血红蛋白含量的测定、血型鉴定、人体心电图描记、人体动脉血压的测定 本课件参考了国内多个课件,谨此表示感谢!
实验目的 掌握血红蛋白的测定方法; 学习鉴定血型的基本方法,观察红细胞凝集现象,掌握ABO血型和Rh血型鉴定的原理; 学习并掌握人体间接测压法的原理和方法; 学习心电图波形的测量方法;了解人体正常心电图各波的波形及其生理意义。
实验原理-血红蛋白含量测定 红细胞与盐酸作用生成褐色盐酸高铁血红蛋白。经稀释与标准色柱比色,即可求得血红蛋白含量。
实验原理-血型鉴定 血型一般指红细胞的血型,是根据红细胞膜外表面存在的特异性抗原(镶嵌于红细胞膜上的糖蛋白和糖脂)来确定的,这种抗原或凝集原是由遗传决定的。 抗体或凝集素存在于血清中,与红细胞的不同抗原起反应,产生凝集,最后溶解,由于这种现象,临床上在输血前必须注意鉴定血型,以确保安全输血。 通常输血反应中大多数注意ABO血型系统,其次为Rh血型。
Rh血型系统 1940年,landersteiner与wiener用恒河猴RBC免疫学得到一种抗体,发现抗血清不仅能与猴子RBC发生反应,还与纽约85%白人的RBC发生反应。 因为这类抗原存在于所有恒河猴(rhesus monkey)的红细胞上,故命名为RH因子。将凡能与这种抗RH血清起反应的85%白人称之为RH阳性,不能起反应的15%白人称之为RH阴性。
实验原理-动脉血压测定 通常血液在血管内流动时并没有声音,但如给血管以压力而使血管变窄形成血液涡流时则可发生声音(血管音)。 测定人体动脉血压最常用的方法是间接测压法,是使用血压计在动脉外加压,根据血管音的变化来测量动脉血压的。
用压脉带在上臂给肱动脉加压,当外加压力超过动脉的收缩压时,动脉血流完全被阻断,此时用听诊器在肱动脉处听不到任何声音。 外加压力低于动脉内的收缩压而高于舒张压时,则心脏收缩时,动脉内有血流通过,舒张时则无,血液断续地通过血管,形成涡流而发出声音。 外加压力等于或小于舒张压时,则血管内的血流连续通过,所发出的音调突然降低或声音消失,故恰好可以完全阻断血流所必须的最小管外压力(即发生第一次声音时)相当于收缩压。在心舒张时有少许血流通过的最大管外压力(即音调突然降低时)相当于舒张压。
实验原理-心电图的描记 心脏在收缩之前,首先发生电位变化。心电变化由心脏的起搏点——窦房结开始,经特殊传导系统最后到达心室肌,引起肌肉的收缩。 心脏的综合性电位变化可通过体液传播到人体的表面,经体表电极引导并放大而成的波形为心电图。 心电图可以反映心脏内综合性电位变化的发生、传导和消失过程。 心电图:心脏不同部位之间的电位差
实验材料 0.1mol/L盐酸溶液; 显微镜、载玻片、刺血针、消毒牙签、A型和B型标准血清、生理盐水、酒精棉球、抗D血清等; 血压计、听诊器等; 心电图机、酒精棉球等。
方法与步骤-1 于测定管内加入0.1mol/L盐酸溶液至百分刻度20处。 取20μl被检血液, 迅速将吸血管插入测定管底部盐酸液中,缓慢挤出血液,再吸取上部清液,反复冲洗吸血管2~3次,并混匀,静置10min。 沿着管壁加入蒸馏水,逐步稀释至与标准色柱色调一致后,读取重量(或百分)刻度值报告结果。 标准制换算:血红蛋白(g/L)=血红蛋白(g/dl)×10
方法与步骤-2 取一清洁玻片,用蜡笔划上记号,左上角写抗B字,右上角写抗A字。 用小滴管吸A型标准血清(抗B)一滴加入左侧,用另一小滴管吸B型标准血清(抗A)一滴加入右侧。 穿刺手指取血,玻片的每侧各放入一小滴血,用牙签搅拌,使每侧抗血清和血液混和。 静置室温下10-15min后,观察有无凝集现象,假如只是抗A侧发生凝集,则血型为A型;若只是抗B侧凝集,则为B型;若两边均凝集,则为AB型;若两边均未发生凝集,则为O型。
Rh血型鉴定 取干净玻片1个,滴入抗D血清及受检者血液各1滴,混匀,20 min后观察。凝集者为Rh阳性,否则为Rh阴性。
方法与步骤-3 受试者脱左臂衣袖,静坐5min。 松开打气球上的螺丝,将压脉带内的空气完全放出,再将螺丝扭紧。 将压脉带裹于左上臂,其下缘应在肘关节上约3cm处,松紧应适宜。受试者手掌向上平放于台上,压脉带应与心脏同一水平 在肘窝部找到动脉搏动处,左手持听诊器的胸具置于其上。注意:不可用力下压
听取血管音变化右手持打气球,向压脉带打气加压,此时注意倾听声音变化,在声音消失后再加压30mmHg,然后扭开打气球之螺丝,缓慢放气(切勿过快),此时可听到血管音的一系列变化,声音从无到有,而后由低而高,突然变低,最后完全消失。然后扭紧打气球螺丝继续打气加压,反复听取声音变化2-3次。 测量动脉血压重复上一操作,同时注意检压计之水银柱和声音变化。在徐徐放气减压时,第一次听到血管音的水银柱高度即代表收缩压。在血管音突然由强变弱时的水银柱高度即代表舒张压。记下测定数值,将压脉带内的空气放尽,使压力降至零。
方法与步骤-4 受试者安静平卧,全身肌肉松弛 按要求将心电图机面板上各控制钮置于适当位置。在心电图机妥善接地后接通电源,预热5min。 安放电极。把准备安放电极的部位先用酒精棉球脱脂,再涂上导电糊,以减小皮肤电阻。 连接导联线。按所用心电图机之规定,正确连接导联线。一般以5种不同颜色的导联线插头与身体相应部位的电极连接,上肢:左黄、右红;下肢:左绿、右黑。
调节基线旋动基线调节钮,使基线位于适当位置。 输入标准电压。打开输入开关,使热笔预热10min后,按动1mV定标电压按钮,再调节灵敏度(或增益)旋钮,标准方波上升边为10mm。开动记录开关,记下标准电压曲线。 记录心电图。旋动导联选择开关,依次记录Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ等导联的心电图。 记录完毕,应解松电极,洗净擦干,以防腐蚀。将心电图机面板上的各控制钮转回原处,最后切断电源。 取下记录纸,记下导联、受试者姓名、年龄、性别及实验日期。 测量Ⅱ导的P波、R波、T波振幅,P-R、Q-T、R-R间期,并计算心率。
注意:测量正向波振幅时,从参考水平线的上缘垂直地测量到该波的顶点;测量负向波振幅时,从参考水平线的下缘垂直地测量到该波的最低点。P波振幅的测量以P波起始部的水平线为参考水平线;QRS波群、J点、ST段、T波和U波振幅的测量是以QRS波群起始部的水平线为参考水平线。
心率的测定 测定相邻的两个心动周期中的P波与P波或R波与R波的间隔时间,按下列公式进行计算,求出心率。如心动周期的时间间距显著不等时,可将五个心动周期的P-P或R-R间隔时间加以平均,取得平均值,代入下列公式: 心率(次/min)=
注意事项 测定血红蛋白含量时应保持足够光线; 盐酸酸化时间不要低于10min; 血液和盐酸混合时不可剧烈震荡; 蒸馏水需逐滴加入,多做几次比色,以免稀释过量; 比色时将玻璃棒取出。
判断红细胞凝集,要有足够时间(10-15min) 载玻片须清洗干净;
测压时室内须保持安静,以利听诊。 戴听诊器时,务使耳具的弯曲方向与外耳道一致,即接耳的弯曲端向前 压脉带裹绕要松紧适宜,并与心脏同一水平。 重复测压时,须将压脉带内空气放尽,使压力降至零位,而后再加压测量。
心电图机必须接地良好,以防交流电干扰。 电极板和皮肤间要接触良好。 受试者应呼吸平稳、肌肉放松,以防肌电干扰。
参考结果-兔血红蛋白含量 兔血红蛋白含量: 11.9g/100ml血液(8-15)
参考结果-正常血压 收缩压100-120mmHg,舒张压60-80mmHg 记录方式120/80mmHg 或:16/10.7 kpa WHO规定,血压超过160/95mmHg为高血压。
正常心电图
正常心电图波形特点 P波 振幅:肢体导联≤0.25mV;胸导联≤0.20mV。 R波 振幅:I导联的R波≤1.5mV; V1导联的R波≤1.0mV;V5导联的R波≤2.5mV;aVR导联的R波≤0.5mV;aVL导联的R波≤1.2mV;aVF导联的R波≤2.0mV。 T波 振幅:一般不应低于同导联R波的1/10。
R-R间期 Q-T间期 其受心率快慢影响较大,一般心率越快,QT间期越短,反之则越长。正常范围为0.32~0.44s。 P-R间期 QRS波群 QRS波时间:0.06~0.10s R-R间期 正常范围为0.6~1 s,平均0.8s
正常心率 成年人安静时的正常心率有显著的个体差异,平均在75次/分左右(60—100次/分之间)。正常心率可因年龄、性别及其他生理情况而不同。
参考实验结果(总结) 兔血红蛋白含量:11.9g/100ml血液(8-15) 血型:ABO血型;Rh血型 血压 心电图 一般范围:收缩压90-120mmHg,舒张压60-80mmHg 记录方式120/80mmHg 心电图 P波 ≤0.25mV;胸导联≤0.20mV T波<R波的1/10 Q-T间期: 0.32~0.44s P-R间期: 0.12~0.20s R-R间期: 0.6~1 s,平均0.8s 心率: 平均在75次/分左右(60—100次/分之间)
附:心电图常见问题(参考) 交流电干扰 在基线上可见规则的细小杂波,其频率每秒50周,系交流电干扰。出现这种情况应检查心电图机和地线是否接好、电极板有无不洁与生锈及缚的是否合适,必要时暂停使用附近的理疗机、X光机等。如不能消除上述因素,则可能是由于心电图机内部故障或导联线的损坏。
肢体活动对基线的影响 在描记心电图过程中,患者由于手脚或身体移动,可造成基线不稳甚至波形异常。图中高耸的波形颇似异位心室搏动,实际是肢体移动造成的伪差。
肌肉震颤 图中基线出现一系列快速、不规则的细小芒刺样波动,使心电图波形失真,容易误诊为心房颤动波。这种情况下是由于被检者精神法过分紧张,或因寒冷四肢肌肉未能松弛,或电极与皮肤接触太紧,产生肌肉颤动所致。
呼吸对基线的影响 图中呼吸呈有规律的上下起伏,从而影响了心电图的观察与判断。排除这种伪差需要患者配合,保持平稳呼吸或暂时憋住呼吸。
导联线连接错误 图A:Ⅰ、aVL导联P-QRS-T波群倒置,aVR导联P波直立。肢体导联的图形颇似右位心,但心前导联却与正常一样,R波自右至左逐渐增高,S波逐渐缩小,为心前导联的正常图形,不符合右位心,这是由于左、右上肢导线接错所致。
图B:左、右上肢导线纠正后的记录:肢体导联出现正常的图形。Ⅰ导联为上图AⅠ导联的翻转,Ⅱ导联为上图Ⅲ导联图形,Ⅲ导联图形为上图Ⅱ导联的图形,aVR为上图aVL的图形,aVL为上图aVR的图形。
心电图基线不稳 第一段基线位置适宜,P-QRS-T波群的振幅如实地被记录。第二段由于基线位置偏高,R波的振幅没有被充分显示出来,所以较前者降低。S波加深,大概是热笔碰撞当杆后引起的弹性反跳所致。第三段基线位置偏低,致使S波的深度变浅,波形变钝。
停机伪差 系Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ导联的记录。Ⅰ、Ⅱ导联最后一个T波形状变窄,Ⅲ导联最后一个QRS-T波群都变窄,PR段缩短。这是由于变换导联时,机器在行将停止运转时走纸速度减慢所致。
走纸不匀 心电图机由于纸轴运转发生故障,走纸速度不均匀,可使波形发生改变。第3个搏动的T波窄而尖,第9个搏动的P波小而尖,与前一P波距离缩短,PR间期与QRS波群时间缩短,这些是由于走纸速度突然减慢所致。
心电图导联 将电极置于人体的任何两点并用导线与心电图机连接,这种连接方式和装置称为心电图导联
标准导联 亦称双极肢体导联,反映两个肢体之间的电位差。
Ⅰ导联:左上肢电极与心电图机的正极端相连,右上肢电极与负极端相连
Ⅱ导联:左下肢电极与心电图机的正极端相连,右上肢电极与负极端相连
Ⅲ导联:将左下肢与心电图机的正极端相连,左上肢电极与负极端相联
图形
单极肢体导联 将心电图机的负极与中心电端连接,探查电极在连接在人体的左上肢,右上肢或左下肢,分别得出左上肢单极导联(VL)、右上肢单极导联(VR)和左下肢单极导联(VF)
加压单极肢体导联 Gold-berger提出在描记某一肢体的单极导联心电图时,将该肢体与中心电端相连接的高电阻断开,这样就可使心电图波形的振幅增加50%,这种导联方式称为加压单极肢体导联
图形
胸导联 亦是一种单极导联,把探查电极放置在胸前的一定部位,这就是单极胸导联
导联位置 Vl:胸骨右缘第四肋间隙 V2:胸骨左缘第4肋间隙 V3:V2与V4的连线中点 V4:左锁骨中线第五肋间 腋前线 腋中线 Vl:胸骨右缘第四肋间隙 V2:胸骨左缘第4肋间隙 V3:V2与V4的连线中点 V4:左锁骨中线第五肋间 V5:左腋前线与V4同一水平 V6:左腋中线与V4同一水平 V1 V2 V3 V6 V4 V5
图形