实验九 鸡卵人工孵化及其胚胎发育观察

鸡胚已被大量用于发育的研究，鸡胚发育是所有生物体研究最深入的一种，早期鸡胚发育和哺乳类胚胎发育之间有明显的相似之处，而哺乳类胚胎较难获得。 鸡的个体发生中，许多早期发育如受精及卵裂过程并没象蛙胚那样观察得如此清楚。卵子（卵黄）在排放过程中被雌性生殖道分泌的产物所包围，它包括蛋白或蛋清、壳膜和卵壳。 卵本身是一个大的多卵黄的细胞，有限的细胞质区在胚盘，其中包括细胞核。卵裂只在胚盘上进行，当鸡蛋产出时，胚胎发育已处于原肠期，随着温度的降低，发育停止。壳外培养用玻璃皿培养，器材简单，便于观察。

实验目的 1、了解鸡胚胎发育模式与规律 2、学习和掌握鸡胚胎发育所需要的条件 3、观察鸡胚胎发育的外部形态变化 4、掌握器官形成的基本规律

Culture Method Normal In ovo Egg chicken ex ovo 保存10℃左右 孵化37-39℃ Text ext In ovo Egg Text 孵化37-39℃ 湿度50-60% CO2浓度5% chicken ex ovo

Using 孵化箱

破壳培养

体外培养 ×

egg Unfertilized egg Fertilized egg 胚盘

未受精蛋卵细胞称“胚珠” 受精蛋称“胚盘”

Fertilized egg 21day Your Text here Chicken

未孵化鸡胚

1d 2d 胚盾 一日起了珠， 鱼眼黄申浮； 胚胎 二日樱桃起， 原始心脏 心脏开始动； 第1天，鸡胚的雏形隐约可见，最初是消化道、脊索，然后是神经系统，头、眼、血岛开始形成，胚盘长约0.7cm，但验蛋时不易辨认。 2d 胚胎 二日樱桃起， 心脏开始动； 原始心脏 第2天，神经管及前、中、后脑形成，心脏形成并开始跳动，血管出现。胚盘长约1cm，验蛋时可见在卵黄阴影中有一小黑点，血管和心跳尚看不出。

3d 4d 蚊虫珠 三日血管成， "蚊子"在黄中； 小蜘蛛 四日定了位， 样似小蜘蛛； 第3天，胚胎约长0.55cm，卵黄囊、羊膜和浆膜出现，卵黄囊血管内径大1cm，胚胎的鼻、翼、后肢开始形成，尿囊亦开始出现，验蛋时可见卵黄上有一小黑点及血丝。 4d 小蜘蛛 四日定了位， 样似小蜘蛛； 第4天，胚胎长0.77cm，卵黄囊血管包围卵黄约达1/3，胚体各器官已基本具备，胚胎形态与哺乳类相似。

鸡的胚外结构

3Dpf鸡胚—器官原基

5d 6d 单珠 五日长软骨， 黑眼显单珠； 双珠 六日胎盘动， 头躯成双珠； 生殖器官开始分化，出现了两性的区别，心脏完全形成，面部和鼻部也开始有了雏形 。 五日长软骨， 黑眼显单珠； 6d 双珠 六日胎盘动， 头躯成双珠；

7d 8d 胎儿的外形已具备禽类的特点 胸腹腔尚未封闭，心、肝、胃都暴露于体腔外 七日离了壳， 沉入卵黄中； 羽毛按一定羽区开始发生 八日边口硬， 胎在蛋内浮；

9d 10d 胸腹腔已封闭，心、肝、胃等器官已包入体腔 喙开始角质化，软骨开始硬化 九日嘴爪分， 头尾来回动； 腿部鳞片和趾开始形成 十日显毛管， 血管始加粗；

背部出现绒毛 11d 十一腹毛生， 尿囊全合拢； 肾、肠开始有功能，开始用喙吞食蛋白 十二毛长齐， 上下颚分明； 12d

13d 十三躯体长， 气室分外明； 14d 十四蛋白少， 白朝嘴里进；

15d 十五体长大， 头朝大端伸； 16d 十六绒毛爽， 骨长鳞爪呈；

十七肺发育， 小端已封门； 17d 肺血管形成，但尚无血液循环，亦未开始肺呼吸 18d 十八已斜口， 鸡雏待转身；

十九见起影， 已行肺呼吸； 19d 20d 二十闻鸣叫， 陆续破壳膜；

二十一小鸡出， 发育始结束。 21d

胚蛋孵化过程中胚胎发育分期 （1）发育早期（1～4d ） 内部器官发育阶段：首先形成中胚层，再由三个胚层形成雏禽的各种组织和器官。 外部器官发育阶段：脖颈伸长，翼、喙明显，四肢形成，腹部愈合，出现绒羽和鳞片。 （3）后期（15～19d ） 禽胚生长阶段：胚胎逐渐长大，肺血管形成，卵黄收入腹腔，开始利用肺呼吸。 （4）出壳（21d ）

检 蛋 为了保证孵育成功，一般每批蛋要定期检查2-3次，确保胚胎发育正常。

5-6天检查蛋的受精情况，剔除无精和死精胚蛋 第一次检蛋 5-6天检查蛋的受精情况，剔除无精和死精胚蛋 正常胚蛋：血管网鲜红，扩散较宽，黑眼明显。 弱胚蛋：血管网色淡纤细，扩散面小，黑眼色浅。 无精蛋： 蛋内透明， 转动可见卵黄阴影。 死胚蛋：无血管网，有血线或溶血。

第二次检蛋 10-11天检出中途停止发育的胚胎 正常胚蛋：尿囊已在锐端合拢，并包围所有蛋内容物。可见锐端血管分布。 弱胚蛋：尿囊未合拢，锐端淡白。 死胎蛋：很小的胚胎与蛋黄分离，小头发亮。 腐败蛋：整个胚蛋褐紫色，有恶臭味。

第三次检蛋 17-19天检出不正常发育的蛋，剔除死胚蛋 正常胚：胚胎占满除气室外的全部空间；气室边缘弯曲，可见粗大血管，有时可见胚胎在蛋内闪动。 弱胚：气室较小，边界平齐。 中死胚：气室周围无血管，或锐端色淡。

1、画出24-96小时鸡胚装片图，并分析其发育性变化（任选2张绘图）。 实验报告 1、画出24-96小时鸡胚装片图，并分析其发育性变化（任选2张绘图）。 24小时鸡胚整装片:头部、消化道、体壁层、神经沟、体节 48小时鸡胚整装片: 视泡、心脏、体节、消化道、 神经管 72小时鸡胚整装片:脑泡、视泡、心脏、脊索、消化道、卵黄囊、翼、后肢 96小时鸡胚整装片:脑泡、视泡、心脏、脊索、消化道、卵黄囊、翼、后肢 2、思考题：分析影响鸡胚发育的环境条件。

24小时鸡胚整装片

48小时鸡胚整装片

72小时鸡胚整装片

96小时鸡胚整装片