嗜碱性分叶核粒细胞 (basophilic granulocyte segmented sorm) 嗜碱性粒细胞胞体直径10-12um 胞核分叶不明显,或融合呈堆集状。 胞质中有稀疏的大小不一、分布不均、呈紫黑色的嗜碱性颗粒,颗粒常掩盖在核上,致使核的轮廓和结构模糊不清。
小成熟淋巴细胞 small lymphocyte 呈圆形或椭圆形,直径6-10um 胞核圆形或椭圆形,或有切迹,核着边,染色质粗糙致密,呈大块状,染深紫红色。 胞质量极少,仅在核的一侧见到少量淡蓝色胞质,有时几乎不见而似裸核,一般无颗粒。
大淋巴细胞
单核细胞 (Monocyte) 圆形或不规则形,直径12-20um,边缘常见伪足突出。 胞核形状不规则,常呈肾形、马蹄形、笔架形、“S”形等,并有明显扭曲折叠。染色质疏松细致,呈淡紫红色丝网状。 胞质丰富,呈淡灰蓝色或淡粉红色,可见多数细小、分布均匀、细尘样淡紫红色颗粒。
单核细胞
单核细胞
血小板
大小不均:中毒颗粒:空泡变性:
空泡变性:杜勒体:核棘突: 巨型变和分叶过多
核变性:核棘突 核碎裂 核固缩
Ⅰ型(空泡型) Ⅲ型(不成熟型) Ⅱ型(不规则型) 浆细胞型 幼稚型 单核细胞型
五、白细胞计数和分类计数的临床意义
白细胞总数与中性粒细胞数量增多与减少的标准 (1)白细胞增多:外周血白细胞>10×109/L (2)白细胞减少:外周血白细胞<4.0×109/L (3)中性粒细胞增多:外周血中性粒细胞>7.0×109/L。 (4)粒细胞减少:外周血中性粒细胞绝对值 成人<2.0×109/L;儿童<1.5×109/L. (5)粒细胞缺乏:外周血白细胞<2.0×109/L,中性粒细胞<0.5×109/L或消失。
(一)生理变化 1.年龄:WBC新生儿期 (15~20)×109/L,主要为N,6~9d逐渐减低与L大致相等,以后L逐渐增高,至4~5岁二者又基本相等,后N逐渐增高至成人水平。见图 2.日间变化:①安静及放松时较低,活动或进食后较高。②早晨较低,下午较高。
WBC年龄变化
3.运动、疼痛和情绪:高温、严寒和日光照射可使WBC轻度增高;剧烈运动、剧痛和情绪激动白细胞显著增高。刺激停止后恢复。 4.妊娠、分娩:经期和排卵期略增高;妊娠和分娩时可显著增高,妊娠最后一个月WBC常波动于(12~17)×109/L.产后2周内恢复正常。 5.吸烟:较非吸烟者WBC高。
(二)病理变化 1.N变化的临床意义 (1)N增多:WBC>10×109/L; N>7×109/L ①急性感染或化脓性炎症: 轻度感染:WBC总数可正常,分类N分叶核增多 中度感染: WBC>10×109/L并伴轻度核左移 重度感染: WBC>20×109/L并伴明显核左移 极重感染:WBC反而降低伴严重核左移
②严重组织损伤:手术、烧伤、溶血、心肌梗死 ③急性大出血:白细胞明显增高,以N分叶核为主,是早期诊断内出血的重要化验指标。 ④白血病(需与类白血病反应鉴别)或骨髓增殖性疾病、恶性肿瘤。 ⑤急性中毒。
类白血病反应:指机体对某些刺激因素所产生的类似白血病表现的血象反应。外周血中白细胞大多明显增高,并可有数量不等的幼稚细胞出现,但红细胞和血小板一般无改变,骨髓增生很少达到白血病的程度,当病因去除后,类白血病反应也逐渐消失。
(2)中性粒细胞减少: WBC<4×109/L,N<2×109/L ①某些感染:某些G-如伤寒、痢疾;某些病毒感染如流感病毒感染;某些原虫如疟原虫感染。 ②某些血液病:再障(红、粒、血小板均减少,L相对 ),少数急粒,WBC<1×109/L ③理化损伤:放射线抑制骨髓细胞有丝分裂而致N减少,一些化学药物如甲氨蝶呤。
④脾功能亢进:粒细胞被脾脏滞留、吞噬。 ⑤自身免疫性疾病:如ITP、AIHA、SLE等。
当白细胞数少于0.5×109/L提示患者受感染的危险极大,应采取适当的预防措施,并仔细监测。少于3×109/L可认为白细胞减少,应了解白细胞分类,并作进一步检查;多于12×109/L可视为增多,白细胞分类对确定增多原因有一定价值,应寻找感染的来源。30×109/L或更多者有白血病可能,应作白细胞分类及骨髓检查。
2.嗜碱性粒细胞变化的临床意义 (1)增多:外周血B>0.1×109/L或分类>1%。 ①慢性粒细胞白血病:可达10%以上。 ②过敏性和炎症性疾病 ③嗜碱性粒细胞白血病:可达20%以上。 ④骨髓纤维化和某些转移癌。 (2)减少:多无临床意义。
3.淋巴细胞变化的临床意义 1)L增多:>40%,>4×109/L (1)相对性增高(常见):由于N减少所致,如再障、粒细胞减少症。
(2)绝对性增高见于: 生理因素:早晨低,午后和晚上高;婴儿高。 病理因素:①某些病毒或细菌所致疾病:如传染性单核细胞增多症、风疹、百日咳、腮腺炎。 ②淋巴细胞性白血病、淋巴瘤。 ③器官移植术后发生排斥反应。
2)L减少:<20%,<1×109/L (1)相对减少:由于N增高所致。 (2)绝对减少:①某些感染:流感、HIV感染、 结核病早期(恢复期增多)。 ②某些药物和放射线治疗。 ③细胞免疫缺陷。
4.单核细胞变化的临床意义 1)单核细胞增多:指成人外周血M绝对值>0.8×109/L,比值>8%。 (1)生理性增多:儿童、婴儿比成人多,妊娠及分娩亦可增多。
(2)病理性增多 2)单核细胞减少:意义不大 ①某些感染:活动性肺结核、亚急性细菌性心内膜炎、疱疹病毒等。 ②结缔组织病:SLE、RA ③血液病:急单、MM、MDS ④恶性疾病:胃癌、肺癌、结肠癌、胰腺癌 ⑤胃肠道疾病:酒精性肝硬化、结肠炎 2)单核细胞减少:意义不大
病例一 患者,男性,71岁,退休工人,发热、咳嗽4天就诊。 患者4天前受凉后出现寒战,体温高达39.8℃,伴咳嗽、咳痰,痰量不多,为白色粘痰。无胸痛,无痰中带血,无咽痛及关节痛。病后食欲不振,睡眠差,大小便正常,体重无变化。既往体健,个人史、家族史无特殊。
体检:T 39.5℃,P 98次/分,R 22次/分,BP 122/83mmHg。发育正常,营养中等,神志清楚,无皮疹,浅表淋巴结不大,咽部无充血,扁桃体不大,颈静脉无怒张,胸廓无畸形,呼吸平稳,左上肺叩浊,语颤增强,有湿哕音,心界不大,心率105次/分,律齐,无杂音,腹软,肝脾未及。 实验室检查:RBC:5.5×1012/L,Hb 145g/L,WBC:12.5×109/L;分类Nsg 75%,E 1.5%,L 22%,PLT 205×109/L,尿常规(-),粪便常规(-)。
1.根据以上资料,请做出初步诊断并简述其诊断依据。 2.为明确诊断,应进一步做哪些检查?
1 答:根据以上资料,初步诊断为:左侧肺炎(肺炎球菌性可能性大)。其诊断依据为: ① 发病急,寒战、高热、咳嗽、白色粘痰,无胸痛,无痰中带血,无咽痛及关节痛; ② 左上肺叩浊,语颤增强,有湿哕音; ③ 实验室检查WBC总数、中性粒细胞比例增高。 2.答:为明确诊断,应进一步做:X线胸片,以及痰培养+药敏试验。
六、嗜酸性粒细胞直接计数
嗜酸性粒细胞的功能 (1)微弱的吞噬作用,基本无杀菌力。 (2)主要作用是限制过敏反应: ①抑制B和肥大细胞合成与释放活性物质; ②吞噬其释放的颗粒并分泌组胺酶破坏组胺。 (3)参与蠕虫的免疫反应。
嗜酸性粒细胞的趋化因子及其来源 (1)从B和肥大细胞来源的组胺; (2)从补体而来的C3a,C5a,C567; (3)从致敏淋巴细胞而来的E趋化因子; (4)从寄生虫而来的 (5)从某些细菌 (6)从肿瘤细胞而来的E趋化因子。
嗜酸性粒细胞绝对数间接法=WBC×E% 由于E主要存在于骨髓和组织中,外周血中很少,因此 ,此间接法测定结果不准。 为达到准确计数E的目的,需做E的直接计数。
(一)检测原理 用嗜酸性粒细胞稀释液,将血液稀释一定倍数,并 破坏红细胞和大部分其他白细胞,并使嗜酸性粒细胞着色,滴入计数池,计数一定范围内嗜酸性粒细胞数,换算成每升血中嗜酸性粒细胞数。
(二)器材与试剂 1.器材:同WBC计数。 2.试剂:任选下列一种 (1)伊红-丙酮稀释液:20g/L伊红5.0mL(使嗜酸性颗粒着鲜红色),丙酮5.0mL(保护E),蒸馏水加至100mL。本试剂新鲜效果好,最好一周配一次。
(2)溴甲酚紫稀释液:溴甲酚紫50mg(为指示剂,E染深蓝色),蒸馏水加至100mL。 3.试剂特点: ①E稀释液是一种低渗溶液,可使红、白细胞溶解破裂。 ②含对E的保护剂,如丙酮,而且E对低渗的抵抗性强,故能保存。 ③使嗜酸性粒细胞颗粒染色而被识别。
(三)操作 1. 在小试管中加稀释液0.38ml。 2. 将20ul血标本加入管内,立即摇匀,放置5~10分钟。然后滴入计数池。 3. 静置2-3min,低倍镜计数两个计数室中10个大方格内嗜酸性粒细胞数。
(四)结果计算 嗜酸性粒细胞/L=10个大方格内嗜酸性粒细胞数×20 ×106 (五)结果报告 嗜酸性粒细胞计数:△△△×109/L
(六)注意事项 1. 本试验应在1小时内计数完毕。 2. 在血液稀释混匀过程中,不要用力振荡。 1. 本试验应在1小时内计数完毕。 2. 在血液稀释混匀过程中,不要用力振荡。 3. 住院病人作嗜酸性粒细胞计数,应固定时间, 以免受日间生理变化影响。 4.注意与中性粒细胞区别,以免结果偏高。N着色浅,颗粒较小。
(七)参考值 5. 可加入E保护剂如丙酮避免E的破坏,并酌情调节其量,当E遭破坏时可增加其量,当N不破坏时则减少其量。 6.用溴甲酚紫稀释液时,应注意防止器械偏酸。 (七)参考值 E:(0.05~0.5)×109/L
(八)临床意义 肾上腺皮质激素的作用: ①抑制骨髓释放嗜酸性粒细胞; ②同时促使血中E向边缘池和组织转移; 从而使外周血中E减少。 交感神经兴奋,促使肾上腺皮质激素分泌增多。
1.生理变化: ①劳动、寒冷、精神刺激等使嗜酸性粒细胞降低; ②白天低,夜晚高; ③上午波动较大,下午比较恒定。
2.病理变化 (1)嗜酸性粒细胞增多:>0.5×109/L ①过敏反应性疾病; ②寄生虫病; ③某些皮肤病; ④其它:血液病,恶性肿瘤,某些内分泌疾病; ⑤猩红热是急性传染病中唯一使E增高的。
(2)嗜酸性粒细胞减少: ①长期使用肾上腺皮质激素; ②传染病急性期:如伤寒、副伤寒; ③严重组织损伤:如大手术,大面积烧伤
3.E直接计数的其他应用 (1)观察急性传染病的预后; (2)观察大手术和烧伤病人的预后; (3)肾上腺皮质功能测定(索恩氏试验、嗜酸性粒细胞减数试验):促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)使肾上腺皮质产生肾上腺皮质激素,造成嗜酸性粒细胞减低。
(3)肾上腺皮质功能测定 ①肌注或静滴ACTH25mg(直接刺激)或 ②肌注0.1%肾上腺素0.5mg(间接刺激):刺激垂体前叶分泌ACTH 。 静滴8h,肌注4h后,再做嗜酸性粒细胞计数(B) 抑制率= A为试验前值,B为试验后值。 A-B A ×100%
结果判断 ①正常:间接、直接刺激E均下降50%以上; ②皮质功能正常,垂体前叶功能不正常者: 直接刺激下降50%以上,间接刺激不下降 ③垂体功能亢进时,直接、间接刺激均下降80%~90%; ④垂体功能正常,皮质功能不良时:直接、间接刺激下降均不到50%,Addison病下降一般不到20%.
七、红斑狼疮细胞检查
系统性红斑狼疮(SLE)多见于青壮年女性,是自身免疫性结缔组织病。临床表现复杂,缺乏特异性诊断,LE细胞检查成为一种重要辅助诊断。 LE因子:存在于SLE患者的血清中,属于一种IgG型自身抗体(抗核抗体),在体外可使白细胞退化,形成“游离均匀体”,最终形成LE细胞。在低温下性能稳定,>65℃被破坏。
(一)LE细胞形成 3个条件 1. 患者血清存在LE因子(IgG型抗核蛋白 抗体); 2. 受累或退变的细胞核; 2. 受累或退变的细胞核; 3. 具有吞噬能力的白细胞。
(二)LE细胞的形态特征 1.前期 白细胞在LE因子作用下肿胀,溶解成前期LE细胞,胞质崩解,核成云雾状,称为游离均匀体。 2.花簇期 有吞噬功能的中性粒细胞围绕于均匀体,形成花形细胞簇。 3.吞噬期:中性粒细胞完全吞噬均匀体(LE细胞)
(三)LE细胞的检查方法 1. 去纤维蛋白法 2. 血块法 3. 滴血法
(四)质量控制 1. 采血后立即检查 2. 孵育时间要适当 3. 注意与果陷细胞相鉴别 1. 采血后立即检查 2. 孵育时间要适当 3. 注意与果陷细胞相鉴别 果馅细胞多为M吞噬L核所形成,被吞噬的核仍保持原有细胞核的结构和染色特点。而LE被吞噬的核染色质失去正常结构,变成游离肿胀的圆形或椭圆形烟雾状的均匀性物质。
(五)参考值:阴性 (六)临床意义 发现LE细胞还要结合临床表现及抗核抗体的检查,才能确诊。