支原体( Mycoplasma ) 一. 概念 : 支原体是一类缺乏细胞壁, 呈多形性, 可通过除菌 滤器, 能在无生命的培养基中生长繁殖的最小原核 细胞型微生物。
二. 主要生物学特性 (一)形态与结构 1 、形态 : 特点 -- 显著多形性, 菌体小 可呈圆球形、长丝状等,可有分支,大小约 0.2 ~ 0.3 um, 很少超过 1.0 um,光学显微镜很难观察。 2 、结构 : 特点 -- 缺乏细胞壁,细胞膜胆固醇含量丰富。 细胞有可塑性,能通过除菌滤膜。 胆固醇占 36% ,能作用固醇的物质均可破坏支原体细胞膜, 具有特殊的烧瓶状顶端结构,与支原体对宿主细胞的粘附有 关 -- 称为粘附素,支原体多为细胞膜表面感染。 普通染色不易着色,常用 Giemsa 染色,革兰阴性 。
(二)培养特性 能在人工培养基中生长,二分裂繁殖,也可有出芽,分枝 等形式 与细菌相比有下列特点: ( 1 )营养要求高 — 需人或动物血清,提供胆固醇及长链脂肪酸。 ( 2 )生长缓慢 — ①固体培养基 2 ~ 3 天形成菌落,典型呈荷包蛋样细小,需 显微镜观察。溶脲脲原体菌落称为T株 ②液体培养基生长后为小颗粒沉淀,不易混浊。 ( 3 )能在细胞培养中生长 — 是汚染细胞培养的重要因素
(三)生化反应 可利用对葡萄糖、精氨酸、尿素的分解情况对支 原体进行鉴定。 葡萄糖精氨酸尿素 肺炎支原体 人型支原体 溶脲脲原体 +--+-- -+--+- --+--+
(四)抗原结构 抗原结构的组成 : 蛋白 + 糖脂 ( 存在于细胞膜上 ) 抗原结构的意义 : 鉴别支原体的种类及型别 常用的鉴定试验方法 : ⑴生长抑制试验 (growth inhibition test, GIT) ⑵代谢抑制试验 (metabolic inhibition test, MIT)
(五)抵抗力 支原体缺乏细胞壁, 其抵抗力特点主要有 : 1 、对理化因素抵抗力弱 -- 湿热 (56 ℃ 30mis), 渗透压, 一 般消毒剂敏感。 2 、对醋酸铊, 结晶紫耐受。 3 、作用于细胞壁对的抗生素不敏感 ( 如青霉素 ) 。 4 、对作用于核蛋白体, 干扰蛋白合成的药物敏感 ( 如红 霉素, 链霉素, 螺旋霉素等 ) 。
(六)支原体与细菌 L 型的区别 支原体与细菌 L 型相同之处 : 缺乏细胞壁 多形性 通过滤菌器 在固体培养基上呈荷包蛋样菌落 对作用于细胞壁的抗生素不敏感 支原体与细菌 L 型不同之处 : 遗传, 胆固醇含量, 高渗环境, 培养状况等
Mycoplasma and L Form Bacteria MYCOPLASMAL-FORM BACTERIA No genetic relationship with bacteria Relate to their parent bacteria, sometimes can revert Cholesterol for their cell membrane No cholesterol for their cell membrane Stable in ordinary mediumNeed hyperosmotic solution Grow slowly, colony small (diameter mm) Colony larger(diameter mm) Low turbidity( 混浊度 ) in liquid medium High turbidity in liquid medium,may adhere to the wall or bottom of the tube
三. 致病性 种类多, 分布广, 动植物体内都可有支原体生长 人体内至少可发现 12 种支原体 (一)致病特点 : 1 、致病力弱, 多数不致病 — 如口腔支原体, 唾液支原体等 2 、引起粘膜表面感染, 一般不侵入血流 3 、引起间质性炎症 -- 如间质性肺炎
(二)致病机制 ①通过粘附素吸附易感细胞 — 顶端粘附结构 + 受体 ( 唾液酸 ) ②从宿主细胞膜吸收营养 — 吸取胆固醇等, 致细胞膜受损 ③产生毒性代谢产物 — H 2 O 2,NH 3, 毒素等 ④免疫损伤 — 共同抗原交叉反应, 侵犯破坏免疫细胞 (CD 4 细胞 )
四. 主要致病性支原体 (一)肺炎支原体 (Mycoplasma pneumoniae, Mp) 所致疾病 --- 原发性非典型肺炎占非细菌性肺炎的 1 / 2 , 好发于青少年,多在夏秋季节发病。 传播途径 --- 飞沫 临床表现 --- 发热,咳嗽, X 光检查为肺纹理增粗,表现为 间质性肺炎。 微生物学检查 ①分离培养 --- 痰,咽拭中 Mp 培养阳性率低。 ②血清学检查 --- 冷凝素试验, ELISA 试验,补体结合试 验等。 ③ PCR 技术 --- 测标本中 Mp 的 DNA
(二)泌尿生殖道感染支原体 溶 ( 解 ) 脲脲原体 (Ureaplasma urealyticum, Uu) 人型支原体 (Mycoplasma hominis, Mh) 生殖道支原体 (Mycoplasma genitalium, Mg) 传播途径 --- 性传播性疾病 (STD) 主要临床表现 --- 非淋菌性尿道炎 (NGU) 男性不育, 慢性前列腺炎等 女性不孕, 流产, 早产, 阴道炎, 宫颈炎等 感染胎儿 -- 致新生儿低体重, 呼吸道炎症 中枢神经系统感染等 微生物学检查 --- 分离培养, PCR 技术等
(三)穿透支原体,发酵支原体 ① AIDS 的协助致病因子 具有粘附和穿入免疫细胞 (CD4 + ) 的作用,可促 进 HIV 在细胞内的复制 ②与某些恶性肿瘤的形成可能有关 长期慢性感染可诱导细胞恶性转化