紫外分光光度计 湖南科技学院 化学与生物工程学院
苯甲酸浓度的测定： (一)配制标准溶液： 配制浓度为1mg/L的标准溶液，移取标准溶液至1号瓶；配制浓度为2mg/L的标准溶液，移取标准溶液至2号瓶；配制浓度为4mg/L的标准溶液，移取标准溶液至3号瓶；配制浓度为6mg/L的标准溶液，移取标准溶液至4号瓶；配制浓度为8mg/L的标准溶液， 移取标准溶液至5号瓶.
(二)定性测定 1.打开分光光度计电源，启动电脑，启动工作站软件，点击“光谱扫描”，点击“光谱扫描参数设置”图标，设置“光度方式”为“Abs”，设置扫描参数“起点”为“500nm”，设置扫描参数“终点”为“200nm”，设置速度为“快”，设置“间隔”为“1nm”，设置“最大”为“1.5”，设置“最小”为“0”，点击确定。 2.点击实验室桌面上的比色皿盒，取两支比色皿。 3.打开紫外分光光度计，打开池门，点击蒸馏水，所取样品为蒸馏水。将蒸馏水加至比色皿溶剂约2/3处，放入参比池；将蒸馏水加至比色皿溶剂约2/3处，放入样品池；关闭池门。
4.点击基线图标，进行基线校正，点击“确定”；基线校正完毕，点击“确定”。 5.打开分光光度计，打开池门，取出样品池中比色皿，并倒掉溶液；点击1号标准样品，将1号标准样品溶液加入比色皿，并放入样品池，关闭池门。 6.点击“开始”图标，进行光谱扫描，点击确定，光谱扫描完毕后，点击“确定”。 7.点击“峰值检出”图标。检出曲线中最大峰值所对应的波长，即为苯甲酸特征波长。点击“文件”菜单，保存光谱扫描文件。
(三)定量测定 1.点击“定量”测定，然后点击“定量测定参数设置”图标，设置“测量方法”为“单波长法”。在“主波长”后输入苯甲酸特征峰所对应的波长，点击“校正曲线”页，设置【曲线方程】为“Abs=f(c)”，设置【方程次数】为“一次”，设置【浓度单位】为“mg/L”，单击确定完成参数设置。 2.打开紫外分光光度计，打开池门，取出样品池中比色皿，并倒掉溶液；选择蒸馏水，将空白样品加入比色皿，并放入分光光度计样品池，关闭池门；单击“校零”按钮，进行校零，点击“确定”，点击“确定”。
3.校零完毕后，进行1号样品的测定；打开紫外分光光度计，打开池门，取出样品池中比色皿，并倒掉溶液，选择1号样品，将1号标准样品溶液加入比色皿，并放入样品池，关闭池门。 4.在工作站软件“标准样品”一栏填写编号和1号标准溶液浓度，点击“开始”按钮进行吸光度测定，点击“确定”，点击“确定”。 5.依照上述方法测定2、3、4、5号标准溶液。 6.把6号容量瓶中的未知样溶液加至比色皿，放入样品池；在工作站软件“未知样品”一栏填写编号；点击“开始”按钮进行吸光度测定。
再次将6号容量瓶中的未知样溶液加至比色皿，放入样品池，进行第二次平行测量。两次测定平均值即为未知样苯甲酸浓度。 7.点击“文件”菜单中的“保存”，保存定量测定文件。 (四)实验结束 1.打开分光光度计，打开池门，取出参比池和样品池中比色皿，并倒掉溶液，关闭池门。将比色皿装入比色皿盒。 2.关闭工作站软件，关闭计算机，关闭紫外分光光度计电源。