情景1-4 消毒灭菌 基本概念 物理消毒灭菌法 化学消毒灭菌法

是保证生产成功的重要手段 基本概念 杀死一切微生物，包括芽孢。 灭菌 杀菌：菌体尚存 溶菌：菌体消失 分为 消毒：只杀死病源菌，未伤及芽孢 防腐：暂时抑制微生物生长 除菌：用冲洗、过滤等法，除去微生物 是保证生产成功的重要手段 返回本章

物理消毒灭菌法 一、热力灭菌 二、紫外线灭菌 返回本章

一、热力灭菌 （一）原理 高温 使菌体蛋白质、核酸、酶等凝固或变性失活。 （二）方法 湿热灭菌 干热灭菌 返回本节

（一）干热灭菌 热源 火焰及热空气 特点 简便、快速、范围有限 方法 小的金属、玻璃器皿 酒精灯烧 烘箱烤 大的玻璃、金属器皿 返回本节

器皿包装→160℃~170℃2h 干燥箱 使用 注意 70℃以下开箱取物 勿超180℃ 随用随开包 返回本节

（二）湿热灭菌 热蒸气或热水 热源 特点 范围广、温度低、效果好、时间短 方法 高压蒸汽灭菌 常压蒸汽灭菌 巴 氏 消 毒 返回本节

热蒸气穿透力大 蛋白质凝固点随其含水量 的增加而降低 因为 蛋白质凝固点与其含水量的关系 蛋白质含水量(%) 凝固温度(℃) 50 25 18 6 56 74~80 80~90 145 160~170 返回本节

干热灭菌与湿热灭菌穿透力的比较 加热方式 传导 介质 温度（℃） 加热时间（h） 透过布层温度（℃） 结果 20层 40层 100层 干热 空气 130~140 4 86 72 70以下 灭菌不完全 湿热 饱和 蒸汽 105.3 3 101 10l 灭菌完全 返回本节

利用高压产生的高蒸汽温度 杀灭微生物的方法 高压蒸气灭菌 概念 利用高压产生的高蒸汽温度 杀灭微生物的方法 原理 水沸点随热蒸汽压力的增加而升高 密闭锅 蒸气多 压力高 沸点高 方法 返回本节

返回本节

装锅→加热排气→升压 →保压灭菌→降压出锅 步骤： 装锅→加热排气→升压 →保压灭菌→降压出锅 关键：排净冷空气 注意 灭菌时间和压力因物而异 升降压力要稳 灭菌时间从保压时算起 压力降至“0”才能开盖 使 用 返回本节

排气

1kg/cm2=0.098Mpa(兆帕） =98Kpa（千帕） 纯蒸气压力与温度的关系 1kg/cm2=0.098Mpa(兆帕） =98Kpa（千帕） 返回本节

尽快达到100 ℃ 达到100 ℃时开始计时 灭菌中勿降温，勿干锅 2.常压蒸汽灭菌 概念 利用常压产生的100℃ 蒸汽温度进行灭菌的方法 特点 设备简，成本低，灭温低，时间长 用法 一次性灭菌（100 ℃，10余h) 尽快达到100 ℃ 达到100 ℃时开始计时 灭菌中勿降温，勿干锅 返回本节

返回本节

灭菌池 返回本节

3.巴氏消毒 概念 利用低于100℃的温度 杀灭有害微生物的方法 培养料堆积发酵 料温60℃~70℃ 杀死有害微生物 方法 返回本节

返回本节

二、紫外线灭菌 利用电子射过水银气体 产生的紫外线而杀菌的方法 概念 直接：使蛋白质、酶等变性失活 间接：空气中产生臭氧或过氧化氢 利用电子射过水银气体 产生的紫外线而杀菌的方法 杀菌 机理 直接：使蛋白质、酶等变性失活 间接：空气中产生臭氧或过氧化氢 使用 有效距离：1.5~2.0m 理想波长：265nm 30w紫外灯照30min→避光30min 返回本节

便 携 式 返回本节

透力很弱 定期更换灯管 只起辅助作用 伤眼睛和皮肤 特点 返回本节

化学消毒灭菌法 概念与划分 一、气雾消毒灭菌法 二、液体消毒灭菌法 返回本章

液态：喷雾、浸泡、洗刷等气态：加热、焚烧、氧化等 状态 划分 利用化学药剂杀灭或抑制 微生物的方法 概念 抑菌剂 消毒剂 灭菌剂 浓度 液态：喷雾、浸泡、洗刷等气态：加热、焚烧、氧化等 状态 划分 返回本节

一、气雾消毒灭菌法 （一）要求 密闭条件下保持一定时间 （二）种类 甲醛 气雾盒 返回本节

甲醛 机理：结合蛋白质氨基， 使其变性 。 喷：5% 熏：10ml/m3+1/2KMnO4 用法 有刺激性 和腐蚀性 返回本节

气雾消毒盒 粉末状 刺激性小 扩散力及渗透性强 特点 2~6g/m3→点燃（ 熏30min以上） 用法 返回本节

二、液体消毒法 固体或液体药品 水 药液（多现配现用） 概念 种类 氧化剂 熟石灰 表面活性剂 乙醇 酚类 新洁尔灭 返回本节

（一）氧化剂 氧化菌体蛋白质的活性基团， 使其变性。 机理 种类 高锰酸钾 过氧化氢 漂白粉 过氧乙酸 返回本节

高锰酸钾 紫色针状结晶 0.1%~0.2%浸泡手、器具等。   返回本节

无色液体，属环保型消毒剂 3%皮肤、伤口消毒 6％浸泡器皿30min 过氧化氢 无色液体，属环保型消毒剂 3%皮肤、伤口消毒 6％浸泡器皿30min 返回本节

漂白粉 2%~5%浓度 洗刷、喷雾、浸泡 湿处可干撒 作用约30min 使 用 ！ 注意 原品密封 随配随用 对衣物有退色和腐蚀性 返回本节

过氧乙酸 无色至微黄色液体， 有刺激性、腐蚀性、挥发性。 返回本节

（二）表面活性剂 脱水剂 脂溶剂 蛋白质变性剂 乙醇 70％~75％效果最好 皮肤、器皿擦拭或浸泡 浓度 高浓度效果差 无水的无杀菌作用 70％~75％效果最好 皮肤、器皿擦拭或浸泡 浓度 高浓度效果差 无水的无杀菌作用 返回本节

勿与肥皂混用 石炭酸：3%~5%浸泡或喷雾 刺激性小 效力比苯酚强4倍 3%~5%喷雾、擦洗 2%消毒手 酚类 来苏尔 3.新洁 尔灭 0.25%消毒皮肤、浸泡器具 0.5%喷雾 勿与肥皂混用 返回本节

务必用新鲜石灰 （三）熟石灰 提高pH、消毒 破坏秸草表面的蜡质 提供钙素养料 作用 破坏秸草表面的蜡质 提供钙素养料 作用 使用 1%~2％拌料 5%~10％喷、浸、刷、喷 干撒湿环境或霉染处 务必用新鲜石灰 返回本节

性质稳定 易溶于水 杀菌力强 抗菌谱广 作用较快 使用浓度低 价格低廉 没有毒腐性或很小 标准 性质稳定 易溶于水 杀菌力强 抗菌谱广 作用较快 使用浓度低 价格低廉 没有毒腐性或很小 药品及浓度 的选择依据 微生物特点 物品的性质 消毒目的 环境影响 返回本节

主要内容 一、物理消毒灭菌法 干热（酒精灯、干燥箱） 1.热力 灭菌 高压(排净冷空气） 常压（攻头、控中、保尾） 湿热 1.热力 灭菌 干热（酒精灯、干燥箱） 高压(排净冷空气） 常压（攻头、控中、保尾） 湿热 2.紫外线（使用方法、注意事项） 二、化学消毒灭菌法 常用 酒精、甲醛、高锰酸钾 来苏、新洁尔灭等 返回本节

作业题 思考题 1.高压灭菌与常压灭菌有哪些不同？ 2.高压灭菌应注意些什么？ 3.紫外线灭菌应注意些什么？ 4.为何不使用高浓度的酒精？ 1.为何湿热灭菌比干热灭菌效果好、时间短? 2.来苏尔和石炭酸都是酚类，为何来苏尔的杀菌效力高？ 返回本节

主要参考资料 1.白毓谦.微生物实验技术.第3章.济南：山东大学出版社，1986 2.黄毅.食用菌栽培.第二版.上册.第8章.北京：高等教育出版社，1998 3. 陈士瑜.食用菌生产大全.p83~99.北京：中国农业出版社，1988 4.沈平等.微生物学实验.第6章.北京：高等教育出版社，2001 5.李顺鹏.微生物学实验指导.P16-24.北京：中国农业出版社，2003 6.周德庆.微生物学教程.第7章.北京：高等教育出版社，1999 返回本节

再 见 返回本章