卫生部北京医院输血科 北京市临床输血质量控制和改进中心 卫生部临床检验中心血型室 宫济武

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1 卫生部北京医院输血科 北京市临床输血质量控制和改进中心 卫生部临床检验中心血型室 宫济武
输血相容性检测室内质量控制 卫生部北京医院输血科 北京市临床输血质量控制和改进中心 卫生部临床检验中心血型室 宫济武

2 质量控制 质量控制（QC)：是质量管理的一部分，目的是保证质量，满足要求，判断是否达到了预期要求，对质量问题采取措施进行补救并防止再发生的过程。 质量控制包括室内质量控制（内部质量控制）室间质量控制（外部质量控制）

3 质量控制要素 质控要素归纳为十个方面：设施和环境，检验方法，仪器及外部供应品，操作手册，仪器和检验系统的维护和功能检查，校准和校准验证，室内质控，室间质评，纠正措施，质控记录。

4 基本概念 准确度 (Accuracy)：待测物的测定值与其真值的一致性程度。准确度不能直接以数值表示，通常以不准确度来间接衡量。对一分析物重复多次测定，所得均值与其真值或参考靶值之间的差异亦即偏差即为测定的不准确度。 偏差 (Bias)： 待测物的测定值与一可接受参考值之间的差异。

5 基本概念 精密度(Precision)： 在一定条件下所获得的独立的测定结果之间的一致性程度。与准确度一样，精密度同样也是以不精密度来间接表示。测定不精密度的主要来源是随机误差，以标准差（SD）和/或变异系数（CV）具体表示。SD或CV越大，表示重复测定的离散度越大，精密度越差，反之则越好。

6 准确定和精密度 准确度与精密度关系 准确度是由系统误差和随即误差所决定的。而精密度是由随机误差决定的。在检测过程中，虽然有很高的精密度，但并不能说明试验结果准确。只有在消除了系统误差之后，精密度和准确度才是一致的。此时精密度越高，准确度也就越高。

7 准确性和精密性 上图中的 bulls eye或靶心被认为是测量参数的真值
准确性是正确测量真值的平均能力，例如测量点重复落在bulls eye上（A），或者平均落于bulls eye外侧。 精密性是对测量过程固有的变异性的测量，如测量点重复落于靶的相同位置。 在检测过程的每一次运行中，采用相同的标本作为QC标本，重复检测，即可评价检测的精密度。如果一个检测或实验室每一次能够产生相同的结果，可谓具有高精密性。 通过与其他实验室的相同QC标本和相同分析体系产生结果的比较，如参与外部QC计划，可评价准确性和精密性。

8 实施质量控制的目的 提供确保结果可靠性的独立的机制 监控试剂盒和非商品化试剂检测结果的精密性 监控试剂的批间变异
证明检测结果可靠[可追溯性] 及时发现实验室常见误差，采取纠正和补救措施 采用标准化的程序和优质试剂, 实施良好实验室实践 促进实施质量保证和质量管理 向顾客提供实验室检测结果一致性的证据 向审核方提供实验室运作的信息 帮助使用体外诊断试剂的实验室监控检测试剂和non-commercial assays的精密性。 提供确保结果可靠性的独立的机制 识别实验室的共同差错，采取适当的纠正和补救措施 采用标准化的程序和高质量的试剂，鼓励实现良好的实验室实践 鼓励在实验室实施质量管理，采用质量保证措施 为消费者（医生、献血者和患者）提供保证，确保实验室结果的一致性。 在实验室运作方面，为独立审核提供信息

9 室内质量控制策略 质控品种类 每种检测频次 放置的时间 用于质控数据解释 确定分析批是在控还是失控的规则。

10 质量控制 将质量控制作为一个过程， 加以控制！！

11 检测方法中的质控环节 血清和红细胞比例 抗体种类 细胞悬液浓度 检测介质如蛋白含量、离子强度、增强介质的种类 温度和孵育时间 适当离心条件
正确的条件下使用试剂 准确的判读并解释凝集反应

12 QC 过程 质控品 确定控制限 每批试验含质控品 数据收集 数据分析 监控变异 发现变异 调查解决 QC 过程

13 定性测定项目的室内质控 定性分析、半定量分析阴、阳性的判断有一个“判断值” ，所以质控的目的是考察检测结果是否准确和稳定。 在采用何种方法时, 要了解其“判断值”的确定是否与需求相符, 同时应了解抗原抗体反应特异度，及抗干扰情况。

14 定性测定项目的室内质控 肉眼直接判定的阴、阳性结果的测定时， 除阴、阳性对照外, 最好用一个水平在“判断值”附近的质控品较好。 当试剂盒质量有所变化时, 阴性、阳性对照（尤其强阳性对照）往往发现不了的情况下, 用水平接近“判断值”的质控品就可发现

15 定性测定项目的室内质控 用某一讯号值来判断结果时, 这时需要选择好适当的质控特征值。如微板法法检测血型, 讯号值可有OD值、S/N值、S/CO值等。其中OD值波动太大, 而报告阴、阳性结果时，用的是S/N值或S/CO值, 所以选用S/N值或S/CO值作质控特征值比OD值好

16 定性测定项目的室内质控 在ELISE检测时S/N值或S/CO值呈正态分布, 也可采用Levey -Jenning控制图进行质控，但在血型检测中不太适用.应每天检测质控板来进行讯号值的质控.

17 定性试验质控 指定浓度的质控品,进行检测,要求90 %以上结果完全符合,不符合的不能超过一个“级差” 血型鉴定：不遗漏任何微弱凝集
抗体筛查：检测出有临床意义的抗体 交叉配血：不遗漏任何微弱凝集

18 血型检测的室内质控 遵循定性检测的室内质控原则 特殊性: 血型抗原的多态性 不同血型系统 同一血型的亚型 同一血型抗原的不同反应性
纯合子/杂合子

19 传统做法

20 国外同类产品

21 Ortho 试剂商品名 包含试剂 检测项目及结果 CQI7 三只血清 一支抗体筛检阴性 一支含弱抗D抗体 一支含弱抗K或抗Jka
四种血球 A1 rr血球 dce/dce A2 R1R1血球 DCe/Dce B R2R2血球 DcE/DcE O R1R2血球 DCe/DcE 含有c和e抗原 含有D、c和e抗原 含有D、c和E抗原 含有D、C、c、E和e抗原 CQI9 包含以上7支标本，增加以下两只标本： A1B血球 A2B血球 有A、A1和B抗原 有A和B抗原 Confidence Kit A1B RhD 阴性O RhD 阳性 Rr血球 dce/dce R1r血球 DCe/ dce 含有D、C、c和e抗原

22 Sanquin PeliCase 1&2 Pelicheck panel PeliControl PeliControl CcEe-K
试剂商品名 包含试剂 检测项目及结果 PeliCase 1&2 含五个血清及五个血球部份 血型、抗体筛检、抗体鉴定 Pelicheck panel cell 1（A2B型RhD neg)； cell 2 (O型R1r)DCe/ dce serum 1 serum 2 cell 3 (OR1R2 DCe/DcE) 含有A和B抗原 含有D、C、c和e抗原 含弱anti-D； 含有D、C、c、E和e抗原 可用来检测 Coombs' Rh anti-sera的QC； PeliControl 1 A2B/RhD pos没有抗体； 2 O RhD neg 含有A和B抗原以及D抗原 没有任何抗体 包括两支全血试剂 PeliControl CcEe-K 含CcEeK抗原 适用于CeEeK的QC， 只有一支标本

23 澳洲CSL 第一支 是O型Rh阴性， 用来查核anti-D 凝集强度比对标准化。 含有anti-D抗体
包含试剂 检测项目及结果 第一支 是O型Rh阴性， 用来查核anti-D 凝集强度比对标准化。 含有anti-D抗体 ABO反定型、RhD的抗原性，及AHG 试验方法， 抗体强度在1:32﹝对标准R2R2血球采精确标准操作﹞浓度为<0.6IU/ml。 第二支 标本为B型Rh阳性 含D抗原和抗A1 抗体 可达3+反应 第三支 标本为A型Rh阳性 含弱anti-Jka或其他抗体。主要目的在查核screening cells的抗原性是否良好， 得分 8 scores（2+）及3 scores（1+）以上。 第四支 标本为AwBw Rh阴性且抗体阴性标本 主要用来检测弱ABO抗原 抗血清对弱抗原的检测

24 Antibody screening with cells
IMMUCOR ABO bl.group reagents Rh bl.guoup reagents Kell 抗原/抗体表达 A B A,B A1 D C c E e K Cell 1 3+ 2+ Cell 2 Cell 3 Cell 4 ABOr. red cell Antibody screening with cells 抗原/抗体表达 K FY D Serum 1 0/1 2+ Serum 2 Serum 3 +

25 Antibody screening with cells
IMMUCOR ABO bl.group reagents Rh(D) bl.guoup reagents r.red cell Antibody screening with cells A B A,B D1 D2 contr 1D+ 2D+ 3D- Cell 1 3+ Serum 1 1+ 0/1 Cell 2 2+ Serum 2 Cell 3 + K+

26 室内质控的技术要求 质控目标: 检测方法:盐水介质
ABO血型:试剂血清及试剂细胞的反应性.包括阴阳性反应的准确性,测试对象及测试介质的影响. 项目包括: 正定型: 抗-A、 抗-B、 抗-A，B 反定型细胞: A1 A2 B O 检测方法:盐水介质

27 室内质控的技术要求 质控目标: 正定型: 抗-D、 检测方法:盐水介质 IAT
RhD血型:试剂血清及试剂细胞的反应性;包括阴阳性反应的准确性;测试对象及测试介质的影响;测定方法的特异性. 项目包括: 正定型: 抗-D、 D阴性细胞 检测方法:盐水介质 IAT

28 室内质控的技术要求 质控目标: 抗体筛查: Cell –I,-II,-III 检测方法:IAT
抗筛细胞:试剂细胞的反应性;包括阴阳性反应的准确性;测试对象及测试介质的影响;测定方法的特异性. 项目包括: 抗体筛查: Cell –I,-II,-III 与抗-A,抗-B的反应性. 检测方法:IAT

29 室内质控的技术要求 质控目标: AHG:试剂的反应性;测定方法的干扰性. 项目包括: AHG D阴性细胞 检测方法:盐水介质

30 室内质控原则 ABO血型测定 质控品设计以检出为原则，反应强度设置在至少3+，检测频次为每天、每个工作人员开始检测时；
RhD血型:试剂血清及试剂细胞的反应性;包括阴阳性反应的准确性;测试对象及测试介质的影响;测定方法的特异性。 抗体筛查 以高低值设计,低值血清设置反应度为±,定义本实验室质控反应的结果断定原则和检测有效原则。检测频次为每批次。 交叉配血方法 为特定抗体检测的有效性测定.检测频次为每天,每个工作人员开始检测时.

31 内部质控品（QCs）的来源 实验室自制 其他来源: 商品 其他实验室 QC计划的提供者
一个QC标本可以是已经产生弱阳性结果的患者标本。尽管这是QC标本最经济的来源，但这是很难的，例如很难获得足够大量的抗-HIV低反应性的患者标本。使用小量来源的QC标本将意味着QC标本的经常性改变，这就影响了数据的纵向采集和试剂批间差异的比较。 一个实验室可以自己制备QC标本，这要求作为QC标本的来源必须经过严格的确认和检测步骤，确保标本保持一致结果。通常制备和确认自制的QC标本的消耗比从商家购买同样量的QC标本少很多。另外，自制标本的技术规格可以更精密。制备大量的QC标本也是一种挑战。 如果采用购买的或自制的QC标本，最好参与一个QC计划。QC计划的提供者通常提供适当的QC 标本 ，收集数据，提供实验室运行的反馈信息。 QC标本能够从商业供应商以毫升计量购买。这些标本价格很贵，不可能特别为一种分析而设计，因此在某一检测水平，结果会产生波动，很难保持结果精密性。

32 内部质控品的重要特性(通用) 与检测标本相似（同质） 其行为表现与真正的标本相同 测定值涵盖医学决定点 处于能发现变异的水平
可大量提供（使用1年） 稳定 血清类可以冰冻、冻干或以化学方式保存 如果为冻干品，要求非常准确复原 以小量分装贮存 按照厂家推荐贮存 瓶间变异很小 通常为生物材料，具有生物危险性 含单一或多种标记物 QC标本的选择是QC计划的关键。发现任何QC结果的差错，应一定视为检测过程变异的反映，不能认为QC标本本身的原因。每年应当对QC标本重新评价，确保标本仍然适宜可用。 稀释液是用于制备QC标本的基体或基质，例如用于稀释强阳性标本的物质。如可能，稀释液应包含与受检标本相同的物质。这就确保了QC标本可以如真正标本一样，以同样的检测方式进行检测。用于TTI检测的QC标本的稀释液通常是血浆或血清。然而，在制备QC标本期间，添加剂如防腐剂的使用，可以使QC标本有所改变。QC标本或基体也应该能够经受如冻融、冻干等物理状态的改变。这就是为什么一批QC标本在制备以后和发放之前必须经过确认的原因。 适宜的QC标本应具有预计的分析动态范围内的响应值。更确切地说它应当具备2-3倍CUTOFF结果，一个具有这个反应水平的标本可以发现系统运行的变异性。相反，即使检测系统发生显著变化时，一个强阳性或阴性标本结果的波动性很小，因此不能发现检测系统的变异。

33 质控品组成 组成:可由一质控血清和一质控细胞完成以上检测需求.
质控血清:至少含有抗-A,抗-A1,抗-B,可与抗筛细胞反应的一种IgG抗体. 质控细胞:至少含有A,B.D三种抗原表达,并反应性有明确控制.

34 室内质控如何做? 修订质量手册，增加室内质控要求 制定本实验室室内质控程序文件 制定本实验室室内质控SOP.
依据 所用试剂 所选方法 所用设备 所用质控 修改ABO、Rh、抗筛的SOP及增修相关记录表单 按照室内质控SOP进行操作. 作好记录

35 试剂室内质控记录 试剂: 记录内容 最好以表格形式记录全部试剂 批号(是否更换新的批号) 效期 生产厂商 质控结果 日期及检测者 通过
不通过 失控原因及分析 日期及检测者

36 室内质控记录表 评估项目 试剂 批号 效期 厂商 Anti-A Anti-B ………. 试剂质控 1 2 3 ……. 批号变化 批号:
12345 口 改变 口 未改变 通过质控 质控失控 失控原因 日期 签名

37 室内质控样表

38 误区 质控样本同检测样本一样对待 不同检测方法的适用性 手工 自动化

39 谢谢