学习项目5— 食品中金黄色葡萄球菌的检测 课程名称：微生物检验检测
当今社会生活水平大大提高，但是生活质量却在日趋月下，一系列的食品健康问题频频爆出。思念水饺“病菌门”风波还未平息，另一知名品牌“三全”的速冻水饺也被查出金黄色葡萄球菌超标。2011年11月，三全水饺在第三季度流通环节食品抽检中，发现有14批次的产品金黄色葡萄球菌不合格。在现有的国家标准中，“金黄色葡萄球菌”是“不得检出”（即不得含有）的项目。那么黄色葡萄球菌是什么呢？他对人体都多大危害呢？
目录 信息资讯 方案制定 项目实施 结果评价 01 信息资讯 02 方案制定 03 项目实施 04 结果评价
第一步 信息资讯 01 什么是大肠菌群 02 认识检测流程 03 菌落计数
第一步 信息资讯 01 什么是金黄色葡萄球菌 02 认识检测流程 03 结果报告
01 认识金黄色葡萄球菌 葡萄球菌的分类 以菌落色素分：金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、柠檬色葡萄球菌； 按生理化学组成：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌
01 认识金黄色葡萄球菌 培养特性 需氧及兼性厌氧。在普通琼脂培养基上生长良好，培养24h后，形成中等大小、圆形、表面光滑、无色半透明、边缘整齐的菌落，其菌落特征亦与大肠杆菌相似（无粪臭味）。
01 认识金黄色葡萄球菌 生物学特性 球形或稍呈椭圆形，直径1.0um左右，排列成葡萄状,或双球状或链球状。 葡萄球菌无鞭毛，不能运动。无芽胞，除少数菌株外一般不形成荚膜。易 被常用的碱性染料着色，革兰氏染色为阳性。
01 认识金黄色葡萄球菌 生化特性 能发酵葡萄糖、麦芽糖、甘露醇和山梨醇并产气；不发酵乳糖、蔗糖和侧金盏花醇；不产吲哚、V-P反应阴性；不水解尿素和对苯丙氨酸不脱氨。
02 认识检测流程 故事 （1）检测的意义 葡萄球菌可通过多种途径侵入机体，导致皮肤或器官的多种感染，甚至败血症。由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒，在进食含肠毒素食物后1～6小时即可出现症状，如恶心、呕吐、腹痛、腹泻，大多数病人于数小时至1日内恢复。
02 认识检测流程 （2）检测流程： 检样（样品处理）——增菌——平板分离——生化试验——革兰氏染色、镜检
03 结果观察 依据：GB4789.10-2010
平板分离 血平板 Baird-Parker平板
血浆凝固酶试验
第二步 方案制定 01 方案制定 02 阶段成果预测 03 方案检查
01 方案制定 根据国标，制定金黄色葡萄球菌检测流程 有位秀才第三次进京赶 考，住在一个经常住的店里。 考试前两天他做了三个梦，第 一个梦是梦到自己在墙上种白 菜，第二个梦是下雨天，他戴 了斗笠还打伞，第三个梦是梦 到跟心爱的表妹脱光了衣服躺 在一起，但是背靠着背。
02 阶段成果预测
03 方案检查 组间互评
第三步 项目实施 01 检测准备 02 样品检测 03 结果报告
01 检测准备——乳粉中金黄色葡萄球菌检测 7.5%NaCl肉汤、Baird-Parder平板、血平板、BHI （一）器材准备清单 01 检测准备——乳粉中金黄色葡萄球菌检测 培养基 7.5%NaCl肉汤、Baird-Parder平板、血平板、BHI 药品 革兰氏染色液一套、生理盐水、NaOH、HCl 设备 生物安全柜、显微镜、恒温培养箱（36℃） 器皿 移液管（1支10ml）、滴管 小试管2支、均质杯1个、锥形瓶(250mL)1个、平皿2套、载玻片1片 其他：试管架、酒精灯、消毒缸、报纸（一大一小）、洗耳球、记号笔、消毒棉球 注：桌面物品摆放有序且在指定位置，如记号笔和消毒棉球在小托盘里 所准备的物品归类摆放，如吸管筒、培养皿放入烘箱
02 样品检测——饼干中菌落总数的测定
02 样品检测——增菌 目的：（1）使处于濒死状态的沙门氏菌恢复活力 （2）增加数量（样品中的所有细菌数量） 方法：25克样品+225毫升7.5%NaCl肉汤 →36℃±1 ℃培养18～24小时 7.5%NaCl肉汤
02 样品检测——平板分离 采用四区划线法，将培养好的增菌液分别接种于血平板和Baird-Parker平板。置于合适的温度下培养，观察现象并及时记录。
02 样品检测——生化试验 ①从血平板或Baird-Parker平板上挑取可疑菌落接种5mL BHI，36℃±1℃培养18h～24 h。 ②吸取0.5mL生理盐水于冻干兔血浆中，振荡使之溶解，制成血浆液。再加入培养后的BHI0.2mL～0.3mL，振荡摇匀，36℃±1℃恒温箱或水浴锅内，每半小时观察一次，观察6 h，及时记录。 ③同时以血浆凝固酶试验阳性和阴性葡萄球菌菌株的肉汤培养物作为对照。
02 样品检测——革兰氏染色
第四步 结果评价 01 专业能力 02 方法能力 03 社会能力
谢谢观看