通过长期的实验,科学家们采用体细胞杂交技术获得了种属间杂种植株 如:“番茄—马铃薯”植株。

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通过长期的实验,科学家们采用体细胞杂交技术获得了种属间杂种植株 如:“番茄—马铃薯”植株。 “番茄—马铃薯”理想图

植物体细胞杂交技术过程 杂种植株 融合的原生质体AB 植物体细胞杂交技术原理: 细胞全能性、细胞膜流动性 植物细胞A 愈伤组织 杂种细胞AB 植物细胞的融合 植物组织培养 植物细胞A 融合完成的 标志 方法? 去 壁 杂种植株 愈伤组织 融合的原生质体AB 原生质体A 杂种细胞AB 人 工 诱 导 脱分化 再分化 再生出细胞壁 原生质体B 去 壁 植物细胞B 促进融合的方法? 植物体细胞杂交技术原理: 细胞全能性、细胞膜流动性

成果和未解决的问题 ? 动物细胞也能融合吗? 成果:克服生物远缘杂交不亲和的障碍,出现自然界没有的新品种。 未解决的问题:未能让杂种植物按照人们 的需要表现出两亲本的性状。 动物细胞也能融合吗? ?

2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体

一、动物细胞融合 细胞融合是正常的生命活动 两个细胞正在融合 受精作用

1、动物细胞融合过程 不同DNA的两个细胞 灭活病毒诱导细胞融合 融合后的细胞进行有丝分裂

思考题: 酶解法,如纤维素酶或果胶酶。 无需,因为动物细胞无细胞壁。 离心、电激等物理方法;PEG等化学方法。 1、植物体细胞杂交时首先应用什么方法去掉细胞壁? 酶解法,如纤维素酶或果胶酶。 无需,因为动物细胞无细胞壁。 离心、电激等物理方法;PEG等化学方法。 能 还可以利用灭活的病毒进行诱导 不能 2、动物细胞融合时需要进行去壁处理吗?为什么? 3、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些? 4、动物细胞融合能利用上述两类方法吗?还有其他方法吗? 5、植物体细胞杂交过程应先进行原生质体融合再进行组织 培养形成完整的个体,动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗?

巩固练习: 在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中, 正确的是( ) B A.结果是相同的. B.杂种细胞的形成过程基本相同. 正确的是(  ) A.结果是相同的. B.杂种细胞的形成过程基本相同. C.操作过程中酶的作用相同. D.诱导融合的手段相同. B

植物、动物细胞融合的比较 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性、 植物细胞全能性 原理 使细胞分散后诱 导细胞融合 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 细胞融合的方法 物理、化学方法 (同左) 灭活的病毒 物理(离心、振动、电刺激) 化学(聚乙二醇) 诱导方法 用途 主要用于制备 单克隆抗体 获得杂种植株

2、动物细胞融合的概念 思考:动物细胞融合有何应用? 动物细胞融合也称细胞杂交,是指两 个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤、生物新品种培育等重要手段,特别是杂交瘤技术,为制造单克隆抗体开辟了新途径

? 二、单克隆抗体 思考 1.什么是抗体?由何种细胞产生? 2.如何得到抗体? 3. 抗体有何特点?人体内有几种抗体? 浆细胞 刺激 抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 效应B淋巴细胞(浆细胞)产生抗体 抗原 动物体内 刺激 浆细胞 抗体 3. 抗体有何特点?人体内有几种抗体? 每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用 每一个淋巴细胞只能产生一种抗体,动物体内的效应B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体。 

二、单克隆抗体 如何获得化学性质单一、特异性强的抗体? 设计方案: 一个B淋巴细胞 只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞 能无限增殖 小鼠骨髓瘤细胞 能无限增殖 细胞融合 杂种细胞

二、单克隆抗体 1.制备过程:

细胞融合后培养液中有几种细胞? ? 1、B 2、BB 3、B瘤 4、瘤瘤 5、瘤 筛选 杂交瘤细胞 ? 筛选 产生特异性抗体的杂交瘤细胞

巩固练习: 科学家用小鼠骨髓细胞与B淋巴细胞融合,得到杂交细胞,经培养可以得到大量的单克隆抗体,所用的B淋巴细胞是来自( ) A.骨髓的B淋巴细胞. B.脾脏的能产生抗体的B淋巴细胞. C.胸腺的B淋巴细胞. D.脾脏经过筛选的,能产生单一抗体的B淋巴细胞. B

议一议: 1、本过程利用了哪些原理? 2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与效应B细胞融合? 免疫原理,细胞融合原理和动物细胞培养原理

二、单克隆抗体 2.单克隆抗体的应用: ①在基础理论研究中具有重要意义 ②在疾病诊断、治疗和预防方面,具有 特异性高、灵敏度高等优越性。 ③生物导弹

巩固练习: 由单克隆抗体研制而成的“生物导弹”有两部分组成,一是“瞄准装置”,二是杀伤性“弹头”,下列对此描述不正确的是( ) 由单克隆抗体研制而成的“生物导弹”有两部分组成,一是“瞄准装置”,二是杀伤性“弹头”,下列对此描述不正确的是(  ) A. “瞄准装置”是由识别肿瘤的单克隆抗体构成的. B. “弹头”是由放射性同位素、化学药物和毒素等物质构成的. C.“弹头”中的药物有选择杀伤肿瘤细胞的功能. D.“生物导弹”是利用细胞工程制备出来的. C

2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 小结 一.动物细胞融合: 1.理论基础:细胞的全能性 2.原理:细胞膜的流动性 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 一.动物细胞融合: 1.理论基础:细胞的全能性 2.原理:细胞膜的流动性 3.诱导方法:物理法、化学法、生物法(灭活的仙台病毒) 4.动物细胞融合的过程 二.单克隆抗体: 1.概念:由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。 2.单克隆抗体的制备: 3.特点:化学性质单一,特异性强,灵敏度高。 4. 单克隆抗体的应用: (1)诊断疾病:诊断病毒引起的疾病和用癌细胞抗原制备的单克隆抗体定位诊断。 (2)药物导向治疗:运用药物与单克隆抗体连接在一起制成“生物导弹” (3)分离和纯化抗原分子。

练一练: 右图是某同学根据杂交瘤技术的方法, 设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。 请据图回答: (1)该方案能达到预期效果吗?____, 原因是___________________________。 (2)图中②为________过程,常用 _________诱导剂。该细胞继承了_____ _______,因此不仅能分泌___________, 还有__________________的本领。 (3)破伤风杆菌的抗体最终可从 __________和___ __中提取。 (4) 该方案的目的是________________ _________。 不能 没有注射相应抗原处理 细胞融合 灭活病毒 双亲细胞 遗传特性 特异性抗体 无限增殖 培养液 小鼠腹腔 制备破伤风杆菌单 克隆抗体