毛细管气相色谱法测定野菊花挥 发油中龙脑和樟脑的含量 复旦大学 化学教学实验中心 张晋芬

1 、掌握中药挥发油的水蒸馏同时溶剂提取的方法 以及微波辅助提取法； 2 、熟悉毛细管气相色谱仪的工作原理及其操作； 3 、掌握野菊花挥发油中樟脑、龙脑的毛细管气相 色谱分离分析及定量分析方法。 一、实验目的

二、内容提要 * 气相色谱过程：混合物的分离 — 各组分的测定 气相色谱分为 : 气固色谱（吸附 - 脱附） ( 吸附剂 ) 气液色谱（分配） * 两相： 固定相 流动相 固定液 担体 载气 （高沸点的有机溶剂 ) （惰性固体 ) H 2 、 N 2 、 He

* 分离原理：载气携带被分析的气态混合物 通过色谱柱时, 各组分在气液两相间反复分 配，由于各组分的 K 值不同，先后流出色谱 柱得到分离。 * 检测：各组分的化学性质、热导率、电性 能学等性质，用相应的检测器，通过电子线 路纪录信号，得到随时间变化的曲线（色谱 图）

* 定性：色谱峰出现的时间与该组分的性质有关， 即保留时间定性（经验规律、保留指数、双 柱定性、仪器联用 ) * 定量：峰高或峰面积大小与组分的含量有关 （校正因子、归一化法、外标法、内标法）

野菊花为菊科植物, 药用历史悠久。提取挥发油，气相色 谱分析可得各成分及含量。 野菊花中的挥发油中目前已鉴定出 60 余个化合物, 因产地或 提取方法不同，它们所含挥发油成分差 异较大, 含有的相同 成分有樟脑、龙脑等。 樟脑有药用价值，如用作呼吸循环兴奋药、清凉 油、十滴 水和消炎镇痛膏等均含有樟脑。 龙脑，俗称冰片、樟醇，是我国很多名贵中成药的原料 毛细管气相色谱法测定野菊花挥发油中龙脑和 樟脑的含量

三、仪器 瓦里安 CP-3800 气相色谱仪 气路系统 进样系统 柱分离系统 温控系统 各类检测器

瓦里安 CP-3800 气相色谱仪器简介 可连用计算机工作站。 可同时安装多达三个进样口： 1079 PTV 进样口（可配置五种进样模式） 专用的分流 / 不分流 1177 毛细管进样口 1041 填充柱进样口 可同时安装三个检测器： FID 、 TCD 、 ECD 、 TSD(N,P) 、 PFPD 及离子阱 MS 、四极杆 MS/MS （并可同时操作控制）等。 电子流量控制方式 柱箱程序升温 7 阶 8 平台，室温 +10 ～ 450 ℃。

与本实验有关的仪器配置 毛细管气相色谱，空心柱： CP-Sil 5 CB （ 100 ％二甲基聚硅氧烷） 30×0.25mmI.D.×0.25µm film （非极性， 几乎完全根据沸点分离） FID 检测器 LWMC-205 型可调功率微波化学反应器 提取挥发油： 水蒸馏同时溶剂萃取法 微波辅助水蒸馏同时溶剂萃取法 （微波具有穿透力强，选择性高，加热能 力强等特点，从而可获得高的萃取速度 和萃取效率及较好的萃取质量，因此在 中药有效成分的提取中具有很好的应用 前景。）

色谱条件 ①氢气与氮气的流量比通常为 1 ﹕ 1~1 ﹕ 1.5 ；氢气和 空气流量之比为 1 ﹕ 10 。载气： N 2 ，流速： 1 mL/min 。 ②分流比： 20 ︰ 1 ③检测器： FID ④温度设置：进样口温度 250 ℃；柱温 280 ℃ （程序升温程序：从 60 ℃开始, 保持 1 min 。 再以 12 ℃ /min 的升温速度到达 280 ℃，保持 3 min ）；检测器温度 300 ℃ ⑤进样量： 1 μL

FID 检测器原理 火焰离子化检测器（ FID ） 又称氢焰离子化检测器。 FID 属质量型检测器 原理： 以氢气和空气燃烧生成的火焰为能源，当有 机化合物进入以氢气和氧气燃烧的火焰，在高温 下产生化学电离，在高压电场的定向作用下，形 成离子流，微弱的离子流, 经过高阻放大，成为 与进入火焰的有机化合物量成正比的电信号，因 此可以根据信号的大小对有机物进行定量分析。 FID 是一种选择性的检测器，它只能检测那些在氢 火焰中燃烧产生大量碳正离子的有机化合物。

影响 FID 灵敏度的因素： 1 ）载气和氢气流速：通常以 N2 为载气，其流速 主要考虑其柱效能。但也要考虑其流速与 H2 流速 相匹配。一般 N 2 :H 2 = 1:1~1:1.5 ； 2 ）空气流速：流速越大。灵敏度越大，到一定值 时，空气流速对灵敏度影响不大。一般地， H 2 :Air = 1:10 。 3 ）极化电压：在 50V 以下时，电压越高，灵敏度 越高。但在 50V 以上，则灵敏度增加不明显。通 常选择 100~300V 的极化电压。 4 ）操作温度：比柱的最高允许使用温度低约 50 o C( 防止固定液流失及基线漂移 )

四、实验内容 1 、样品制备 （ 1 ）水蒸馏同时溶剂萃取法提取挥发油 （ 2 ）微波辅助萃取法提取野菊花挥发油 2 、测定樟脑, 龙脑的标准曲线 （内标标准曲 线法） 3 、野菊花中龙脑、樟脑含量的测定

五、数据处理 1 、记录色谱操作条件。 2 、分别测量和绘制樟脑和龙脑的内标标准 曲线。 3 、测量并计算樟脑 / 内标和龙脑 / 内标的峰 面积比，从标准曲线中分别测得樟脑和龙 脑的量。 4 、进一步计算野菊花中樟脑和龙脑的含 量。

六、注意事项 在启动开机程序前确保相应的气体开通 在正常使用仪器的时候，除了可以使用仪器的电源 开关外请不要动面板上的任何键，以免误改动仪器 或分析方法参数。 仪器运行时严禁打开柱温箱。 仪器运行过程中不能随意关闭化学工作站和仪器开 关。结束分析后选择关机方法关机.