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果蝇杂交实验
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一、实验目的 二、实验材料 三、实验器具和药品 四、实验内容 （一）果蝇形态的观察 （二）果蝇的饲养 （三）果蝇的杂交
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五、实验数据的统计及分析 六、实验报告 七、注意事项
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一、实验目的 2017/3/21
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学会杂交实验设计的方法 理解遗传的三大定律 学会运用统计学和遗传学的理论分析实验现象 初步学会论文的撰写方法
学会杂交实验设计的方法 理解遗传的三大定律 学会运用统计学和遗传学的理论分析实验现象 初步学会论文的撰写方法 2017/3/21
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二、实验材料 黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)品系 18＃、6＃、e#、2 #
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三、实验器具和药品 显微镜、培养瓶、棉塞、量筒 麦片、蔗糖、琼脂粉、丙酸、乙醚等
三、实验器具和药品 显微镜、培养瓶、棉塞、量筒 麦片、蔗糖、琼脂粉、丙酸、乙醚等 2017/3/21
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四、实验内容 2017/3/21
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（一）果蝇的形态观察 2017/3/21
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1、果蝇雌雄的区别 雄： 腹部狭长，末端浑圆 腹背有5条横纹，粗细不一致，末端2－3条横纹“连成一片”，呈现“黑屁股”一样；
前足附节端表面有黑色“性梳”，在显微镜下呈黑梳子； 雌： 腹部宽大，末端突尖，腹背有7条横纹，色淡，粗细一致，前足附趾无性梳； 雌蝇体内有一储精囊，一次受精，终身够用，所以杂交时必须选择处女蝇 2017/3/21
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2、其他性状的观察 眼色：白眼与红眼； 翅形：长翅（正常翅）、短（小）翅、残翅； 体色：黑檀体、灰身； 刚毛：直刚毛、焦刚毛；
2、其他性状的观察 眼色：白眼与红眼； 翅形：长翅（正常翅）、短（小）翅、残翅； 体色：黑檀体、灰身； 刚毛：直刚毛、焦刚毛； 2017/3/21
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果蝇几种品系的性状 品系 体色 眼色 翅形 雌 雄 2＃ 6＃ e# 18＃
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3、其他 卵：圆形，前端有两条触须突起，通常附在瓶壁上； 幼虫：蛆状，奶白色，前端尖，后端钝，头部收缩迅速； 蛹：黄色
3、其他 卵：圆形，前端有两条触须突起，通常附在瓶壁上； 幼虫：蛆状，奶白色，前端尖，后端钝，头部收缩迅速； 蛹：黄色 2017/3/21
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（二）果蝇的饲养 2017/3/21
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1、果蝇的生活史和生活习性 2017/3/21
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羽化后的成虫一般要经过至少12小时才能交配，此时的成虫又称为处女蝇； 温度越低，生活周期越长，25℃平均10－12天一个世代；但超过30℃ 易出现变异； 生活习性：果蝇是以水果上的酵母为食，所以实验室内凡能发酵的基质都可作为果蝇的饲料。 2017/3/21
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2、培养基的配制（以100ml量为例） 70ml水 + 0.85g琼脂 + 7g蔗糖 煮开至琼脂溶化
煮开约3分钟
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稍凉后加入1g酵母粉， ml丙酸，混匀 分装,乘热塞上棉花塞。
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3、果蝇的麻醉（示范） 注意： 不可在培养瓶内麻醉； 如果进行形态观察可进行深度麻醉至死——腹部向前弯；双翅向背后与胸部成45° 如果进行杂交，一般成自然停飞状态为宜；
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4、转瓶（示范）
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5、处死
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6、取处女蝇 在培养瓶中出现第一个蛹后，除去所有的成虫，每隔9h观察一次，此时出现的雌蝇还未能进行交配，分离出来后即为处女蝇。
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（三）果蝇杂交的流程 2017/3/21
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以 6＃♀ × 2#♂为正交 2017/3/21
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每一培养瓶要贴标签，注明（杂交）品系，时间，班别，姓名
取原种（纯种） 每一培养瓶要贴标签，注明（杂交）品系，时间，班别，姓名 6＃5－6对 于一培养瓶 2#5－6对 于另一培养瓶 7－8天后，出现第 一个蛹时除去原种 7－8天后，出现第 一个蛹时除去原种
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杂交之前，反复检查雌内是否混有雄蝇，或雄蝇内是否混有雌蝇！
若混有雌蝇，除去后，雄蝇仍可用 超过9h的雌蝇坚决不能用于杂交, 若混有一只雄蝇，所有雌蝇都无用！ 每隔9h取一 次处女蝇， 共6－7对于一 培养瓶中 取6－7对雄蝇 于一培养瓶中 杂交之前，反复检查雌内是否混有雄蝇，或雄蝇内是否混有雌蝇！ 用同样方法做反交实验 6＃♀与2#♂放 入一培养瓶内 杂交
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出现第一个蛹后，除去亲本，之后 出现的成虫即为F1代； 若想增加F1的数量，可将亲本进行 转瓶一次；
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统计F1的 性状 取F16-7对于一培养 瓶内做自交实验 统计F2的性状 7－8天后除去F1，或转一次瓶 数量为400只以上
统计天数为7－8天 列表统计F1的性别、体色、翅形、眼色及是否有异常，数量：250－300只 统计F1的 性状 取F16-7对于一培养 瓶内做自交实验 为什么自交不需要处女蝇？ 7－8天后除去F1，或转一次瓶 数量为400只以上 F1自交可做2瓶 统计F2的性状
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五、实验数据的统计及分析
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将原始数据(眼色、翅形、体色、性别）列表归纳统计； 用统计学原理和遗传学原理对数据进行分析、假设和判断；
将原始数据(眼色、翅形、体色、性别）列表归纳统计； 用统计学原理和遗传学原理对数据进行分析、假设和判断；
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2＃（红眼、残翅）× 6＃（白眼、小翅） 分析要点： 显隐性的判断； 常染色体遗传和性染色体遗传的判断； 是否连锁的判断；
2＃（红眼、残翅）× 6＃（白眼、小翅） 分析要点： 显隐性的判断； 常染色体遗传和性染色体遗传的判断； 是否连锁的判断； 若是连锁则要计算它们之间的交换率； 若是非连锁则要计算它们之间的组合比例； 分析时从一对性状 两对性状 三对性状；
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实验结果（模拟） 2＃♂×6 ＃♀（正交） 2＃♀ ×6＃♂反交） F1 ♀: 红长82 ♀ 红长 111 ♂：白小98 ♂ 红长 75
♂：白小 ♂ 红长 75 F2 ♀:红长62 ♂：红长52 ♀：红长165 ♂：红长38 红小 红小 红残 红小37 红残 红残 红残24 白长 白长 白长32 白小 白小 白小36 白残 白残 白残28
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e＃（红眼黑檀体长翅）× 6＃（白眼灰身小翅）
分析要点： 显隐性的判断； 常染色体遗传和性染色体遗传的判断； 是否连锁的判断； 若是连锁则要计算它们之间的交换率； 若是非连锁则要计算它们之间的组合比例； 分析时从一对性状 两对性状 三对性状；
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实验结果（模拟） e＃ ♀ ×6＃♂（正交） e＃ ♂ ×6＃ ♀(反交） F1 红长灰♀：116 ♀ ：红长灰108
♂： ♂：白小灰121 F2 ♀红长灰108 ♂ ♀:红长灰70 ♂：74 红长黑 红长黑 红小灰 红小灰 红小黑 红小黑 白长灰 白长灰 白长黑 白长黑 白小灰 白小灰 白小黑 白小黑
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七、实验报告
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封面：果蝇杂交实验 实验人： 实验时间： 实验地点：
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前言：主要讲述实验的原理和目的； 1、实验材料及方法 1.1、实验材料：品系及性状 1.2、实验用品 1.3、培养基的配置 1.4、实验流程
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2、实验结果及分析 2.1、一对性状的结果及分析 2.2、两对性状的结果及分析 2.3、三对性状的结果及分析 3、结论与讨论 4、体会与建议
2、实验结果及分析 2.1、一对性状的结果及分析 2.2、两对性状的结果及分析 2.3、三对性状的结果及分析 3、结论与讨论 4、体会与建议
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七、注意事项： 准备记录本做好每日的工作记录； 检查实验流程之后方可开始实验； 实验之前做好所有的准备工作；
培养基按比例用多少配多少，不能浪费； 取处女蝇时，出现幼虫后天天观察是否有蛹出现； 你是否明白以下问题：
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1、取原种放入新的培养瓶中继续培养的目的 是什么？ 2、什么时候除去原种？ 3、怎样保证所取的雌蝇为处女蝇？ 4、怎样进行正交和反交？ 5、怎样扩充子代数量？
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