生物 选修3 现代生物科技专题
专题2 细胞工程
2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体· 一、动物细胞融合： 1、概念：《选修3》P.52 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 2、原理： 膜具有一定的流动性
仙台病毒 3、过程： （与植物细胞融合的基本原理相同） 物理法 化学法 诱导方式 生物法： 灭活的病毒 丧失感染性 （不感染细胞） 紫外线 保留融合活性 （诱导细胞融合）
细胞完成融合的标志： 细胞核融合为一个核
4、动物细胞融合与植物细胞杂交的主要区别： 植物：主要是聚乙二醇（PEG） ⑴促融剂不同： 动物：除PEG外，还有灭活的病毒 ⑵植物细胞融合过程中，首先要除去细胞壁，制备原生质体；而动物细胞无细胞壁，可直接诱导融合 见《步步高》P.216——表
5、动物细胞融合的应用： 制备单克隆抗体
植物、动物细胞融合的比较 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 细胞膜的流动性、 原理 细胞膜的流动性 植物细胞全能性 去除细胞壁后诱 使细胞分散后诱 细胞融合的方法 导原生质体融合 导细胞融合 物理（离心、振动、电刺激） 物理、化学方法 诱导方法 （同左） 灭活的病毒 化学（聚乙二醇） 用途 获得杂种植株 主要用于制备 单克隆抗体
二、单克隆抗体： 提问 ？ ⑴其由何种细胞产生？ ⑵主要分布在哪里？ ⑶如何得到抗体？
不仅产量低、纯度低而且制备的抗体特异性差，灵敏度低 效应B 细胞 刺激 抗原 动物体内 抗体 不仅产量低、纯度低而且制备的抗体特异性差，灵敏度低 效应B 细胞 刺激 抗原 动物体内 抗体 抗体不纯 抗原不纯 筛选单一的效应B细胞 （但不能在体外大量增殖产生大量的抗体）
1、单克隆抗体的制备： ①将抗原注入小鼠体内获得效应B淋巴细胞 获得杂交瘤细胞 ②效应B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 ③用特定培养基筛选出杂交瘤细胞 ①筛选能够产生所需抗体的细胞群 动物细胞培养 ②再在培养液或小鼠腹腔中培养 提取单克隆抗体 从培养液或小鼠腹水中提取
细胞融合后培养液中有几种细胞 B BB B瘤 瘤瘤 瘤 筛选杂种细胞 已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两条DNA合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加PEG促融，获得杂种细胞。
在整个制备的过程中要经过几次筛选？ Ⅰ筛选得到杂交瘤细胞，Ⅱ筛选先在多孔培养板上，在每孔只有一个杂交瘤细胞下培养筛选出特异抗体的细胞群
2、单克隆抗体的应用: 应用: 疾病的诊断、治疗和预防。 优点:特异性强、灵敏度高。 实例: ①各种癌症、肝炎病毒、SARS病毒、细菌 及血吸虫等数百种疾病的诊断； ②在疾病治疗方面，单克隆抗体犹如人体卫士,能识别“自己”与“异己”，一旦发现 致病因素便与之结合将其杀死。 ③若在单抗上带上抗癌药物制成“生物导弹”，将药物定向带到癌细胞所在部位，既消灭了癌细胞又不会伤害健康细胞。