、危害、检查方法 与限度  了解：影响药物稳定性因素、体内药分

拟肾上腺素药 adrenergic drug  凡能引起类似肾上腺素能神经兴奋的 效果的药，也包括直接或间接激动肾上腺 素受体的药物，称为拟肾上腺素药，又称 拟交感胺。 *

Benzene ethylamines 代表药物

（ 1 ）弱碱性：具有脂烃胺侧链，其氮为仲胺氮 （ 2 ）酚羟基特性：具有邻苯二酚或苯酚结构，酚 易氧化，多元酚更易氧化显色。 （ 3 ）光学活性：本类药物大多具手性碳原子，具 有旋光性。 （ 4 ）紫外吸收特性：苯环（ 254nm ） 其他基团：芳伯氨基特性（盐酸克仑特罗） （二）化学性质 (properities)

第二节 鉴别试验 Identification  1. 与 FeCl 3 显色 : （酚羟基）  → 紫色, 加碱 → 紫红色, 红色.  2. 与 HCHO-H 2 SO 4 显色 : （酚羟基）  醌式结构  3. 氧化反应 : （酚羟基）  肾上腺素 10mg,HCl2ml 溶解,H 2 O 2 10d→ 血红色.

 4. 双缩脲反应 :→ 氨基醇结构 盐酸麻黄碱 10mg→H 2 O1ml 溶, 加 CuSO 4 2d,20% NaOH1ml→ 蓝紫色. 加 Et 2 O1ml, 上层紫红, 下层蓝.  5. Rimini Test→ 脂肪伯胺. 重酒石酸间羟胺 5mg→H 2 O 0.5ml 溶, Na 3 [Fe(NO)(CN) 6 ]2d,CH 3 COCH 3 2d,NaHCO 3 0.2g, 60°1min→ 红紫色.  6. 吸收光谱： UV.IR ，表 7-3

第三节 特殊杂质与检查  一 酮体 :  肾上腺素加 HCl(9→2000)→  2mg/ml,310nm 测 A, 不得过 0.05.(E=453)

二 光学纯度（ Optical Purity ）  重酒石酸去甲肾上腺素加水 →50mg/ml, 比 旋度 -10.0°~-12.0°  enantioseparation  ee%

三、有关物质  除克伦特罗外， ChP2010 对所有其他该类药 物都检查有关物质  盐酸去氧肾上腺素 :TLC （高低浓度对比法）  盐酸苯乙双胍 :PC （下行法）  其他 :HPLC （主成份自身对照法）

例 盐酸去氧肾上腺素加甲醇 →20 mg/ml(C 1 ), 取适量加甲醇 → 0.1mg/ml (C 2 ), 各点样 10µl,C 1 如显杂质斑点, 不得比 C 2 主斑点更深. L=0.1/20×100%=0.5%.

第四节 含量测定 ASSAY  一、非水溶液滴定法  （ nonaqueous titration ）  非水滴定法：在非水溶液中进行的滴定分 析法  非水酸碱滴定法：在非水溶液中进行的酸 碱滴定法

两种酸碱滴定法对比 1. 以水为溶剂的酸碱滴定法的特点： 优点：易得，易纯化，价廉，安全 缺点：当酸碱太弱，无法准确滴定 有机酸、碱溶解度小，无法滴定 强度接近的多元或混合酸碱无法分步或分别滴定 2. 非水酸碱滴定法的特点 非水溶剂为滴定介质 → 增大有机物溶解度 改变物质酸碱性 扩大酸碱滴定范围

非水溶剂的分类： A. 质子性溶剂：具有较强的授受质子能力的溶剂 1) 酸性溶剂： 具有 给出质子能力（醋酸） 2) 碱性溶剂：具有接受质子能力（乙二胺） 3) 两性溶剂：既易给出质子、又易接受质子的溶 剂（甲醇） B. 非质子性溶剂：溶剂分子中无转移性质子的溶剂 1) 偶极亲质子性溶剂：吡啶 2) 惰性溶剂：氯仿

溶剂的选择 滴定酸时 —— 选择碱性溶剂或偶极亲质子 性溶剂 滴定碱时 —— 选择酸性溶剂或惰性溶剂

( 一 ) 基本原理 当 HA 酸性较强时，反应不能定量 完成，必须除去或降低 HA 的酸性， 使反应顺利地完成。 BH +  A - + HClO 4 BH +  ClO 4 + HA 游离碱类盐被置换出的弱酸 因此，要根据不同情况采用相应测定条件。 游离碱与高氯酸直接反应 有机弱碱盐类：置换滴定

( 二 ) 一般方法 供试品供试品 + 冰醋酸冰醋酸 10ml~30ml 若供试品为氢卤酸 盐再加 5% 醋酸汞的 冰醋酸液 3ml~5ml 结果结果 高氯酸滴定液滴定 以空白 试验校 正

( 三 ) 问题讨论 1. 适用范围 主要用于 K b C b ＜ 的弱碱的含量测定。 一般： K b 为 ～ 时, 宜选冰醋酸作为溶剂； K b 为 ～ 时，宜选冰醋酸与醋酐的混 合溶液； K b ＜ 时，应用醋酐作为溶剂。

2. 酸根的影响：无机酸类，在醋酸介质中的酸性以 下列顺序排序： 高氯酸＞氢溴酸＞硫酸＞盐酸＞硝酸 消除 HX 干扰的方法：加 3-5mlHg(Ac) 2, 量不足终点 不明显，结果偏低。 ChP2010 有部分测定不加 ! 2B·HX + Hg(Ac) 2 → 2B·HAc + HgX 2 过量 (1 ～ 3 倍 ) 不影响测定结果

3. 滴定剂的稳定性 非水溶液滴定法所用的溶剂为醋酸，具有挥发性 ，膨胀系数较大，温度和贮存条件都影响滴定剂 的浓度。若滴定样品与标定 HClO 4 溶液时的温度 不一致，温差未超过 10 ℃时，应将高氯酸滴定液 的浓度加以校正 : N 1 =N 0 / (t 1 -t 0 ) 4. 终点指示方法 ： 指示剂法（结晶紫）； 电位法 : 玻璃 — 甘汞电极系统 5. 其他干扰

I 2 ＋ 2Na 2 S 2 O 3 ＝ 2NaI ＋ Na 2 S 4 O 6 剩余 Br 2 ＋ 2KI ＝ 2KBr ＋ I 2 ( 二 ) 溴量法

盐酸去氧肾上腺素 0.1g, 加 H 2 O 20ml 溶解, 精加溴液 (0.05 mol.L -1 )50ml, 加 HCl 5ml 密塞 15min, 加 KI10ml 用 Na 2 S 2 O 3 (0.1mol.L -1 ) 滴定, 淀 粉指示.1ml 溴液相当于 3.395mg C 9 H 12 NO 2.HCl (0.05×202.5×1/3) 硫酸沙丁胺醇 (C 13 H 21 NO 3 )H 2 SO 4 0.4g ，精称,HAc10ml 溶解, 丙酮 15ml, 加 1d 结晶紫, 用 HClO 4 (0.1mol.L -1 ) 滴定至蓝绿色, 空白校正. T:0.1×576.7=57.67mg/ml

三、亚硝酸钠法  盐酸克伦特罗（芳伯氨基），酸性溶液 中与亚硝酸钠发生重氮化反应，生成重氮 盐，永停法指示终点。

四、 UV 和比色法  1 、 UV  盐酸甲氧明注射液（吸收系数法）  2 、比色法  盐酸克仑特罗栓（重氮化反应）, 盐酸异丙肾上腺素 气雾剂（和亚铁离子配位显色）  例 : 盐酸克仑特罗栓 20 粒, 精称, 取适量, 氯仿溶解后 盐酸提取定溶到 50ml→A 液. 取对照品加盐酸 →7.2µg/ml→B 液. 精取 A,B 液各 15ml, 显色后分别定溶 到 25ml,500nm 测定 A. Cx=Ax×Cs/As,  标示量 %=Cx×D×W×100/W× 标示量

重酒石酸去甲肾上腺素注射液 : 外标法以峰面积 计算. 血浆中儿茶酚胺类 HPLC-ECD 测定 : 内标二羟苯 胺. 血 2ml, 制血浆, 加内标,0.3mol/LHAc 洗脱, 离心, 过滤, 干燥,0.3ml 流动相溶解, 进样. 取对照品加 2 ml 代血浆, 同上处理, 测定 以 H 对 /H 内 对 C 作标准曲线. 五、 HPLC

第五节 体内药分  动物组织中盐酸克仑特罗的残留测定  1. 样品提取：乙酸乙酯；稀盐酸  2. 净化： SCX 小住  3. 衍生化： GC-MS  4. 测定 : 外标法  5. 计算 : 含量 (µg/kg)= A x CsV A s m

本章小结  结构和性质  鉴别：双缩脲反应  杂质检查：酮体  含量测定：非水溶液滴定法