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实验二 免疫血清的制备
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实验目的： 熟悉免疫血清制备的基本过程 了解动物实验的基本知识
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实验原理： 抗原 免疫动物 产生特异性抗体 分离血清(免疫血清、多克隆抗体)
抗原 免疫动物 产生特异性抗体 分离血清(免疫血清、多克隆抗体) 决定抗体质量的相关因素： 抗原纯度、免疫原性、动物应答能力、免疫程序 适当途径、预定方案 一定时间 本实验用绵羊红细胞（SRBC）作为抗原，免疫家兔，制备兔抗羊红细胞免疫血清（溶血素）。
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实验材料： 动物 健康成年雄性家兔（2－3kg） 健康成年绵羊 试剂 20％SRBC悬液、生理盐水、碘酒、 75%酒精
器材 剪刀、镊子、无菌注射器、针头、量筒、 无菌毛细滴管、离心管、三角烧瓶、 动物固定架、手术器械一套、塑料放血管
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实验方法： 1、分组 全班分为9组（每组4人一组） 每组一只兔子
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2、抗原制备（已准备） 碘酒和75％酒精消毒绵羊皮肤并抽取颈静脉血液，注入含有等量阿氏液（玻璃珠）的三角烧瓶内，摇晃混匀。分装后置4℃冰箱内，可使用3周。（已准备） 无菌取上述绵羊血于离心管中，用无菌生理盐水洗涤SRBC3次（2000r/min,离心5min，最后一次离心10min,弃上清） 根据红细胞压积，用生理盐水配成20％SRBC悬液。
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3、免疫动物 测定凝集素 选择健康雄性家兔2－3只 耳静脉采血1ml 分离血清 与羊红细胞做凝集实验，测定有无凝集素 （无或仅有微量时，该兔子可用于免疫）
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免疫动物－用全血和SRBC悬液按下述方案免疫兔子
试血 末次注射后第七天（第22天），耳静脉采血1ml，用试管凝集试验滴定溶血素效价（1：2000以上可用）。 免疫日期 第1天 第3天 第5天 第7天 第12天 第15天 注射途径 皮内 耳静脉 免疫原 全血 20％悬液 剂量 （ml） 0.5 1.0 2.0
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采血并分离血清 心脏采血法收集被免疫兔子的血液于三角烧瓶中 待其凝固、贴壁 4℃冰箱过夜 吸取上层血清 3000r/min,离心10min 收集上层血清待鉴定、纯化， 小量分装，-20℃冻存
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思考： 该实验中应注意哪些事项？
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