第十一章 抗生素类药物的分析.

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1 第十一章 抗生素类药物的分析

2 抗生素是细菌、放线菌和真菌等微生物的代谢产物，对各种病原微生物有强大的抑制或杀灭作用。
第一节 概述 抗生素的定义antibiotics 抗生素是细菌、放线菌和真菌等微生物的代谢产物，对各种病原微生物有强大的抑制或杀灭作用。 抗生素的来源 1. 生物合成（发酵） 2. 化学合成或半合成

3 特点：化学纯度较低, 同系物多，异构体多，降解物多；活性组分易发生变异；稳定性差。
鉴别方法：生物学法，理化方法 特殊检查项目：异常毒性、热源或细菌内毒素、降压物质、无菌，组分分析 ，聚合物等。

4 抗生素质量的复杂性 发酵过程不易控制易受污染 生产工艺复杂 分子结构大多不稳定，降解后疗效下降、失效或增加毒副作用 产品稳定性差 无机盐、脂肪、各种蛋白质、各种降解产物、色素、热原、毒性物质 发酵液中杂质

5 含量测定方法 （一）生物学方法 测定抗生素抑菌或杀菌的能力 测定方法：稀释法，比浊法，管蝶琼脂法扩散法。
比浊法和管蝶琼脂法扩散法为国际通用法。 中国药典采用管蝶琼脂法扩散法。

6 ——通过比较标准品与供试品产生抑菌圈的大小来测定供试品的效价。其原理恰好与临床应用要求一致，更能确定抗生素的医疗价值。
对于分子结构复杂、多组分的抗生素，生物学法是首选的效价测定方法。 1、与临床效果一致 2、灵敏度高 3、干扰物质少 1、操作繁琐 2、培养时间长 2、测定误差大 缺点 优点

7 （二）化学及物理化学方法 以理化方法测定主药含量 适用于提纯的产品以及化学结构已确定的抗生素 优点 1. 准确度高 2. 简单、快速 1. 不一定代表生物效价 缺点 2. 易受杂质干扰

8 抗生素活性表示方法 效价：每毫升或每毫克中含有某种抗生素的有效成分的多少。由单位（u）或微克（μg）表示。
各种抗生素的效价基准是人们为了生产科研方便而规定的。 1mg青霉素钠定为1670单位；1mg庆大霉素定为590单位。

9 分类（按结构与性质）： β–内酰胺类、氨基糖苷类、 四环素类、大环内酯类、 氯霉素类、多肽类、抗肿瘤类 林可霉素类、其他抗生素类

10 第二节 β–内酰胺类抗生素 一、化学结构与性质 * * * 6-APA 青霉素类

11 * * 7-ACA 头孢菌素类

12 * * * * * 青霉素类 头孢菌素类

13 青霉素 （青霉素G、苄青霉素）

14 氨苄西林 （氨苄青霉素）

15 阿莫西林 （羟氨苄青霉素）

16 普鲁卡因青霉素

17 头孢氨苄

18 头孢拉定

19 头孢羟氨苄

20 头孢噻吩钠

21 结构与性质 一、 酸性 （一）羧基 与碱金属(Na+、K+)成盐 易溶于水 Na

22 与有机碱(普鲁卡因)成盐 难溶于水 普鲁卡因青霉素

23 旋光性 （二）手性C 青霉素类 C C C6 头孢菌素类 C C7 (5%头孢唑啉钠溶液 –18～–24°) ﹡ ﹡ ﹡ ﹡ ﹡

24 （三）共轭体系 UV 青霉素类 母核无明显UV 多数有苯环取代基 头孢菌素类 母核有共轭体系

25 青霉素钠UV7-20

26

27 （四）β–内酰胺环 四元环张力大 不稳定性因素 酰胺键易水解 干燥纯净 稳定 水溶液 不稳定

28 （某些金属离子） （温度） 某些氧化剂

29 青霉素的降解反应 例 青霉噻唑酸 青霉醛 青霉素 青霉酸 青霉胺 CO2 α–青霉噻唑酰基羟胺酸 青霉烯酸 H2O/OHˉ 青霉素酶
HgCl2 H2O 青霉素 青霉酸 青霉胺 pH2 100℃ CO2 α–青霉噻唑酰基羟胺酸 NH2OH pH4 青霉烯酸

30

31 二、 鉴别 K+、Na+反应 （一） 焰色→鲜黄色 + 醋酸氧铀锌→↓黄 Na+ 焰色→紫色 + 0.1%四苯硼钠 + Ac→↓白 K+

32 （二）呈色反应 1. 羟肟酸铁反应 β-内酰胺类 NaOH Fe3+/3 H+ 呈色

33 H+ Fe3+/3 （红、棕、褐）

34 2、 与H2SO4 - HNO3反应 头孢菌素类

35 3. 茚三酮反应 α-氨基 △

36 α-氨基、伯胺 某些羟基胺类 酮式 茚三酮 烯醇式 缩合 茚三酮 蓝紫色

37 4. 双缩脲反应 β-内酰胺类 似肽键 （开环分解）

38 蓝紫色

39 5. 与变色酸-硫酸反应 青霉素 阿莫西林 氨苄西林 △（分解） 活泼“-CH2-” 变色酸 显色

40 150℃ （缩合）

41 （缩合）

42 6. 与重氮苯磺酸反应 头孢哌酮 酚羟基 （偶合）

43 （偶合）

44

45 7. 与铜盐反应 专属反应 NaOH 橄榄绿色

46 （三）沉淀反应 1. 遇酸→↓ 在过量HCl或 有机溶剂中溶解

47 2. 有机胺盐反应 （1）重氮化 - 偶合反应 芳伯氨基 重氮化-偶合反应

48 普鲁卡因青霉素 普鲁卡因

49

50 （2）与三硝基苯酚反应 二苄基乙二胺 △

51 三硝基苯酚 mp

52 光谱法 （四） UV法 样品、分解产物 1、 头孢氨苄 λmax = 262nm 青霉素V钠
A280nm/A264nm = 1.30～1.50 Cu2+

53 Cu2+ pH3.8 △

54

55 氯唑青霉素 　 双氯青霉素 　 苯唑青霉素 　 (nm)

56 2、 IR法 β-内酰胺环 酰胺

57 色谱法 （五） 对照品对照法 1、 TLC法 2、 HPLC法

58 三、特殊杂质检查 特殊杂质主要有：高分子聚合物，有关物质，异构体 控制方法：HPLC法，吸收度
聚合物：采用葡聚糖凝胶G-10(40-120μm) 有关物质和异构体:ODS柱

59 聚合物——HPLC法 色谱条件与系统适用性试验 用葡聚糖凝胶G-10（40～120m）为填充剂，玻璃柱内径1.3～1.5cm，床体积50～60mL；流动相A为含3.5%硫酸铵的0.01mol/L磷酸盐缓冲液（取磷酸氢二钠2.19g和磷酸二氢钠0.54g，加水1000mL使溶解，调节pH值至7.0），流动相B为0.01%十二烷基硫酸钠溶液；流速为每分钟1mL；检测波长为254nm。以流动相A为流动相，用1mg/mL蓝色葡聚糖2000溶液进样200L进行测定，理论板数应不低于900，拖尾因子在0.75～1.5，对照品溶液以流动相B为流动相，重复进样200L，峰面积值的相对标准差应小于5.0%。

60 对照品溶液的制备 取头孢他啶对照品适量，精密称定，加水制成含头孢他啶100g/1mL的溶液，摇匀。
测定法 取本品适量，精密称定，加水制成含头孢他啶20mg/1mL的溶液，立即进样200L，以流动相A为流动相进行测定，记录色谱图；另取对照品溶液200L注入液相色谱仪，以流动相B为流动相，记录色谱图，按外标法计算，本品含头孢他啶聚合物以头孢他啶计不得过0.3%。

61 自身对照外标法的原理： 该法是利用特定条件下β-内酰胺类抗生素可以缔合成与高分子杂质有相似色谱行为的缔合物，即在Kav=0处表现为单一的色谱峰。 以药物自身为对照品，测定其在特定条件下缔合时的峰响应指标； 然后改变色谱条件，测定样品，记录样品色谱图中Kav=0处的高分子杂质峰的响应指标， 按外标法计算，即得样品中高分子杂质相当于药品本身的相对含量。

62 有关物质和异构体 例1 头孢呋辛酯中有关物质和异构体的检查：
色谱条件与系统适用性试验：要求头孢呋辛酯A，B异构体之间、头孢呋辛酯A异构体与头孢呋辛酯△2-异构体之间的分离度R﹥1.5；理论板数按头孢呋辛酯A异构体峰计算，n≥1500。 异构体——照含量测定项下方法试验。以A异构体峰的相对tR为1.0，B异构体峰的相对tR约为0.85， 供试品色谱图中A异构体峰的面积与A、B异构体峰的面积和之比应为0.48～0.55。 有关物质——按自身对照法测定有关物质限量

63 △2-异构体是取头孢呋辛酯对照品经加热破坏处理而制得的，其相对tR约为1.2 。

64 吸收度 如青霉素钠（钾）的吸收度检查： 取本品，加水制成每1mL中含1.80mg的溶液，照分光光度法，在280nm的波长处测定吸收度，不得大于0.10；在264nm的波长处有最大吸收，吸收度应为0.80～0.88。 此法中264nm 处吸收值用来控制青霉素钠（钾）的含量，280nm处吸收值用来控制杂质的量。 头孢氨苄中有关物质的检查——反相TLC法 （自学）

65 四、含量测定 碘量法 汞量法 电位络合滴定法 酸碱滴定法 可见-紫外分光光度法 HPLC

66 碘量法 （一） ChP β-内酰胺类 1. 原理 定量过量 水解产物 （水解） 剩余

67 反应分两步进行： 1. 水解反应 (按化学计算量进行) 2. 氧化-还原反应 (无固定的量关系，受温度、PH值和时间等因素影响，应严格控制反应条件并采用标准品平行对照测定)

68 第一步 第二步

69 例 注射用普鲁卡因青霉素 含量测定 取装量差异项下的内容物，精密称取约0.12g，置100ml量瓶中，加水使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置碘瓶中，加1mol/L氢氧化钠溶液1ml放置20分钟，再加1mol/L盐酸溶液1ml与醋酸-醋酸钠缓冲液(pH4.5)5ml，精密加入碘滴定液(0.01mol/L)15ml，密塞，摇匀，在20～25℃暗处放置20分钟，用硫代硫酸钠滴定液（0.01mol/L）滴定，

70 至近终点时加淀粉指示液，继续滴定并强力振摇，至蓝色消失；另精密量取供试品溶液5ml，置碘瓶中，加醋酸-醋酸钠缓冲液（pH4
至近终点时加淀粉指示液，继续滴定并强力振摇，至蓝色消失；另精密量取供试品溶液5ml，置碘瓶中，加醋酸-醋酸钠缓冲液（pH4.5）5ml，精密加入碘滴定液（0.01mol/L）15ml，密塞，摇匀，在暗处放置20分钟，用硫代硫酸钠滴定液（0.01mol/L）滴定，作为空白。同时用青霉素钠对照品同法测定作对照，算出供试品的含量。

71 2. 方法 V样空 供试液 +缓冲液+碘液+回滴 +碱+酸+缓冲液+碘液+回滴 V样 V对空 对照液 +缓冲液+碘液+回滴 +碱+酸+缓冲液+碘液+回滴 V对

72 空白试验 以未经水解的样品作空白测定 A、消除样品已降解产物的干扰 B、消除样品中其他消耗碘的杂 质的干扰 C、消除碘挥发造成的误差

73 空白 样品 I- I2 I2 Na2S2O3

74 采用标准品平行对照测定 A、可消除温度、pH、操作、环 境等条件的影响 B、使本法测定结果与微生物检定 法一致

75 3. 条件 （1）弱酸性 pH4.5 碱↑ I2 → IO I- 酸↑ 普鲁卡因与碘在酸性条件 下会产生复盐沉淀 （2）温度 ～26℃ 温度＞38 ℃ 未水解的供试品亦消耗碘

76 （3）水解时间 以水解20分钟后的耗碘量最大 （4）反应时间 反应20分钟后，耗碘量随时间的 变化较小，可减小含量测定的误 差。

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78 4. 特点 （1）灵敏度高 样品 : 碘 = 1 : 8 （2）反应条件、实验操作要求高 V对、V对空 V样、V样空 1份含量
4I2→8I- 样品 : 碘 = 1 : 8 （2）反应条件、实验操作要求高 V对、V对空 V样、V样空 1份含量 加试剂次序、反应时间、滴定速度相同

79 5. 计算 原料

80 汞量法 （二） ChP 青霉素族 电位络合滴定法 1. 原理 （水解）

81 2. 方法 醋酸盐缓冲液 pH4.6 滴定 水解 样 品 pH4.6 滴定 以未经水解的样品作空白测定

82 例 青霉素钠 含量测定 取本品约50mg，精密称定，加水 5ml溶解后，加1mol/L氢氧化钠溶液5ml ，摇匀，放置15分钟，加1mol/L硝酸溶 液5ml，醋酸盐缓冲液(pH4.6)20ml及水 20ml，摇匀，照电位滴定法(附录Ⅶ A), 用铂电极为指示电极，汞-硫酸亚汞电极 为参比电极，在35～40℃，用硝酸汞滴 定液(0.02mol/L)缓慢滴定，

83 （控制滴定过程约为15分钟），不计第 一个等当点，计算第二个等当点时消耗 滴定液的量。每1ml硝酸汞滴定液(0.02 mol/L)相当于7.128mg的总青霉素(按 C16H17N2NaO4S计算)。 另取本品约0.5g，精密称定，加水 与上述醋酸盐缓冲液各25ml，振摇使完 全溶解，在室温下，立即用硝酸汞滴定 液(0.02mol/L)滴定，终点判断方法同上.

84 每1ml硝酸汞滴定液（0.02mol/L）相当 于7.128mg的降解物（按C16H17N2NaO4S 计算）。 总青霉素的百分含量与降解物的百 分含量之差值即为青霉素的含量。

85 讨论 3、 （1）以第二次滴定突跃为终点 电位法指示终点 （2）反应摩尔比 1 : 1 （3）空白试验 消除已降解产物干扰
（2）反应摩尔比 : 1 （3）空白试验 消除已降解产物干扰 （4）优点 不需标准品

86 4、 计算

87 例 青霉素钠 含量测定 精密称取含水量为0.5%的青霉素 钠0.0502g，按药典方法测定总青霉素含 量时，用去硝酸汞滴定液( mol/L) 6.97ml。另精密称取上述样品0.5013g， 按药典方法测定降解物含量时，用去硝 酸汞滴定液( mol/L)1.33ml。以干 燥品计算，求样品中青霉素的含量。

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89 酸碱滴定法 （三） ChP β-内酰胺类 1、 原理 △ （钠盐）

90 △

91 2、 方法 中和 中和 △

92 例 苯唑西林钠 含量测定 取本品约0.5g，精密称定，加新沸过的并用0.01mol/L氢氧化钠溶液中和至酚酞指示液刚显红色的水20ml，使溶解,再用0.01mol/L氢氧化钠溶液中和后，精密加氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)25ml，摇匀，置水浴中加热20分钟，注意避免吸收空气中的二氧化碳，冷却后，加酚酞指示液1～2滴，用盐酸滴定液

93 （0. 1mol/L）滴定，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的氢氧化钠滴定液(0. 1mol/L)相当于40
（0.1mol/L）滴定，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当于40.14mgC19H19N3O5S。

94 讨论 3、 （1）水解前先中和溶剂和样品 （2）加热时避免吸收CO2 （3）空白试验校正(消除Na2CO3干扰) （4）特点 简便快速
△ 不能使酚酞变红 （3）空白试验校正(消除Na2CO3干扰) （4）特点 简便快速 不适用于有残留酯的产品

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96 可见-紫外分光光度法 （四） 1、 酸水解法（铜盐法） 青霉素族 JP （1）原理 （水解） 稳定剂

97 青霉烯酸

98 （2）方法 标准品对照法 △ （3）特点 实验条件随各药物稳定性不同而定

99 （4）计算

100 2、 硫醇汞盐法 ChP 青霉素族 （1）原理 （咪唑）

101 咪唑

102 （2）方法 对照品法 pH 9 计算

103 例 氨苄西林钠 含量测定 取本品约60mg 置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置另一100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，再精密量取5ml，置25ml量瓶中，加硼酸缓冲液2.5ml与醋酐的乙腈溶液（1→50）0.25ml，放置5min后，加咪唑溶液至刻度，摇匀，置60℃水浴中，加热30min，取出冷却，

104 照分光光度法（附录Ⅳ A ），在325nm的波长处测定吸收度；另取氨苄西林三水合物标准品，按同法测定，计算，即得。

105 （3）讨论 a. 咪唑催化的水解产率高，硫 醇汞盐稳定（≥3h） b. 侧链有-NH2时，需加醋酐先 将其乙酰化后才能发生上述 反应

106 pH9

107 （4）特点 A、简便快速 B、用标准品对照，重现性良 好，RSD≤1%

108 3、 羟肟酸比色法 USP JP β-内酰胺类 NaOH Fe3+/3 H+ 红色

109 HPLC法 （五） ChP 头孢菌素类 这是β-内酰胺类抗生素含量测定的主要方法。中国药典收载的本类抗生素原料及制剂共约70种，应用HPLC法测定含量的有50多种，约占78%。 本类药物的HPLC法通常采用反相HPLC，以外标法计算含量。 特点 快速、高效、灵敏 专属性强、重现性好 一法多用（鉴别、检查、含测）

110 哌拉西宁 原料药 含量测定 色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇–0.2mol/L磷酸二氢钠溶液–10％氢氧化四乙基铵溶液–水（400︰50︰3︰547）用磷酸调节pH值至5.5为流动相。检测波长为254nm。

111 第三节 氨基糖苷类抗生素 链霉素 双氢链霉素 新霉素 卡那霉素 庆大霉素 巴龙霉素

112 链霉素 链霉胍 + 链霉糖 + N-甲基-L-葡萄糖胺 苷元 链霉双糖胺 糖

113 链霉胍 链霉糖 N-甲基-L- 葡萄糖胺

114 链霉胍 链霉糖 N-甲基-L- 葡萄糖胺

115 庆大霉素 绛红糖胺 + 脱氧链霉胺 加洛糖胺 糖 苷元 糖

116 加洛糖胺 绛红糖胺 2-脱氧链霉胺 N-甲基-3- 去氧-4-甲 基戊糖胺 紫素胺

117 绛红糖胺 紫素胺 2-脱氧链霉胺 加洛糖胺 N-甲基-3- 去氧-4-甲 基戊糖胺

118 庆大霉素C复合物 庆大霉素C R=H R1、R2=CH3 庆大霉素C R=R2=H R1=CH3 庆大霉素C1a R、R1、R2=H 庆大霉素C2a R=CH R1= R2=H 　庆大霉素C2b R=R1=H R2=CH3

119 巴龙霉素

120 一、 结构与性质 （一） 碱性 多与硫酸成盐 链霉素 个 庆大霉素 5个 碱性中心 水溶性 溶解性 （二）

121 （三） UV （四） 稳定性 链霉素 pH5～7.5 庆大霉素 pH2～12 稳定 链霉素水解产物反应 （五）
链霉素在230nm，庆大霉素等无紫外吸收 UV （三） 稳定性 （四） 链霉素 pH5～7.5 庆大霉素 pH2～12 稳定 链霉素水解产物反应 （五）

122 坂口反应 麦芽酚反应 N-甲基葡萄 糖胺反应

123 二、 鉴别 茚三酮反应 （一） 羟基胺结构 △

124 N-甲基葡萄糖胺反应 （二） （Elson-Morgan反应） 乙酰丙酮 OH- 吡咯衍生物 对二甲氨基苯甲醛 H+ 红色

125 (缩合)

126 对二甲氨基苯甲醛 H+ 红色

127 麦芽酚反应 （三） 链霉糖特有反应 H+ 分子重排

128 麦芽酚 紫红

129 坂口反应 （四） 链霉胍特有反应 （或α-萘酚） 8-羟基喹啉 α -萘酚

130

131 （四） 反应 H+ UV法 （五） 庆大霉素无UV吸收 IR法 （六） TLC法 （七）

132 三、 检查 链霉素杂质 （一） 链霉素B（甘露糖链霉素） 1. 来源 反应中间体 方法 TLC中的对照品法 （BP）

133 2、硫酸奈替米星中有关物质的TLC检查： 供试品溶液：150mg / mL； 标准品溶液（1） 1.5mg / mL； 标准品溶液（2） 3mg / mL； 标准品溶液（3） 1.44mg西索米星/mL， 点样：各2L， 展开剂：二氯甲烷-甲醇-浓氨溶液（4：4：2） 显色：0.2%茚三酮溶液，110℃加热20min。

134 结果：供试品溶液如显杂质斑点，其颜色 与标准品溶液（3）所显主斑点相比较，不得更深（1%）， 其他杂质与标准品溶液（1）所显主斑点相比较，均不得更深（1%）， 如有一点超过，应不深于标准品溶液（2）的主斑点（2%）。 注：奈替米星是由西索米星经化学衍生而成的半合成抗生素，因此在奈替米星成品中有可能残留西索米星，需进行控制。

135 ChP USP BP JP 庆大霉素C组分的测定 （二） 发酵菌种不同 工艺差别 C组分比例 不一致 对微生物的活性无明显差异 毒副作用和耐药性不同 规定控制各组分的相对百分含量

136 1. 衍生化原理 λmax = 330nm

137 1-烷基硫代-2-烷基 异吲哚衍生物

138 方法 2. RP－HPLC 计算 3. 峰面积归一化法 规定 C ~50% C1a ~40% C2a +C ~50%

139

140 四、 含量测定 链霉素、庆大霉素 微生物检定法 本法系利用抗生素在琼脂培养 基内的扩散作用量反应平行线原理 的设计，比较标准品与供试品两者
对接种的试验菌产生抑菌圈的大小 ，以测定供试品效价的一种方法。

141 五、血清中庆大霉素的HPLC法 血浆样品的预处理 离子对色谱法的目的： 除去氨基酸、肽、胺的干扰 选用OPA为荧光衍生化试剂
采用柱后衍生化法

142 第四节 四环素类抗生素 C B A D

143 7 8 6 5 4 3 2 11 12 1 9 10

144 四环素（TC）tetracycline

145 金霉素 (CTC) chlortetracycline
氯四环素

146 土霉素 (OTC) oxytetracycline
氧四环素

147 多西环素 (DOTC) doxycycline
脱氧土霉素

148 美他环素（METC） metacycline

149

150 一、 结构与性质 两性 （一） 酚羟基、烯醇型羟基 弱酸性 二甲胺基 弱碱性 1. 与酸、碱均能成盐 2. 强酸或强碱中溶解度↑

151 吸湿性 （二） 多含结晶水 UV （三） 与金属离子络合 （四） 与金属离子生成有色配位化合物 Ca2+ Mg2+ Fe3+ Al3+ pH3 ~ 荧光

152

153 不稳定性 （四） 1. 差向异构化 淡黄→黑 蓝色荧光

154 差向四环素

155 （土霉素、多西环素、美他环素不易差向异构化）

156 2. 降解反应 （1）酸性下降解 λmax = 445nm λmax = 435nm 橙黄色

157 6 5 10 脱水四环素

158 ETC ～ TC ＜ ＜ ATC EATC ～

159 （2）碱性下降解 （荧光） 6 11

160 二、 鉴别试验 H2SO4反应 （一）

161 FeCl3反应 （二）

162 Cl-反应 （三） UV法 （四） 1mol/L盐酸-甲醇（1→100） 0.01mg/ml

163 荧光法 （五） UV 绿色荧光 H+ UV

164 IR法 （六） TLC法 （七） HPLC法 （八） 中国药典收载的四环素类抗生素中，除土霉素外均采用红外光谱法鉴别 正相分配薄层色谱
EDTA 克服痕量金属造成的拖尾现象 HPLC法 （八） 中国药典和USP(29)采用高效液相色谱法鉴别盐酸土霉素、盐酸四环素、盐酸多西环素、盐酸金霉素等。

165 三、 检查 盐酸四环素 4-差向四环素（ETC） 有关物质 标准品对照法 （一） 脱水四环素（ATC） 差向脱水四环素（EATC）
盐酸金霉素（CTC） TLC法（1995版） HPLC法（2000，2005版） BP(2005),USP(29)HPLC

166 I. 供试液( 5 mg/ml) ETC ( 0.2 mg/ml) ATC ( mg/ml) IV. EATC ( mg/ml) CTC ( 0.1 mg/ml) VI. 混合液 4％ 0.5％ 0.5％ 2％ 四环素有关物质TLC图

167 （二） 吸收度

168 杂质吸收度

169 四、 含量测定 ChP、USP HPLC法（外标法） 系统适用性试验 1. 防护柱 2. 预试溶液 4-差向脱水四环素 四环素
1. 防护柱 2. 预试溶液 4-差向脱水四环素 四环素 3. RSD≤2.0%

170 JP 比色法（标准曲线法） 原理 标 △ 样 △

171 第十一章 复习内容 1. 熟悉抗生素类药物分析的特点及其 常规检验项目。了解抗生素类药物 的分析现状，熟悉生物学法与物理
第十一章 复习内容 1. 熟悉抗生素类药物分析的特点及其 常规检验项目。了解抗生素类药物 的分析现状，熟悉生物学法与物理 化学法测定效价的原理及优缺点。 2. 掌握β－内酰胺类抗生素的结构、 性质、鉴别及含量测定。

172 3. 掌握氨基糖苷类抗生素的结构、性 质及鉴别，了解其检查及含量测定
4. 掌握四环素类抗生素的结构及性质，了解其鉴别、检查及含量测定 5. 了解抗生素类药物的质量考察方法

173 99：89．下列哪个药物会发生羟肟酸铁反应 A. 青霉素 B. 庆大霉素 C. 红霉素 D. 链霉素 E. 维生素C

174 99m：71．中国药典(2005年版)测定头孢菌素类药物的含量时，多 数采用的方法是
A. 微生物法 B. 碘量法 C. 汞量法 D. 正相高效液相色谱法 E. 反相高效液相色谱法

175 95：139．属于-内酰胺类的抗生素药物有 A. 青霉素 B. 红霉素 C. 头孢菌素 D. 庆大霉素 E. 四环素

176 45．能和茚三酮发生呈色反应的物质有 A．链霉素 B．庆大霉素 C．土霉素 D．氨基酸 E．苯巴比妥

177 96：135.青霉素类药物可用下面哪些方法测定 A. 三氯化铁比色法 B. 汞量法 C. 碘量法 D. 硫醇汞盐法 E. 酸性染料比色法

178 110．能发生重氮化一偶合反应的抗 生素类药物是 A. 青霉素 B. 庆大霉素 C. 苄星青霉素 D. 盐酸四环素 E. 普鲁卡因青霉素

179 99：[116—120]以下反应可适用的药物 A. 青霉素 B. 链霉素 C. 两者均能 D. 两者均不能 116．Kober反应 羟肟酸铁反应 坂口反应 N—甲基葡萄糖胺反应 120. 在酸性溶液中水解 D A B B C

180 98：[126—130] 可以鉴别的药物是 A. 链霉素 B. 庆大霉素 C. 两者均可 D. 两者均不可 126. 用Kober反应 127. 用坂口反应 128. 用麦芽酚反应 129. 用三氯化铁反应 130. 用茚三酮反应 D A A D C

181 问题46～50 A. 茚三酮反应 B. 麦芽酚反应 C. 坂口反应 D. FeC13反应 E. 羟肟酸铁反应 46．头孢唑林钠 47．金霉素 48．链霉素 49．庆大霉素 50．青霉素 E D ABC A E

182 （ ）青霉素分子能与碘定量反应，因此可以根据消耗的碘量计算青霉素的含量。
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183 99m：90．四环素在酸性条件下的降 解产物是 A. 差向四环素 B. 脱水四环素 C. 异四环素 D. 去甲四环素 E. 去甲氧四环素

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