平 台 介 绍.

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平台仪器汇总 平台团队组成 平台仪器介绍 平台管理制度

生命科学仪器及设备 仪器分类 仪器名称 样品处理设备 高速冷冻离心机,台式低温高速离心机 组织学设备 石蜡切片机,冷冻切片机 细胞分析仪器 流式细胞仪 分子生物学仪器 普通PCR仪, 实时定量PCR仪,细胞转染仪 神经生物学仪器 膜片钳系统 测读系统仪器 酶标仪,多功能酶标仪,化学发光仪,核酸蛋白测定仪 影像系统仪器 凝胶成像分析仪 显微系统仪器 倒置生物显微镜,倒置荧光显微镜,激光共聚焦显微镜 * 仪器分类源自:生物在线网;仪器名称源自:设备管理科

仪器的功能 仪器使用情况 使用仪器注意事项 仪器分类

样品处理设备 Thermo Micro 21R HC-3018R 名称 厂家 型号 备注 台式低温高速离心机 高速冷冻离心机 科大公司 最高转速:14800rpm;控温范围:-9℃~40 ℃ 转头容量:1.5,2.0 ml 微量离心管 高速冷冻离心机 科大公司 HC-3018R 最高转速:23000rpm;控温范围:-20℃~40 ℃ 转头容量: 此两款仪器属于实验室常规仪器,日常使用量较大。注意事项,使用后及时清理,并且开盖散热,达到室温再关,防止温度控制器损坏。

组织学设备 Leica RM2235 Thermo Shandon 名称 厂家 型号 备注 石蜡切片机 冷冻切片机 切片范围1-60μm,最小步进1μm;标本水平位移 30mm;标本垂直位移 70mm;标本回缩200μm;最大 标本尺寸45 ×50mm. 冷冻切片机 Thermo Shandon 切片厚度:1-60μm。1-20μm,以1μm为增量 20-60μm,以5μm为增量。速冻台温度:-55℃ 石蜡切片记注意事项,切板右侧和机器右侧有两个锁,请同学们用完之后将锁锁紧,开始使用时把锁打开。

细胞分析仪器—流式细胞仪 BD公司 Calibur 成熟的检测指标: 细胞水平: 名称 厂家 型号 备注 流式细胞仪 BD公司 Calibur 流式细胞仪功能:对细胞进行定性、定量、多色分析(样本量少)、分选(不具备分选功能) 成熟的检测指标: 细胞水平: 细胞凋亡:细胞周期(DNA含量);自噬功能:MDC; 线粒体膜电位,细胞膜通透性,细胞增殖活力,淋巴细胞表面分型,干细胞表型,肿瘤细胞耐药性。 分子水平: 细胞内钙,细胞内NO水平,活性氧释放,谷胱甘肽,各种蛋白的表达。 总之,无论细胞样本、组织样本、甚至无细胞体系,只要所关注的指标有相应的荧光试剂,并且能够处理成颗粒状物质,就可以定量检测

流式细胞仪的经典数据 细胞等高线和等密度的图像处理 细胞周期的三维图 细胞多色分析的散点图例 直方图的叠加处理 我们在完成上述操作的同时,可以做图像处理,再发文章能更好的展示获得的科研数据。

分子生物学仪器 Bio-Rad ALS1296 Agilent MX3000P 名称 厂家 型号 备注 普通PCR仪 实时定量PCR 检测重现性差。双48模块可以单独运行。 实时定量PCR Agilent MX3000P 依靠荧光信号的扩增进行检测。iQ5 软件的操作的 ppt,中文说明书 使用时注意室温的恒定,不能低于16度,并且防止环境的污染。打开仪器盖子有一个96孔板的盖子,一定把盖子打开之后再放样品。

PCR仪功能 RNA定量-基因表达差异 DNA定量 单个或多个基因地表达谱分析 病原体定量检测 –不同组织、器官 转基因拷贝数的检测 –不同时期 –不同处理 DNA定量 病原体定量检测 转基因拷贝数的检测 SNP扫描 疾病相关基因鉴定,如牛皮癣、哮喘 相关基因SNP的鉴定 SNP检测与临床表现的相关性,如抗 高血压药物疗效的个体差异 药物副反应的预防,如麻醉意外 基因突变分析 单基因遗传病诊断,如血友病 物种鉴定、菌株鉴定 各种病毒,细菌,病毒–病原体检测, 如炭疽菌 是指在染色体基因组水平上单个核苷酸的变异引起的DNA序列多态性。 SNP称为单核苷酸多态性 singl enucleotide polymorphism

影像系统仪器 Western PCR凝胶的图 名称 厂家 型号 备注 凝胶成像系统 UVP BioSpectrum 适用于化学发光(Western),荧光成像(如PCR凝胶的EB),以满足不同荧光染色的核酸胶和蛋白胶成像。软件应用于色度分析,斑点计数,微孔板定量,放射自显影等,是一款具有高灵敏度,低检出限的凝胶成像系统。内置独特的可折叠式白光转换板,用于白光成像,同时可以作为化学发光样品平台,与EB污染开样品台高度可通过软件调节。 PCR凝胶的图 总开关一定要用完关闭,开门里有一个火车票,是工程师留下的放置胶片的位置。 Western

测读系统 Thermo Varioskan Flash Berthold LB960 Eppendorf 名称 厂家 型号 备注 多功能酶标仪 Thermo Varioskan Flash 波长范围200-1000nm,具备光吸收和荧光顶读检测功能,一个自动进样器。温控范围室温+4℃—45 ℃。 化学发光仪 Berthold LB960 检测灵敏度全球最高,空间干扰低,2个自动进样器。 核酸蛋白测定仪 Eppendorf BioPhotometer plus 两个比色皿杯,光路长1mm,0.2mm。 美国伯乐,德国公司艾本德。酶标仪必须注意板子和卡槽一定固定好,而且我们只识别96孔板的样品。不可用培养皿之类的量器。化学发光仪进样器头需要清洗浸泡干净。石英杯需要擦拭干净,用灭菌的纯净水清洗。

测读系统功能 细胞生物学相关研究: 各种类型的检验检疫: 药学相关研究: 功能基因组和蛋白质组学研究: 细胞活力、细胞增殖 细胞吸附、细胞迁移、细胞吞噬 细胞凋亡、细胞转导 信号传导通路,包括钙流、酪氨酸激 酶受体、G蛋白偶联受体通路、TNF-受体通路 第二信使cAMP和cGMP等 各种类型的检验检疫: 临床检测、血清学分析 环境监测,如氮氧化合物、磷酸盐等 动植物检验检疫、食品资源评价,如各种病 原体、微生物、激素、蛋白抑制因子等 化合物分析,如内毒素,NADH测定等 药学相关研究: 高通量药物筛选 GPCR受体、激酶、核受体相关研究 药物耐受途径研究 药物毒理评估 功能基因组和蛋白质组学研究: 核酸和蛋白质的直接荧光定量,分子间相互作用,如蛋白质与蛋白质之间,核酸与蛋白质之间 报告基因表达。 蛋白质的磷酸化 基因分型与突变检测 酶动力学与活性测定 分子定向进化

神经生物学仪器—膜片钳 Axopatch 200B 名称 厂家 型号 功能 膜片钳 电压门控通道的检测, 配体门控的检测 电压门控离子通道电流的检测 1 nA 10 ms -120 mV +60 mV -90 mV 2.动作电位的检测

显微系统仪器 Leica BX41-32 Olympus IX71 Nikon C2 Si 名称 厂家 型号 备注 倒置生物显微镜 IPP软件可以做免疫组化光密度值分析,图像灰度值分析,细胞计数,图像拼接等,测量上可以检测任意线长度,任意面积,角度周长等。 倒置荧光显微镜 Olympus IX71 调试过,现在就用 激光共聚焦显微镜 Nikon C2 Si 普通荧光显微镜可以满足绝大多数实验的要求,共聚焦的分辨率更好些,是其1.4倍 仪器需要光路的校正,同学们要注意,613仪器粘贴小帖的的地方不可动。荧光灯是很贵的耗材,寿命200-300小时,使用前预热半小时,再次使用一定注意间隔时间,半小时以上

激光共聚焦显微镜的应用 利用Confocal进行空间定位: 定量测量: 激光刺激相关应用: 1) 免疫荧光标记(单标、双标或三标)的定位如:细胞膜受体或抗原的分布,微丝、微管的分布、 两种或三种蛋白的共存与共定位、蛋白与细胞器的共定位,三维重构图像 ; 2)细胞凋亡机制;   3)荧光原位杂交, 杂色体基因定位 4)细胞骨架装配:分析正常及癌变细胞中细胞骨架与核改变之间的关系; 5)细胞黏附行为……  定量测量: 1)活细胞或组织内游离Ca2+浓度的测量  2)药物进入细胞的定位分布及定量、动态过程;    3)活细胞内H+浓度的测量; 4)自由基的检测;  5)荧光共振能量转移(FRET)……   激光刺激相关应用:  1)FRAP(荧光漂白后恢复) 、 FLIP(荧光漂白中的损失)   2)光活化   3)光转化  

激光共聚焦显微镜的经典图像

SOP(标准操作规程)

专职人员 兼职人员 售后工程师团队 团队组成

专职人员 平台主任:邹莉波教授 平台管理员:赵松岩,历学 613工作 每天早上检查管理系统和登记本的记录情况,和实验室卫生打扫 平台主任:邹莉波教授 平台管理员:赵松岩,历学 每天早上检查管理系统和登记本的记录情况,和实验室卫生打扫 检查仪器的使用情况,负责日常维护,仪器维修和保养 处理和搜集实验中学生遇到应用问题,定期组织应用培训 建立仪器的电子档案和书面档案,维修记录,保养记录 518工作 每周开放四天流式细胞仪 每周开放一天共聚焦显微镜 613工作

兼职人员 激光共聚焦:赵剑 流式细胞仪:牟艳华 膜片钳:李春莉 冷冻切片机:董迎旭

售后工程师团队 影像系统:张明辉 流式细胞仪:姚文兵 测读系统:朱亚超

平台管理规范

平台管理规范 1. 公共仪器平台开放的时间:周一至周五上午:8:30-12:00,下午:1:30-5:30,请按此时间安排实验。如果有特殊情况,公休日或平日晚上要用平台者,请在公休日前一天或平日15:00-16:00预约。 2. 平台仪器优先满足本院药理学科教师及研究生、专题生使用。平台由专人负责仪器,为科研实验服务;若操作者独立上机操作,必须具有使用相关仪器的经验或提前接受培训并经考核合格才能上机实操。不得用仪器设备的计算机做与仪器功能无关的工作,严格按各台仪器的操作规程操作。 3. 任何操作人员不得私自配制公共实验室的钥匙,违者将受到严肃处理。仪器使用前、后,按照规程开启和退出管理系统。认真填写登记表上的每一项内容。试验后做好实验清洁工作,操作者随手带门,每天最后离开平台的同学认真检查水电等设施。

平台管理规范 4. 平台资料档案应由专人负责,仪器设备相关的资料、说明书、实验纪录等均建立档案管理,并由管理员进行管理,如有需要阅读同学,相关资料不可拿出平台阅读,或复印之后立刻归还。 5. 平台会定期联系厂家售后人员进行仪器讲解和问题解答,定期开放小组研讨,请仪器使用较好的同学主持小组会议,各课题组负责老师请分配一名学生与平台负责老师联络。平台建立QQ群,群号码28011196,欢迎同学们资源分享,共同探讨仪器使用问题。 6. 使用流式细胞仪,激光共聚焦显微镜的同学须提前一周预约,由指定教师负责测定,任何人不得擅自动使用该仪器。使用冷冻切片机,膜片钳的同学请提前与相关负责教师联系。

为您的科研工作提供满意的服务 请各位老师,遇到问题和我们沟通。 请各位同学自觉地爱护公共仪器,遵守平台管理制度。 请同学们合理安排时间,尽量在工作时间完成实验。 请各位同学使用前和使用后认真检查仪器,如有问题,及时上报。