微生物之生長曲線
1 微生物生長模式 1.1 生殖(Reproduction) 微生物在適當環境下攝取足夠養分,使細胞長大,也會進行繁殖,因此 生長 包含: 1. 個別細胞之生長與繁殖 2. 微生物族群之增加 微生物生殖分為: 1. 有性生殖(sexual reproduction): 雌、雄細胞發生融合及交換遺傳物質 2. 無性生殖 (asexual reproduction): 出芽生殖(budding) 、二分裂生殖法(binary fission) 、分支生殖法(branching) 、絲狀生殖 法(mycelial growth) 或尖端生長(apical growth)
1.2 微生物生長之測定方法 一、細胞數量之測法 1. 抹片顯微鏡計數法 2. 特殊玻片顯微鏡計數法:血球計數器 3. 平板測定法:培養皿,菌落30-300個 4. 薄膜過濾計數法: 0.45µm濾膜,菌落 <200個 二、細胞重量之測法 1. 細胞乾重法 2. 濁度法 3.氮含量測定法 三、菌體活性測定 ATP、脫氫酵素活性、氧氣攝取率
1.3 微生物之生長曲線 一、以菌數和時間作圖 在批次培養情形下,可以菌數和時間作圖,得生長曲線。
實驗以批次培養方式進行 遲滯期(lag phase): 微生物正適應新環境,吸收養份以合成新細胞,細胞雖變大,但仍未分裂,故細胞數目無明顯增加。 對數期(logarithmic phase): 細胞呈幾何級數增加,菌之生理較一致,為微生物實驗最佳時期。 穩定期(stationary phase): 微生物代謝,消耗養分、同時產生代謝毒物,造成新分裂與死亡之菌數約略相等,因此菌數沒太大改變。 死滅期(death phase): 養分已漸消耗完畢,而代謝毒物累積更多,造成新生菌數遠小於死亡菌數,因此菌數遞減。
二、以比生長速率和時間作圖 比生長速率 µ =
步驟說明: 取0.1g之酵母菌加入100mL培養液; 取菌液加入比色管,測其吸光值,此時為0時之吸光值;同時將部份菌液做連續稀釋,選一濃度之菌液做塗碟或倒碟,次日計算其菌數; 加入2g葡萄糖(glucose)至菌液中,經15-20分後,再取菌液測其吸光值, 如此重覆至少6次。每次皆用部份菌液做菌數計算,如上所述。 完成後以吸光值跟時間作圖,吸光值及總菌數作圖(並求其直線方程氏)及總菌數跟時間作圖; 討論各圖之意義。 如已作過直接計數法之組,應以當時所得直線方程式結果,將此次之吸光值,代入,求菌數,比較兩者之結果。