实验前: 资料准备 多查文献,查足文献 国外为主,掌握动态 国内为辅,词汇学习 成竹在胸
实验前: 实验技术准备 勤学好问,不耻上问——多向已 掌握该技术的人学习和请教 书山有路勤为径——多认真阅读 经典的实验技术指南,如《分子 克隆实验指南》
实验前: 实验技术准备 前人栽树,后人乘凉——查找相 关文献 查找PCR引物(注意核对序列) 查找核酸探针序列(AP-1) 查找实验步骤(EMSA)
实验前: 实验设计:磨刀不误砍柴功 实验组、对照组设置完整合理
实验前: 实验设计 绘出实验加样草图,具体到每 个孔加什么、何时加、加多少
实验中: 预实验 同一批次小鼠,先每组选择 2-3只摸索致死剂量 不同批次的试剂 随机化原则 实验结果稳定的保证 不等于随便和随手抓
实验中: 该繁则繁 抽提RNA时戴手套 该简则简 无须无菌操作的步骤 无需防止RNA酶污染的步骤
实验中: 该快则快 开始调节pH值 该慢则慢 细胞培养时的无菌操作 RT-PCR时的加样
实验中: 出现加样错误时 及时弥补(如调换加样孔 ) 做好记录 充分利用好时间 实验间隙写实验记录
实验中: 注意自我防护 细菌 致癌物质:EB、DEPC 辐射:γ-32P 具有腐蚀作用的试剂:强酸 有毒物质:丙烯酰胺
实验后: 及时记录,防止遗忘 (好记性不如烂笔头) 及时总结,不要盲目向下进行 (欲速则不达) 更换细胞(THP-1、U937、PBMC) 调整实验思路 更换细胞(THP-1、U937、PBMC) 重新配试剂 (EMSA溶液A、乙酸铵)
实验后: (三人行,必有我师 ) 向高手请教和复习文献资料 相信自己的实验结果 鼠CpG-N ODN→人CpG-S ODN 抗TLR9抗体并不减少CpG-S ODN 诱导的TNF-a 释放
谢谢!