Apoptosis 细胞凋亡研究方法建立与评价

Slides:



Advertisements
Similar presentations
课前寄语 1 、保持纪律 2 、相互配合. 第三节 公民的投资 —— 公民的存款储蓄 课堂导入.
Advertisements

行政院原住民族委員會 法規暨訴願審議委員會 102 年度原住民身分法實例演練講習: 原住民身分認定及救濟程序.
旅遊實務Ⅰ 授課教師:李健民 上課班級: 320. 課程大綱 旅遊業之設立程序 旅行業組織結構 旅行業之分類 旅行業之管理.
本校自民國 78 年於顏前校長世錫任內創設本系 設立鑑識科學學系大學部,專責鑑識人才之培養, 為目前國內唯一專門培育鑑識科學人才、研究鑑識 科學學術之大學學系,設系剛滿 20 年。自 85 年於姚 前校長高橋任內,設立鑑識科學研究所招收碩士生 ,民國 88 年於謝前校長瑞智任內先後獲內政部、教.
親 ( 四 ) 親近神的路. 一、親的三字訣、七字訣: 親近神,親愛人; 與主交通親近神,同情關心親愛人。 甚麼是親? 1. 親有親近、親愛,更有關心、同情、親切的 意思。 2. 親的人與人沒有間隔,拉近人與人之間的距 離,並且樂意幫助人,與人相調建造在一起。
第二节 基因在亲子代间的传递. 1. 什么叫做遗传? 2. 什么叫做性状? 3. 性状是由什么决定的?
PS-341 单独或联合应用反应停治疗两 种恶性肿瘤的动物实验研究 班级: 03 级七年制法文班 组员:郁嘉伦,沈富毅,潘隽玮,余昂,侯晓骏 指导:刘玮 自主创新性实验研究开题报告.
第 2 节 细胞的分化 第六章 细胞的生命历程. 白血病 白血病是人体血液中白细胞的恶性病变。 得了这种病的病人,他们的血液里骨髓里以及 各组织器官里都存在着大量形态异常的白血病 细胞,这种细胞不断增生,病人就可出现一系 列症状,因为白细胞类型的不一样,临床表现 亦有所不同。按白细胞发育成熟的程度区分,
第二班群教師團隊 105 張心平 107 鐘于寧 106 黃意評 108 鄭婉茹. 第二班群之班親會說明 學校規定事項說明 教學活動說明 班群活動介紹.
差勤.
申論題要拿高分並不容易,因為他是 有一定的技巧的,如果你遵照下列技 巧來作答申論題,相信高分並不難拿, 其技巧如下:
第二章:生物科學與食品 第三節:基因改造食品.
第三章 植物繁殖器官的结构及发育 主要内容: 花的组成;花和花序的种类;花的生理功能;发育及生殖过程;果实的结构及发育;被子植物生活史。
102大學甄選入學 個人申請、繁星推薦說明 主講人:簡慧嫻.
第三章 现代教育与人的发展.
肿瘤药物敏感实验.
新進教師研習 教務處報告 報告人:教務處 林永仁 2011 年 8 月31日.
「明清時期台灣古典散文」 教師:田啟文.
呼吸系统疑难病 选方用药技巧 (人民军医出版社) 王 付.
新頒解釋函令 ● 所得稅扣(免)繳相關法令、 ● 所得稅扣(免)繳申報實務 ● 扣繳常見稅務違章類型 財政部南區國稅局屏東分局
第六章 细胞的生命历程 第六章 细胞的生命历程 第3节 细胞的衰老和凋亡. 第六章 细胞的生命历程 第六章 细胞的生命历程 第3节 细胞的衰老和凋亡.
鼻炎 症狀: 鼻(眼睛)內發癢或不舒服、 打噴嚏、 流鼻涕(水)、 鼻塞………等 。 鼻子內的任何發炎。
生命科學概論(F) 白血病 第三組 組員名單:洪世烜 4A (組長) 徐德享 4A 黃嘉偉 4A090132
第21课时 生物圈中的微生物 考 点 聚 焦 专 项 突 破 1.
國民中學 自然與生活科技 第二冊 第3章 生殖 3-1 細胞分裂 3-2 無性生殖 3-3 有性生殖.
模块七 房地产营销渠道策略 主要内容 房地产营销渠道类型 房地产营销渠道选择方法 开发商与代理商的合作模式.
学校核心发展力 上海市建平中学 程红兵.
必修二 生物 (人教版).
遣詞造句知多少? 中文系 王偉勇教授 兼通識教育中心中心主任.
想一想 议一议 P74 我们常吃的蘑菇有根、茎、叶吗? 它们的生长是否需要光? 为什么说它们是真菌而不是植物呢?
三次科技革命 学习目标: 1.知道三次科技革命的时间、标志、发源地、理论基础、主要成就、主要特点及影响。 2.培养归纳历史知识的能力
(4)理论体系与实训模块 必须衔接、融合 本课程把理论教学体系与实训模块结构连接成一个完整的高职课程体系。
最有利標及評選優勝廠商 講師 劉金龍 經歷:臺中市政府發包科科長.
三、市场营销学研究的基本方法 (1)产品研究法。是以物为中心的研究方法,即在产品分类的基础上,对各类产品市场分别进行研究。 (2)机构研究法。是以研究市场营销制度为出发点,体现以人为中心的研究方法,即集中对整个市场营销系统中的各特定机构的性质和功能进行研究。 (3)职能研究法。是以研究产品从生产者到消费者手中所进行的各种营销活动过程中,市场营销组织所发挥的功能的方法。
青春期 要長大囉! 男女有別 生命的誕生~兩性結合才有下一代的新生命 為什麼會有月經? 經痛怎麼辦 ? 渡過快樂青春喜歡自己
王永慶遺產分配 第三組民法報告 4970T011 劉昭妤 4970T037 吳品怡 4970T090 袁如意
台南在地美食文化介紹 台南市鳳凰城文史協會 理事長 歐財榮.
一、作者概說:    王壽來,民國三十八年生,山西省 五臺縣人,中興大學 法律系畢業,美國 喬治城大學碩士、臺灣師範大學 美術研究所碩博士。長期從事文化與外交工作,現任文建會 文化資產總管理處籌備處主任。   王壽來靈感多取自生活經驗,善用中外名言,描繪人生百態。著有《公務員快意人生》、《藝術‧收藏‧我》、《公務員DNA》、《和世界偉人面對面》等書。
親愛的吉姆舅舅:   今天吃完晚餐後,奶奶說,在家裡情況變好以前,您要我搬到城裡跟您住。奶奶有沒有跟您說,爸爸已經好久沒有工作,也好久沒有人請媽媽做衣服了?   我們聽完都哭了,連爸爸也哭了,但是媽媽說了一個故事讓我們又笑了。她說:您們小的時候,她曾經被您追得爬到樹上去,真的嗎?   雖然我個子小,但是我很強壯,只要我會做的我都可以幫忙,但是,奶奶說,做其他事情以前,要先把功課做完。
网络的利与弊 2017/3/19 该课件由【语文公社】
病原:痘病毒属于痘病毒科、脊椎动物痘病毒亚科,该亚科现有8个属,各属成员对动物的致病作用有明显的差异,但它们构造差异不大。
寻找生命的螺旋 深圳市育才中学 黄俊芳.
导入新课 波能绕过障碍物产生衍射。既然光也是一种波,为什么在日常生活中难以观察到光的衍射现象呢?.
高中生物学必修Ⅰ 分子与细胞 前 言.
妇女心理保健讲座 硕放街道社区教育中心 丁惠芬.
最有利標及評選優勝廠商 講師 劉金龍 經歷:臺中市政府發包科科長.
第六章 科学观察与科学实验.
关注生物技术的 伦理问题.
當 家 新 鮮 事.
基隆市立八斗高中 102 學年度第二學期 402 班『親師座談』
2015年高考历史质量分析报告 兰州市外国语高级中学 杨彩玲.
肝功能正常的小三阳注意事项.
突變 突變是指遺傳物質發生改變, 而影響到性狀的表現 例:白化症.
兒童及少年福利服務 講師:張智昇.
脏腑气机运化 与健康养生 徐开树.
司法机关.
物理学专业 光学实验绪论 主讲人:路莹 洛阳师范学院物理与电子信息学院 2009年3月.
中國美術史報告-我最喜歡的一幅畫 班級:2年2班 姓名:郭馥甄 座號:23.
高鐵炫風 製作人林淑蘭老師.
行政院勞工委員會勞工保險局 勞退舊制與新制分析說明 高雄市政府人事處 99年2月1日.
2007/5/23初訪螢光蕈 (等了兩年).
生物五界的分類方式.
开始 结束.
多元新配方— 添加日本專利原料褐藻醣膠Fucoidan
14.细胞衰老、死亡与癌变 14.1 细胞衰老 衰老的概念 现代人类面临着3种衰老: ◆生理性衰老 ◆病理性衰老 ◆心理性衰老
人是由什么发育而来的? 一个受精卵.
第3节 细胞核——系统的控制中心 本节聚集: 1.细胞核有什么功能? 2. 细胞核的形态结构是怎样的?
非同源染色体:不是同源染色体的两条染色体
高雄區12年國教入學方式 報告人:高雄市政府教育局 局長 鄭新輝.
证据运用 第八章 证据的运用 第一节 证据体系的结构及运用规则.
Presentation transcript:

Apoptosis 细胞凋亡研究方法建立与评价 蒋纪恺

研究生? 研究方向 研究立题(研究背景、发现问题、提出问题(?)、提出假设、解决问题的策略与方法) 申请课题,获得经费 实验验证(实验模型、技术指标、方法建立与评价) 结果分析(撰写论文,申报专利,评奖)

研究方向:白血病 研究立题:肿瘤靶向治疗的分子机制研究。文献 阅读与学习。信号转导在白血病发生 与治疗的背景知识 研究模型:白血病细胞株;动物模型等 技术平台:实验技术的建立与评价,(技术指 标,动手能力) 结果分析:统计学知识,文献回顾 论文撰写:语言能力

研究背景 肿瘤治疗 手术 放疗 化疗 骨髓移植(白血病)

增殖 分化 凋亡 Survival Growth Differetiation Apoptosis 肿瘤 Tumour 立题依据

增殖:细胞通过分裂使细胞数目增加的过程 ,细胞分裂。(真核细胞的增殖方式有:有丝分裂、减数分裂、无丝分裂三种方式,只有连续进行有丝分裂的细胞才具有细胞周期。 ) 分化:在个体发育中,通过细胞分裂后产生的子代细胞比上一代细胞具有更专一的功能。后代在形态结构和功能上发生稳定性的差异过程称为细胞分化(cellular differentiation)。(比如血液中的红细胞、白细胞、淋巴细胞、血小板等都是从造血干细胞分化出来的,但是与造血干细胞相比,这些子代细胞都具有更加专一的功能。 ) 凋亡:细胞凋亡指的细胞的程序性死亡,细胞被自身的酶降解,按一定的步骤“自杀”,其死亡细胞仍为一整体,最终被白细胞吞噬。(而细胞坏死会有细胞壁破裂的现象,内含物外泄,会影响周围的细胞。)

启动 凋亡早期 凋亡中期 凋亡晚期 信号通路 ★核染色质凝缩 凋亡小体形成 ★ 细胞膜PS 外翻 ★线粒体膜电位丧失 ★DNA 被切割成片段 启动 凋亡早期 凋亡中期 凋亡晚期 信号通路 ★核染色质凝缩 ★ 细胞膜PS 外翻 ★线粒体膜电位丧失 ★DNA 被切割成片段 凋亡小体形成 Caspase 激活

研究模型 慢性粒细胞白血病(chronic myelogenous leukemia,CML ) 逆转 K562 cell line 分化(红系细胞) 增殖 凋亡 药物诱导

a bcr:abl positive erythroleukamia line derived from a 53 year Leukemia cell lines K562 cells a bcr:abl positive erythroleukamia line derived from a 53 year old female CML patient in blast crisis Philadelphia chromosome

HL60(Human promyelocytic leukemia cells) Leukemia cell lines HL60(Human promyelocytic leukemia cells) derived from a 36-year-old woman with acute promyelocytic leukemia at the National Cancer Institute

研究方法建立与评价 灵敏度 特异性 蛋白质分析 1,染色 2,酶 3,免疫 分泌蛋白、膜蛋白、细胞质,细胞核蛋白

方法学建立与研究策略 药物浓度的选择(MTT) 形态学观察(凋亡小体形成) DNA 被切割成片段 细胞膜PS 外翻 Caspase 激活 信号通路

MTT测定细胞增殖 MTT法(四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法)是Mosmann1983年报告的。原理是活细胞内线粒体脱氢酶能将四氮唑化物(MTT)由黄色还原为紫红(兰)色的甲(肷)紫,后者溶于有机溶剂(如二甲基亚枫、酸化异丙醇等),甲紫(肷)产量与细胞活性成正比。可在560nm处用酶标仪测定其OD值。

形态学观察

DNA 被切割成片段

细胞膜PS 外翻 Annexin V 基本原理 细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面,目前早期识别仍有困难。这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸(PS)从细胞膜内转移到细胞膜外,使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂,正常主要存在于细胞膜的内面,在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Annexin V是一种Ca+依赖的磷脂结合蛋白,最初发现是一种具有很强的抗凝血特性的血管蛋白,Annexin V具有易于结合到磷脂类如PS的特性。对PS有高度的亲和性。因此,该蛋白可充当一敏感的探针检测暴露在细胞膜表面的PS。PS转移到细胞膜外不是凋亡所独特的,也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的,而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就破坏了。因此,可以建立一种用Annexin V结合在细胞膜表面作为凋亡的指示并结合一种染料排除试验以检测细胞膜的完整性的检测方法。

Gossypol(24h)

个体化 靶向治疗

Deficiency Chinese herbal medicine in Chaoshan area