《机能实验学》 小鼠缺氧及药物对耗氧量的影响 Hypoxia 机能实验中心.

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《机能实验学》 小鼠缺氧及药物对耗氧量的影响 Hypoxia 机能实验中心

小鼠缺氧及药物对耗氧量的影响 实验 目的 复制乏氧性缺氧和血液性缺氧的动物模型; 观察不同类型缺氧的动物表现; 观察在乏氧性缺氧条件下,不同药物对小鼠耗氧量的影响。

实验原理 乏氧性缺氧(hypoxia hypoxia) 血液性缺氧(hemic hypoxia) 分类: 乏氧性缺氧(hypoxia hypoxia) 血液性缺氧(hemic hypoxia) 循环性缺氧 (circulatory hypoxia) 组织性缺氧 (histogenous hypoxia)

实验原理 乏氧性缺氧:多由于吸入气体的氧分压过低、外呼吸功能障碍或静脉血分流入动脉血引起。 血液性缺氧:主要由于血红蛋白的数量减少或性质改变。 贫血 一氧化碳中毒 高铁血红蛋白血症

实验材料 器材 试剂 CO发生装置 乙酸 浓硫酸 乏氧瓶 美蓝 钠石灰 亚硝酸钠 量筒 生理盐水 移液管 普萘诺尔 注射器 氯丙嗪 去甲肾上腺素

实验对象 小鼠,7只,雌雄不限 注意:小鼠分组,标记

加热时注意浓硫酸滴速,不可过热导致液体沸腾 实验方法 ⒈血液性缺氧 CO中毒 ⑴取小鼠1只放入广口瓶中,观察其一般表现、呼吸及皮肤黏膜颜色; ⑵广口瓶通过橡皮管与CO发生装置相连,使浓硫酸逐滴加入甲酸中,酒精灯加热产生CO; HCOOH 浓H2SO4 △ H2O+CO↑ ⑶记录小鼠存活时间,观察其皮肤黏膜颜色变化。

药物提前抽好,注射间隔时间不宜过长;可分部位给药减少药液漏出 实验方法 亚硝酸钠中毒性缺氧 ⒈血液性缺氧 ⑴取小鼠2只(体重相近),标记,观察其一般表现、呼吸及皮肤黏膜颜色; ⑵甲鼠:ip 亚硝酸钠0.3ml/只+NS 0.3ml/只 乙鼠: ip 亚硝酸钠0.3ml/只+美蓝 0.3ml/只 Hb-Fe2+ 氧化剂 还原剂 Hb-Fe3+-OH ⑶记录2只小鼠存活时间,观察其皮肤黏膜颜色变化。

实验方法 ⒉药物对耗氧量的影响 ⑴取小鼠4只(体重相近),称重、标记; ⑵对4只小鼠分别给药→室温下放置15分钟→放入乏氧瓶中→通过移液管观察小鼠10分钟的耗氧量。 甲鼠:ip NS 0.3ml/10g 乙鼠:ip 0.025%氯丙嗪(CPZ) 0.3ml/10g 丙鼠: ip 0.1%普萘洛尔(prop) 0.3ml/10g 丁鼠: sc 0.05%异丙肾上腺素(Isop) 0.4ml/10g 注意给药间隔时间的掌控

实验结果 表1. 不同类型缺氧小鼠的表现和存活时间 皮肤黏膜颜色 存活时间 CO中毒 NaNO2+NS NaNO2+美蓝

鼠号 体重(g) 药物 剂量(ml/10g) 耗氧量 实验结果 表2. 不同药物对小鼠耗氧量的影响 鼠号 体重(g) 药物 剂量(ml/10g) 耗氧量 x _ ip NS ip 0.025% CPZ ip 0.1% prop sc 0.05% Isop 0.3 0.4 甲 乙 丙 丁

注意事项 CO发生装置浓硫酸应逐滴加入甲酸中, 不可过热以致液体沸腾; 注意观察小鼠的表现,不要忘记录小鼠的 存活时间; 动物要做好标记以免混淆;所选小鼠体重应 尽量一致,避免由于体重差异造成结果不准确; CO发生装置浓硫酸应逐滴加入甲酸中, 不可过热以致液体沸腾; 注意观察小鼠的表现,不要忘记录小鼠的 存活时间; 复制低张性缺氧动物模型时,整套装置必 须保证密闭性。

讨 论 一氧化碳中毒 Hb性质改变 皮肤、粘膜呈HbCO的樱桃红色。 CO抑制红细胞内糖酵解,2,3- DPG生成减少,氧离曲线左移。 讨 论 一氧化碳中毒 Hb性质改变 CO抑制红细胞内糖酵解,2,3- DPG生成减少,氧离曲线左移。 CO同部分血红素结合将增加其余血红素对氧的亲和力,使解离曲线左移。 碳氧血红蛋白( HbCO)形成,Hb失去携氧能力。 皮肤、粘膜呈HbCO的樱桃红色。

讨 论 亚硝酸钠中毒 Hb性质改变 皮肤、粘膜呈 Fe3+Hb的青石板色。 美蓝是还原剂,将还原成,保护Hb的正常结构,恢复其携氧能力。 讨 论 亚硝酸钠中毒 Hb性质改变 美蓝是还原剂,将还原成,保护Hb的正常结构,恢复其携氧能力。 NaNO2是强氧化剂,使Fe2+→ Fe3+,高铁血红蛋白形成,因 Fe3+ 与OH结合牢固,Hb失去携氧能力。 Hb分子中的4个Fe2+部分氧化成Fe3+后,使剩余Fe2+与氧的亲和力↑,氧解离曲线左移,组织缺氧。 皮肤、粘膜呈 Fe3+Hb的青石板色。

讨 论 药物的作用机制 CPZ:(-)中枢多巴胺受体,使机体活动量↓, 基础代谢率↓,故耗氧量↓。 讨 论 药物的作用机制 CPZ:(-)中枢多巴胺受体,使机体活动量↓, 基础代谢率↓,故耗氧量↓。 prop:(-)心脏β-R,产生负性变时、变力、 变传导作用,使心率↓,心肌收缩力↓, 故耗氧量↓。 Isop:(+)心脏β-R,使心率↑,心肌收缩力 ↑,故耗氧量↑。

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