细菌的生理 第一节 细菌生长繁殖 一、细菌的化学组成和物理性状.

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细菌的生理 第一节 细菌生长繁殖 一、细菌的化学组成和物理性状

(一) 化学组成 蛋白质、糖类、脂质 核酸、无机盐 水 75-90% 肽聚糖、脂多糖、胞壁酸、磷壁酸、D型AA、DAP、吡啶二羧酸

G-菌等电点稍高 PH4~5 (二)细菌的物理性状 1、带电现象(负电荷) G+菌等电点低 PH2~3 2、表面积 细菌体积虽小,但其单位体积的细胞表面积总和比其他生物体大

3、光学性质 细菌细胞为半透明体 细菌悬液为混浊状态 4、半透性 选择性通透性作用 5、渗透压 G+菌渗透压高 达20~25个大气压 G-菌为5~6个大气压

二、细菌的营养物质 水 生物所必需的,占细菌总量的 碳源 80-90% ,细菌的吸收和代谢均需有水才能进行。 合成菌体成分,作为获得能量的主要来源。

氮源 有机氮化物如氨基酸、蛋白胨等;菌体的原料。 无机盐 构成菌体的成分;作为酶的组成部分,维持酶的活性;调节菌体内外的渗透压。

生长因子 细菌生长需要但自身不能合成。如:维生素、嘌呤、嘧啶、氨基酸等。

营养物质 菌体成分 能源 重要溶剂 某些菌需之 菌体成 分原料 碳源 (糖) 水 氮源 (氨基酸 生长 蛋白胨) 因子 无机盐 菌体及酶的组分 能量储存及转运 调节渗透压 与繁殖及致病相关

三、 细菌的生长繁殖 (一)细菌生长繁殖的条件 充足的营养: 水、 碳源、氮源、无机盐、必要的生长因子。

适宜的温度 : 寄生菌以人体温度(37℃)适宜,个别嗜冷(鼠疫杆菌28 ~ 30 ℃ )或嗜热(嗜热菌50 ~ 60 ℃ ) 金葡菌(5℃) 合适的酸碱度 : 大多数是中性(PH7.2~7.6),个别强碱性(霍乱杆菌PH8.4~9.2)或弱酸性(结核杆菌PH5.6~6.8 )。

必要的气体环境: 氧气和二氧化碳。 (1)专性需氧菌(aerobe) (2)专性厌氧菌(anaerobe) (3)兼性厌氧菌(facultative anaerobe) (4)微需氧菌(microaerophilic bacteria)如幽门螺杆菌、空肠弯曲菌

(二)细菌的生长繁殖方式和速度 繁殖方式 以二分裂方式进行无性繁殖 繁殖速度(代时) 20~30分钟分裂一次 但结核杆菌18~ 20小时才分裂一次

细菌生长繁殖曲线: 细菌生长曲线(growth curve) 细菌数的对数 小时 稳定期 对数期 衰亡期 迟缓期 5 10 15 20 25 (stationary phase) 对数期 (logarithmic phase) 衰亡期 (dicline phase) 迟缓期 (lag phase) 小时 5 10 15 20 25 细菌生长曲线(growth curve)

生长曲线 细菌的群体生长可分四个时期: 迟缓期: 适应过程,为生长繁殖作准备。 对数期 :生理特性较典型,研究生物学性状药敏实验。 迟缓期: 适应过程,为生长繁殖作准备。 对数期 :生理特性较典型,研究生物学性状药敏实验。 稳定期 :芽胞、内、外毒素、抗生素等产生。发生变异。 衰亡期:细菌死亡速度大于繁殖速度。

第二节 细菌的人工培养 一、培养基 人工配制的适合细菌生长繁殖的营养基质。 (一)按成分来分 1.合成培养基: 第二节 细菌的人工培养 一、培养基 人工配制的适合细菌生长繁殖的营养基质。 (一)按成分来分 1.合成培养基: 成分是已知的各种化学物质。如蔡氏培养基 2.天然培养基: 天然物质制成,化学成分不恒定、不确定,配制方便,营养丰富,较常用。 3.半合成培养基: 在天然物质的基础上加入某些已知成分。如培养真菌的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。

(二)按物理性状分: 1.液体培养基: 不加凝固剂,主要用于增菌培养和鉴定细菌。 2.半固体培养基: 液体培养基中加入0.2%-0.5%的琼脂,用于观察细菌动力、鉴定菌种和保存菌种。 3.固体培养基: 液体培养基中加入2%-5%的琼脂,用于微生物分离、鉴定及保存菌种等。

+ 2-5%琼脂 用于大量繁殖细菌 动力检查 固体培养基: 细菌的分离培养 + 0.2-0.5%琼脂 半固体培养基: 液体培养基

(三)按用途分: 1.基础培养基: 如肉汤培养基和普通琼脂培养基。 2.营养培养基:加入营养物质,如血平板 3.选择培养基:加入某些化学物质,抑制杂菌生长,如SS琼脂培养基。 4.鉴别培养基: 用于培养和鉴别细菌。如糖发酵管等。 5.厌氧培养基:用于厌氧菌的分离、培养和鉴别,如疱肉培养基。

二、细菌在培养基中的生长现象 1、液体培养基: 浑浊生长、沉淀生长、菌膜生长

在液体培养基中的生长情况 菌膜 多数呈均匀 混浊状态 少数链状菌 呈沉淀生长 专性需氧菌则在表面 生长,常形成菌膜

2、半固体培养基: 检查细菌动力 有鞭毛的细菌:可扩散,呈放射状或云雾状 无鞭毛的细菌:沿穿刺线生长

无鞭毛细菌则只能沿穿刺线呈明显的线状生长 在半固体培养基中的生长情况: 常用于观察细菌动力 有鞭毛的细菌可沿穿刺线 呈羽毛状或云雾状混浊生长 无鞭毛细菌则只能沿穿刺线呈明显的线状生长

3、固体培养基: 形成菌落 菌落:单个细菌分裂繁殖后形成的肉眼可见的细菌集团。 菌苔:多个菌落融合成片。 纯培养:挑取一个菌落转种到另一个培养基中。

在固体培养基中的生长情况: 划线接种 18-24小时培养后,可见菌落

液体 培养基 纯培养 (pure culture) 斜面 培养基 菌落(colony)

纯培养(pure culture) 斜面培养基 液体培养基 菌落(colony)

菌落的类型: (1)S型菌落(smooth colony) (2)R菌落(rough colony) (3)M菌落(mucoid colony)

三、人工培养细菌的意义 (一)在医学中的应用 1.细菌的鉴别与研究 2.细菌性疾病的诊断和治疗 3.生物制品的制备 4.细菌毒力分析及细菌学指标的检测

(二)其他方面的应用 1.在工农业生产中的应用 2.在基因工程中的应用

第三节 细菌的代谢产物及意义 一、细菌的分解代谢产物及生化反应 (一)细菌对糖和蛋白质的分解 (二)细菌的生化反应

生化反应 主要用于革兰阴性细菌的鉴别 糖发酵试验、甲基红试验、V-P试验、吲哚试验、硫化氢试验 吲哚(I)甲基红(M),VP(V),枸橼酸盐利用试验(C)合称为IMVC试验,用于鉴别肠道杆菌。

(1)糖酵解试验: 气泡 — + + 不发酵 产酸不产气 产酸又产气

产气肠杆菌 大肠杆菌 (2)甲基红(methyl red)试验: 葡萄糖 丙酮酸 乙酰甲基甲醇(红色) (pH<4.5) (—) (+)

(3)VP试验: 葡萄糖 丙酮酸 产气肠杆菌 大肠杆菌 乙酰甲基甲醇 OH- 二乙酰 + 含胍基 化合物 (—) (+) 红色(+)

产气肠杆菌 大肠杆菌 (4)枸橼酸盐利用(citrate utilization)试验: 枸橼酸盐 (碳源) 铵盐 (氮源) 碳酸盐 氨 培养基变为碱性 兰色(+) (+) (—)

(5)吲哚(indol)试验: 色氨酸 大肠杆菌 伤寒杆菌 吲哚(靛基质) + 二甲基氨 基苯甲醛 玫瑰吲哚(红色) (+) (—)

(6)硫化氢试验: 含硫氨基酸 伤寒杆菌 痢疾杆菌 硫化氢 + 铁离子或 铅离子 硫化铁或硫化铅 (黑色,+) (—) (+)

(7)尿素酶试验: 尿素 大肠杆菌 变形杆菌 氨 培养基变碱性 (红色,+) (—) (+)

二、细菌的代谢产物及意义 ★合成代谢产物: 毒素和侵袭性的酶 热原质(引起发热反应) 致病 抗生素 维生素 治疗 色素 细菌素 鉴别

内毒素(endotoxin):G- 菌细胞壁的脂多糖,菌体死亡崩解后游离出来; 毒素:包括内毒素和外毒素,是细菌重要的致病物质。 内毒素(endotoxin):G- 菌细胞壁的脂多糖,菌体死亡崩解后游离出来; 外毒素(exotoxin):多数G+ 菌和少数G- 菌在生长繁殖过程中释放到菌体外的蛋白质,毒性强于内毒素。

侵袭性酶: 亦为细菌重要的致病物质,能损伤机体组织,促使细菌的侵袭和扩散。

概念:是细菌合成的一种注入人体或动物体内能引起发热的物质。 热原质(pyrogen),又称致热原 概念:是细菌合成的一种注入人体或动物体内能引起发热的物质。 热源质 体温上升

特点:耐高温 消除方法:250℃高温干烤;用吸附剂和特殊石棉滤板吸附液体中的热原质;蒸馏法除之。 蒸馏最好

色素 一般在营养丰富、氧气充足、温度适宜的条件下产生,功能尚不清楚,有助于鉴别细菌。 有两类:水溶性色素和脂溶性色素 金黄色 红色

白色 柠檬色

第四节 细菌的分类和命名 细菌分类层次是界、门、纲、目、科、属、种 基本单位 种 :生物学性状基本相同的细菌群体构成一个菌种。 亚种、型 第四节 细菌的分类和命名 细菌分类层次是界、门、纲、目、科、属、种 基本单位 种 :生物学性状基本相同的细菌群体构成一个菌种。 亚种、型 属:性状相似的若干菌种。 株:不同来源的同一菌种。