不同样品核酸提取、扩增、荧光定量PCR完美解决方案

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1 不同样品核酸提取、扩增、荧光定量PCR完美解决方案
Fax： Tel： 北京百泰克生物技术有限公司（北京市海淀区上地信息路15号）

2 不同样品核酸提取、扩增、荧光定量PCR完美解决方案
---核酸提取攻略 北京百泰克生物技术有限公司（北京市海淀区上地信息路15号）

3 内容概要 不同样品RNA提取最适方法 RNA纯度与质量考察 RNA提取常见问题及解决方案 常见样品DNA提取 特殊样品DNA提取

4 RNA提取流程 酒精沉淀 或介质吸附 样品 裂解液 液氮研磨 或其他方法处理 抽提 离心洗涤 干燥溶解 或洗脱 细胞裂解 上层溶液

5 RNA提取常用方法---沉淀方法 沉淀法：异丙醇或乙醇 介质吸附法： 吸附材料 原理 硅基质 高盐低pH值结合核酸，低盐高pH值洗脱
阴离子交换树脂 低盐高pH值结合核酸，高盐低pH值洗脱 磁珠 磁性微粒挂上不同基团可吸附并携带RNA

6 RNA提取常用方法---裂解方式 异硫氰酸胍/苯酚法 在变性剂异硫氰酸胍的作用下，细胞被裂解，同时核蛋白体上的蛋白变性，核酸释放；
释放出来的DNA和RNA由于在特定pH下溶解度的不同而分别位于整个体系中的中间相和水相，从而得以分离； 有机溶剂抽提，沉淀，得到纯净RNA。 胍盐 /β-巯基乙醇 盐酸胍裂解样本 ，抑制 RNase 的活性 ； β-巯基乙醇变性蛋白

7 BioTeke的RNA提取试剂具有明显的优势
在经典试剂的基础上，不断升级。 多款高品质的RNA提取试剂： Tri pure （Trizol） RNApure（Trizol法的升级产品）

8 组织/细胞样品RNA提取 材料： 方法： BioTeke RNApure高纯总RNA 结果： 小鼠肝脏组织 快速提取试剂盒 0.1g样品组织
图：小鼠肝脏组织RNA

9 RNApure 高纯总RNA快速提取试剂 1 2 3 图片说明： 1 BioTeke RNAclean
图片说明： 1 BioTeke RNAclean 2 BioTeke TRIpure (TRIzol法) 3 BioTeke RNApure 离心柱型 (注：本图实验材料为植物叶片）

10 同一样品基因组DNA和RNA分提 原理： 根据基因组DNA和RNA在硅基质膜上的结合条件不同，用两根离心吸附柱分别提取基因组DNA和RNA。

11 特殊样品RNA提取---血液 图1全血样品溶解在TRI pure LS Reagent试剂后的状态
图2泳道1与2，在-80度保存一个月后的提取结果。M泳道：标准的Hela细胞RNA

12 多糖多酚植物样品RNA的提取 材料： 方法： 结果： 试剂盒适用范围：
松针、冬青、香蕉、木菠萝和杨树 方法： 通用植物总RNA提取试剂盒 （离心柱型） 0.1g样品组织 结果： 得率：约35-40μg 纯度：OD260/OD280＝ 试剂盒适用范围： 水稻种子、小麦种子、玉米种子、高粱种子、拟南芥种子、大豆种子、苹果、葡萄、香蕉、棉花、龙眼、荔枝、各种草坪牧草植物、各种树木、各种花卉等绝大多数植物 图片说明：1、2 杨树；3、4 香蕉；5、6 松针；7、8 冬青；9 、10 木菠萝

13 Micro RNA提取 提取原理： 传统方法：先提取总RNA然后跑胶回收或沉淀Micro RNA。
新方法：通过裂解液裂解和酸酚分层后过柱两次，一次去除基因组DNA和大片段RNA，后一次吸附Micro RNA，然后漂洗收集。 新方法特点： 高效分离小RNA，同时分离总RNA 可用于miRNA、siRNA和snRNA的分析 适用各种来源的样品 提取时间短，约30分钟完成实验 图片说明：1、2DNA和大RNA；3、4Micro RNA (材料为小鼠肝脏组织)

14 RNA纯度与质量考察 生物大分子具有共轭双键，在260和280nm波长处有光吸收峰。
纯度：紫外分光光度计测定所提总RNA在260nm和280nm波长处的光吸收，以A260/A280的比值来判断总RNA的纯度。 质量：甲醛变性琼脂糖凝胶电泳鉴定。

15 RNA提取常见问题及解决方案 RNA 的降解 OD260 /OD280 比值偏低 电泳带型异常 下游实验效果不佳

16 RNA的降解 新鲜细胞或组织： 裂解液的质量 外源RNase的污染 裂解液的用量不足 组织裂解不充分
建议在液氮条件下将组织碾碎，并且匀浆时使用更多裂解液。

17 RNA的降解 冷冻样品： 样品取材后应立即置于液氮中速冻，然后可以移至-70℃冰箱保存。样品要相对小一点； 先用液氮研磨，再加裂解液匀浆；
样品与裂解液充分接触前避免融化，研磨用具必须预冷，研磨过程中及时补充液氮。

18 RNA的保护 采集样品的保护： 通常用液氮保存
样品保护剂RNAfixer,样品浸泡其中可以在37℃保存一天，25℃一周，4℃一个月，-20℃一年左右。 环境中RNase的清除： DEPC处理各种实验器具 RNAsafe对溶液中RNase进行清除。 RNA酶喷雾清除剂，可对固体表面的RNase起到清除的作用，更大程度上避免RNase的污染。

19 OD260 /OD280 比值偏低 蛋白质污染： 不要吸入中间层及有机相，加入氯仿后首先混匀，并且离心分层的离心力和时间要足够。
减少起始样品量，确保裂解完全、彻底 解决办法:重新抽提一次，再沉淀，溶解。 苯酚残留：

20 OD260 /OD280 比值偏低 抽提试剂残留： 确保洗涤时要彻底悬浮 RNA，并且彻底去掉 75% 乙醇。
解决办法:再沉淀一次后，溶解。 设备限制： 测定OD260 及OD280 数值时，要使OD260 读数在 之间。此范围线性最好。 用水稀释样品： 测 OD 时，对照及样品稀释液请使用 10 mM Tris，pH 7.5。用水作为稀释液将导致比值的降低。

21 电泳条带异常 非变性电泳： 上样量超过 3μg，电压超过 6V/cm，电泳缓冲液陈旧，均可能导致 28S 和 18S 条带分不开。
变性电泳条带变淡： EB 与单链的结合能力要差一些，故同样的上样量，变性电泳比非变性电泳要淡一些； 甲醛的质量不高 。

22 下游实验效果不佳（RNA降解） 抽提试剂的残留 75% 乙醇洗涤 样品中杂质的残留 多糖等杂质，再次沉淀 DNA 污染
使用RNase-Free 的 DNase I 消化抽提RNA 下游实验效果不佳（RNA降解）

23 不同样品基因组DNA提取 常见样品基因组DNA提取 特殊样品基因组DNA提取 DNA分离纯化中的常见问题分析

24 基因组DNA提取流程

25 BioTeke基因组DNA提取系列试剂盒综合利用上述方法
化学方法 CTAB法：适用于植物材料等。是一种阳离子去污剂，溶解细胞膜，与核酸结合。在高盐下溶解释放DNA。 SDS法：适用于血液，细胞，动物组织，细菌，酵母等 物理方法 机械剪切，超声波破碎，研磨匀浆等。易造成DNA断裂。 酶法 蛋白酶K BioTeke基因组DNA提取系列试剂盒综合利用上述方法

26 组织/细胞/细菌/血液基因组DNA提取 提取原理： 特点： 不需要使用有毒的氯仿、苯酚等试剂 多次柱漂洗确保高纯度；长度可达30-50Kb

27 （使用新型快速植物基因组DNA提取试剂盒）
提取原理： 玉米叶片基因组DNA提取 （使用新型快速植物基因组DNA提取试剂盒）

28 NO！ 特殊样品基因组DNA提取 传统方法适用于所有材料基因组DNA的提取？ 比如大量血液？ 比如土壤/粪便中的微生物基因组DNA的提取？

29 中量/大量血液基因组DNA提取 传统方法 BioTeke创新 结果： 消化后，用酚/氯仿抽提， 时间长，损害操作人员健康 不用蛋白酶消化
不用酚/氯仿抽提 结果： 得率：约75-250μg /5mL血样 纯度：OD260/OD280＝ 5ml全血基因组DNA提取电泳结果

30 土壤/粪便微生物基因组DNA提取 其他品牌试剂盒存在缺点： 采用玻璃珠或钢珠破碎，导致基因组断裂严重； 必须购买破碎专用设备，增加使用成本；
BioTeke的技术创新： 采用酶法破碎，保证基因组的完整性； 用异丙醇沉淀DNA，DNA无损失。 厂家 破碎 方式 纯化 提取 时间 是否需要 专门设备 BioTeke 酶法破碎基因组完整 离心柱吸附杂质纯度高 1小时内 不需要 Q公司 钢珠破碎基因组断裂 玻璃奶同离心柱结合得率低 2小时 需要 M公司 玻璃珠破碎基因组断裂 离心柱纯化得率较低

31 临床样品基因组DNA提取 病毒基因组DNA提取 酵母基因组DNA提取 口腔拭子DNA提取 微量样品DNA提取 石蜡组织DNA提取

32 一步法DNA提取扩增 原理： 综合微量样品基因组DNA提取和高效的PCR扩增试剂。从毛发、石蜡组织等微量组织中高效提取足够浓度的DNA，然后进行PCR扩增。操作简单、方便，可对大量样品同时进行操作。

33 基因组DNA分离纯化中的注意事项 保证基因组DNA的完整性和纯度 提高DNA的洗脱效率 DNA的储存

34 基因组DNA分离纯化中的注意事项 保证基因组DNA的完整性和纯度 提高DNA的洗脱效率 DNA的储存 简化操作步骤，缩短操作时间
减少化学物质对DNA的降解，操作多在pH4-10 防止基因组DNA的生物降解：DNase

35 基因组DNA分离纯化中的注意事项 保证基因组DNA的完整性和纯度 提高DNA的洗脱效率 DNA的储存 洗脱液65度预热10分钟
洗脱体积不小于30μL 洗脱2次或者3次

36 基因组DNA分离纯化中的注意事项 保证基因组DNA的完整性和纯度 提高DNA的洗脱效率 DNA的储存
可长期储存于pH=7.0的ddH2O或TE 不易制成干品储存 分装低温保存

37 如何提高微量核酸提取或回收后的浓度 核酸助沉剂的应用 微量吸附柱的应用---15μl洗脱体系 质粒提取 胶回收或PCR产物回收
微量细胞/组织DNA/RNA提取 病毒DNA/RNA提取 微量临床样本DNA/RNA提取

38 不同样品核酸提取、扩增、荧光定量PCR完美解决方案 北京百泰克生物技术有限公司（北京市海淀区上地信息路15号）
---Real-time qPCR攻略 北京百泰克生物技术有限公司（北京市海淀区上地信息路15号）

39 主要内容 RT-PCR原理 Real-time qPCR原理及应用 Real-time qPCR成功关键

40 中心法则与RT、PCR PCR DNA RT RNA

41 反转录相关因素 逆转录反应可以以随机引物、oligo(dT)或基因特异性的引物（GSP）起始。
提取RNA的质量会影响到RT的产量及cDNA的完整性。 整个过程要求无RNA酶操作。 反转录酶、RNA酶抑制剂都会对产物的质量造成一定的影响。

42 Super M-MLV反转录酶 Thermo M-MLV反转录酶 高效的逆转录活性，且无RNaseH活性
适合合成长片段的cDNA,有很强的模板兼容性，对高GC含量（75%以上）和结构复杂的模板效果显著 在42℃-60℃具有较好的热稳定性。

43 One step RT-PCR 模板： 目的片段：管家基因β-Actin 反应体系： 反应程序：
使用BioTeke公司的RNApure 总RNA提取试剂盒提取的鸡肝脏组织RNA 目的片段：管家基因β-Actin 反应体系： 反应程序：

44 RT-PCR相关产品 反转录酶及试剂盒系列产品讲座期间特价优惠！ Thermo 系列产品买二赠一！
Super M-MLV反转录酶，10000u/198元 Super RT Kit cDNA 第一链合成试剂盒50次，特价490元 Super One-step RT-PCR Kit 一步法RT-PCR试剂盒50次，特价880元 Thermo 系列产品买二赠一！ Thermo M-MLV反转录酶，10000u/580元 Thermo RT Kit cDNA 第一链合成试剂盒50次，价格1200元 Thermo One-step RT-PCR Kit 一步法RT-PCR试剂盒50次，价格1400元

45 RT-PCR原理 Real-time qPCR原理及应用 Real-time qPCR成功关键 Real-time qPCR数据分析 Real-time qPCR常见问题及解决方案

46 实时荧光定量PCR技术的应用 基因表达差异分析 拷贝数分析 SNP检测 miRNA定量 转基因成分定量分析 临床诊断、疾病及药物研发等

47 Real-time qPCR原理 如何对初始模板定量 荧光信号如何产生？
所谓实时荧光定量PCR,就是实时监测PCR过程中每一个循环的产物的荧光信号，得到一个荧光变化曲线，以此来实现对初始模板的定量分析。对于这个定义，大家可能会问两个问题，第一个就是在PCR过程中这个荧光信号是怎样产生的；第二个就是得到荧光曲线后如何实现对初始模板的定量。关于第一个问题，我留在后面讲，但大家要记住一点，这个荧光信号与产物量是成正比的。 我先解释第二个问题。 如何对初始模板定量 荧光信号如何产生？ 47

48 Real-Time qPCR主要概念 非探针 扩增曲线 化学原理 实时定量PCR 两个重要图形 探针 熔解曲线

49 Real-Time qPCR曲线的意义 扩增曲线 熔解曲线 图片为：首都医科大学演示实验结果 材料：小鼠肝脏 基因：β-actin

50 荧光染料和荧光探针 实时荧光定量 PCR 的化学原理包括探针类和非探针类两种。
非探针类则是利用荧光染料（如SYBR Green I）或者特殊设计的引物(如LUX Primers)来指示扩增的增加。 探针类(TaqMan探针和 分子信标)是利用与靶序列特异杂交的探针来指示扩增产物的增加。 后者由于增加了探针的识别步骤，特异性更高，但前者则简便易行。

51 SYBR Green I 工作原理 SYBR Green I是一种结合于小沟中的双链DNA结合染料，与双链DNA结合后，其荧光大大增强。这一性质使其用于扩增产物的检测非常理想。SYBR GreenI的最大吸收波长约为497nm ，发射波长最大约为520nm。 在PCR反应体系中，加入过量 SYBR 荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的 SYBR 染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。

52 LUX 引物工作原理 LUX (light upon extention) 引物是利用荧光标记的引物实现定量的一项新技术。目标特异的引物对中的一个引物 3’ 端用荧光报告基团标记。在没有单链模板的情况下，该引物自身配对，形成发夹结构，使荧光淬灭。在有目标片断的时候，引物与模板配对，发夹结构打开，产生特异的荧光信号。

53 TaqMan探针工作原理 Suppression of fluorescence Primer Reporter Quencher
Degradation of TaqMan probe by DNA polymerase Primer Q

54 分子信标（molecular beacon）工作原理
分子信标：一种在靶DNA不存在时形成茎环结构的双标记寡核苷酸探针。在此发夹结构中，位于分子一端的荧光基团与分子另一端的淬灭基团紧紧靠近。 分子信标的茎环结构中，环一般为15-30个核苷酸长，并与目标序列互补；茎一般5-7个核苷酸长，并相互配对形成茎的结构。荧光基团连接在茎臂的一端，而淬灭剂则连接于另一端。分子信标必须非常仔细的设计，以致于在复性温度下，模板不存在时形成茎环结构，模板存在时则与模板配对。与模板配对后，分子信标的构象改变使得荧光基团与淬灭剂分开。当荧光基团被激发时，它发出自身波长的光子（图5）。

55 荧光阈值(Threshold) Ct Ct值是扩增DNA的量达到阈值时候的循环次数。

56 Ct值 Ct 值与起始模板的关系研究表明，每个模板的 Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系，起始拷贝数越多， Ct值越小。

57 Real-time qPCR流程

58 一步法和两步法优缺点比较 根据自己需求，选择合适的方法！ 一步法 两步法 优点 节省时间 稳定性好 减少污染 灵敏度高 定量相对准确 缺点
灵敏度稍差 稳定性稍差 操作稍复杂 根据自己需求，选择合适的方法！

59 RT-PCR原理 Real-time qPCR原理及应用 Real-time qPCR成功关键 Real-time qPCR数据分析 Real-time qPCR常见问题及解决方案

60 Real-time qPCR成功因素 引物设计： 3’末端尽量不是A；
18－24bp；扩增产物80-150bp; 设计在基因保守区内 Taqman探针：尽量靠在上游引物；长度30－45bp，Tm比引物高至少 5℃；5’端不要是G，G会有淬灭作用，影响定量 RNA质量和定量 比较好，2条主带可见（28s和18s）；定量准确 内标（housekeeping gene）正确选择 18s rRNA, ß-actin, GAPDH等 标准曲线的准确制作R2＝0.99

61 Real-time qPCR成功因素 反应体系： 小心操作： 做real-time qRT-PCR前，做个普通的PCR，检测您的反应条件！
模板浓度不要太高，反转录最多1µg总RNA， PCR一般1µL反转录产物； 引物浓度一般100nM-1mM； 根据kit要摸索最佳反应条件 小心操作： 每管或每孔都要换新枪头！不要连续用同一个枪头加样，即使是混 合液！每个样品至少要做3个平行孔。每组实验最好有3个重复，做统计 分析。 做real-time qRT-PCR前，做个普通的PCR，检测您的反应条件！

62 RT-PCR原理 Real-time qPCR原理及应用 Real-time qPCR成功关键 Real-time qPCR数据分析 Real-time qPCR常见问题及解决方案

63 Real-time qPCR数据分析 基线（baseline） 通常是3－15个循环的荧光信号 同一次反应中针对不同的基因需单独设置基线
阈值（threshold) 自动设置是3-15个循环的荧光信号的标准偏差的10倍 手动设置：置于指数扩增期，刚好可以清楚地看到荧光信号明显增强。 同一次反应中针对不同的基因可单独设置阈值， 但对于同一个基因扩增一定要用同一个阈值。 Ct值 :与起始浓度的对数成线性关系 分析定量时候一般取Ct:15-35.太大或者太小都会导致定量的不准确。

64 统计分析方法 绝对定量： 此方法是用一系列已知浓度的标准品制作标准曲线，在相同的条件下目的基因测得的荧光信号量同标准曲线进行比较，从而得到目的基因的量。该标准品可以是纯化的质粒DNA，体外转录的RNA，或者是体外合成的ssDNA。 相对定量： 通过与内参基因Ct值之间的相差来计算基因表达差异,一般是 2-Ct 。或者是考虑扩增效率的Pfaffl法。

65 绝对定量

66 相对定量 Marisa L. Wong and Juan F. Medrano: BioTechniques July 2005

67 相对定量

68 Real-time qRT-PCR优点 实时检测（在对数扩增时期）而不是终点检测 敏感性高 需要样品少 特异性高（Taqman） 精确定量

69 RT-PCR原理 Real-time qPCR原理及应用 Real-time qPCR成功关键 Real-time qPCR数据分析 Real-time qPCR常见问题及解决方案

70 常见问题讨论 特异性 重复性 灵敏度 其他问题

71 扩增的特异性 引物？ Tm Tm，重新设计引物，优化条件

72 重复性---判断实验优劣的重要指标 判断指标：主要为标准差（SD）和变异系数（CV） 影响重复性的因素：
PCR 反应扩增的效率：优化实验条件，使反应体系达到最佳扩增效率 。 目的基因的初始浓度： 使用初始浓度具有较高数量级的样本或作平行孔。 标准曲线的影响：不少于5个稀释度的标准品，涵盖待测样本中目的基因量可能出现的全部浓度范围；理想的标准品应与样本具有高同源性，质粒DNA 或是体外合成、转录的RNA。

73 影响灵敏度的因素 反应体系中形成的引物二聚体的影响 循环数 Mg2＋的浓度
可以用水解探针代替SYBR Green I，有文献报导使用水解探针的敏感性要比SYBR Green I高出10倍。 可以使用热启动办法或使用特殊处理的Taq酶 要尽可能地优化引物设计 如果反应体系中出现PCR的抑制因素，应适当将目的基因的浓度稀释后再进行扩增。 注意避免室温混合各种试剂，并且在一经混合后立即开始进行扩增。 循环数 Mg2＋的浓度

74 Q1:无Ct值（信号）出现 检测荧光信号的步骤有误: 一般SG法采用72℃延伸时采集，Taqman法则一般在退火结束时或延伸结束采集信号。
可能性不大 检测荧光信号的步骤有误: 一般SG法采用72℃延伸时采集，Taqman法则一般在退火结束时或延伸结束采集信号。 引物或探针降解: 可通过PAGE电泳检测其完整性。 模板量不足: 对未知浓度的样品应从系列稀释样本的最高浓度做起。 模板降解: 避免样品制备中杂质的引入及反复冻融的情况。

75 Q2:Ct值出现过晚（Ct＞38） 扩增效率低: 反应条件不够优化。设计更好的引物或探针；改用三步法进行反应；适当降低退火温度；增加镁离子浓度等。 PCR各种反应成分的降解或加样量的不足。 PCR产物太长: 一般采用80-150bp的产物长度。

76 Q3:标准曲线的线性关系不佳 加样存在误差: 使得标准品不呈梯度。 标准品出现降解: 应避免标准品反复冻融，或重新制备并稀释标准品。
加样存在误差: 使得标准品不呈梯度。 标准品出现降解: 应避免标准品反复冻融，或重新制备并稀释标准品。 引物或探针不佳: 重新设计更好的引物和探针 模板中存在抑制物，或模板浓度过高。

77 Q4:阴性对照也出现明显的起飞 反应mix或水被污染。
引物二聚体的出现： 用SG法在35cycles以后阴性出现起飞属正常情况，可配合熔解曲线进行分析。 反应过程中探针的降解：用PAGE电泳对探针进行检测。 ROX校正的问题：如果使用了，则可能是ROX的降解所造成。

78 Q5:熔解曲线不止一个主峰 引物设计不够优化：应避免引物二聚体和发夹结构的出现。
引物浓度不佳：适当降低引物的浓度，并注意上下游引物的浓度配比。 镁离子浓度过高：适当降低镁离子浓度，或选择更合适的mix试剂盒。 模板有基因组的污染：RNA提取过程中避免基因组DNA的引入，或通过引物设计避免非特异扩增。

79 Q6:扩增效率低 反应试剂中部分成分特别是荧光染料降解。 反应条件不够优化：可适当降低退火温度或改为三步扩增法。
反应体系中有PCR反应抑制物：一般是加入模板时所引入，应先把模板适度稀释，再加入反应体系中，减少抑制物的影响。

80 Q7:同样的试剂在不同仪器上产生不同的曲 线，如何比较？
判断标准：扩增效率，灵敏度，特异性

81 BioTeke产品—从根本上解决您的实验问题
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82 BioTeke Real-time qPCR产品可用于各种仪器
ABI: PRISM 7000/7700/7900HT,7300/7500 Bio-Rad: DNA Engine Option/DNA Engine Option2/Chromo4 Real time System,iCycler IQ/MyiQ/iQ5 Stratagene:Mx3000P/Mx3005P Roche: Light cycler Bioer: Line-Gene 其他各种real- time qPCR扩增仪 ROX参考染料：在荧光检测中标准化非PCR相关的震荡； 在qPCR中提供一个稳定的基线

83 BioTeke Real-time qPCR产品反应程序
循环数 Step 温度 时间 检测 说明 1 95℃ 2min Off 起始模板预变性 35-45 15sec 模板变性 2 60-68℃ 20-60sec On 退火/延伸 三步扩增反应 Real-time qPCR: 循环数 Step 温度 时间 检测 说明 1 95℃ 2min Off 起始模板预变性 35-45 10-20sec 模板变性 2 55-65℃ 退火 3 72℃ 20-60sec On 延伸

84 BioTeke Real-time qPCR产品反应程序
溶解程序：（dissociation program),扩增反应完成后的最后一步，检测扩增反应的特异性。不同仪器要求的程序稍微不同。 ABI7000的溶解程序： 循环数 Step 温度 时间 检测 1 End 55-65℃ 10-20sec On 95℃ Off

85 BioTeke产品应用实例---最权威的声音来源于实践
目前应用最广泛的主流仪器：ABI系列及Bio-Rad系列。 来自Bio-Rad系列的检验报告。 来自ABI系列的检验报告。 我们都做得很好，我们一直在不断创新，力求解决您的实验需求。

86 不同公司荧光定量试剂比较 T公司 BioTeke ABI比较

87 Bio-rad test

88 Bio-rad melting curve

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