Thin-layer chromatography

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1 Thin-layer chromatography
基础化学实验Ⅱ （有机化学实验） 薄层色谱 Thin-layer chromatography

2 实验技能训练要点: 1 认识薄层色谱用各仪器名称 2 第一次训练薄层色谱规范操作及实验流程

3 内 容 提 要 一、实验目的与要求 二、实验原理 三、装置图 四、实验操作步骤及注意事项 五、实验讨论 六、实验思考问题 七、实验延伸

4 一、实验要求与目的 1、掌握色谱法的基本原理 2、学会利用薄层色谱分离 提纯有机化合物的规范操作

5 二、实验原理 1、基本原理： 2、分类： 柱色谱 解性能（即分配）的不同，或其他亲和作用的差异，
固定相 1、基本原理： 利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶 解性能（即分配）的不同，或其他亲和作用的差异， 使混合物的溶液流经该种物质，进行反复的吸附或分 配等作用，从而将各组分分开。 流动相 2、分类： 柱色谱 纸色谱 根据操作条件分为 薄层色谱 气相色谱 液相色谱

6 3、薄层色谱 （1）适用于挥发性较小或在较高温度易发生变化而不能 用气相色谱分析的物质 （2）是柱色谱的先导
（3）分类：吸附型（Al2O3、硅胶G等作吸附剂） 分配型（硅藻土、纤维素等作支持剂） = 比移值Rf=

7 （4）定义： 在洗涤干净的玻板（15×3cm）上均匀地涂上一层吸附剂或支持剂，待干燥、活化后将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄层板一端约1cm处的起点线上，晾干或吹干后，置薄层板于盛有展开剂的展开槽内，浸入深度为0.5cm。待展开剂前沿离顶端约1cm附近时，将板取出，干燥后喷以显色剂或在紫外灯下显色或直接观察。

8 4、主要试剂及其物理常数 偶氮苯 苏丹Ⅲ 硅胶G 羧甲基纤维素钠（0.5%水溶液） 粘合剂 硬板——含粘合剂 软板——不含粘合剂

9 三、装置图

10 四、实验操作步骤 1、制板（简易平铺法） （1）二块15×3cm玻片，洗净，控水 （2）调糊：3g硅胶G和8mL0.5%羧甲基纤维素
薄层板 干板 1、制板（简易平铺法） 平铺法—简易平铺法 湿板 （1）二块15×3cm玻片，洗净，控水 （2）调糊：3g硅胶G和8mL0.5%羧甲基纤维素 钠水溶液在小烧杯中搅匀 （3）用小勺取适量于玻片上粗铺平，手指轻弹 玻片，反复数次，使糊状物均匀地铺在玻 片上于室温下晾干，每人铺二块 （4）活化：将晾干的薄层板放在烘箱中，待烘 箱温度升至 度时记时0.5h 浸渍法

11 简易平铺法铺板、毛细管点样、倾斜上行法展开
2、点样： （1）画线——起始线和前沿线 （2）毛细管点样——斑点大小和斑点间间距 3、展开： （1）展开剂选择； （2）展开方法——倾斜上行法 4、显色： 直接观察并量取a、b值，计算比移值 简易平铺法铺板、毛细管点样、倾斜上行法展开

12 5、注意 1、制板和活化：铺板厚度0.25-1mm且均匀；晾干； 一块一块铺；活化时烘箱要从低温开始
2、点样：画线时不能将板划破；点样斑点直径小于 2mm，斑间距1-1.5cm，标准左样品右；点 样结束干燥后再进行下一步 3、展开：展开剂用9：1的苯和乙酸乙酯混合溶剂 一般原则：根据样品的极性、溶解度和吸附剂的活性 等因素考虑。溶剂的极性越大对样品的洗脱力越强。 4、显色：照原样画出斑点形状 5、要求在原始记录中画出板的真实展开情况并计算Rf值

13 6、提问 1、 色谱法的基本原理是什么？ 2、 展开剂应该如何选择？ 3、 制备薄层色谱板时，应注意哪些问题？

14 五、实验讨论 1 薄层色谱实验适用的对象 2 薄层色谱实验操作的关键点

15 六、实验思考问题 1、薄层色谱操作一般包括哪些步骤? 2、点样时应该注意哪些问题？ 3、点样前在距离板的一端一厘米处划线的目的是什么？
4、Rf值的大小与哪些因素有关？ 5、制备好的薄层板为什么要经过活化后才能使用？ 不经过活化就使用，对分离结果有怎样的影响？ 6、薄层色谱分为几类? 7、在展开槽中为什么要放一张滤纸? 8、薄层色谱与柱色谱有什么异同?

16 七、实验延伸 参考书： （1）有机化学实验．兰州与复旦合编（第二版） 北京：高等教育出版社，1994．
（2）有机化学实验．兰州大学（第三版） 北京：高等教育出版社，2010． （3）胡宏纹 有机化学(第3版)．南京大学 北京：高等教育出版社，2006． （4）魏青 基础实验Ⅱ（有机化学实验） 北京：科学出版社，2011.