实验四：显微化学、荧光鉴别及微量升华鉴别方法

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1 实验四：显微化学、荧光鉴别及微量升华鉴别方法
药植与生药学实验 实验四：显微化学、荧光鉴别及微量升华鉴别方法

2 [实验目的] 1、掌握植物性生药的细胞壁及细胞内含物的一般显微化学试验法； 2、熟悉某些生药成分的显微化学检查法；
3、掌握荧光试验鉴别生药的方法； 4、掌握生药微量升华的方法，并了解其在生药鉴别上的应用。

3 （一）细胞壁的显微化学实验 1、木质化细胞壁：
取甘草粉末少许置载玻片上，加间苯三酚试液和浓盐酸各一滴，装片稍加热，镜检可见木质化细胞壁被染成樱红色或紫红色。

4 （一）细胞壁的显微化学实验 2、木栓化细胞壁：取生姜做徒手切片，置载玻片上，加苏丹Ⅲ试液1滴，稍加热，装片，镜检可见木栓化细胞壁显红色。

5 （二）细胞内含物的显微化学实验 1、淀粉粒：取浙贝母粉末少许，用碘液装片可见淀粉粒被染成紫红色。 2、菊糖：取桔梗粉末少许，加10%α-萘酚乙醇试液和硫酸各一滴，镜检可见菊糖溶解并显紫红色。

6 （二）细胞内含物的显微化学实验

7 （二）细胞内含物的显微化学实验 3、糊粉粒：取除去种皮的蓖麻子，胚乳切成薄片用碘试液装片，镜检可见糊粉粒显棕色；用苦味酸试液装片则显黄色。 4、粘液：取白芨粉末少许，以10%墨汁装片，镜检，可见粘液细胞呈无色透明状，而其他细胞和内含物均染成黑色。

8 白及粘液细胞

9 （二）细胞内含物的显微化学实验 5、挥发油：取生姜做徒手切片，水装片，镜检可见挥发油呈黄色，吸取水液，改用苏丹Ⅲ试液装片，稍加热，可见挥发油染成红色。

10 (三) 生药中主要化学成分的检查 1. 取黄连粉末少许，置载玻片上，加10%盐酸装片后镜检，可见黄色杆状或针状小檗碱盐酸盐结晶。

11 (三) 生药中主要化学成分的检查 2. 取肉桂粉末约0.1g，置小试管中，加氯仿1～2ml浸渍数分钟，吸取氯仿液2滴置载玻片上，速加1%盐酸苯肼试液1滴，装片镜检，可见桂皮醛杆状结晶。

12 （四）荧光试验 1. 取大黄乙醇液，点在滤纸上，干后置紫外光灯下观察显深棕色荧光。
2. 取黄连乙醇液，点在滤纸上，干后置紫外光灯下观察显金黄色荧光。 3. 取木通乙醇液，点在滤纸上，干后置紫外光灯下观察显浅天蓝色荧光。

13 （四）荧光试验 4. 取秦皮乙醇液，加蒸馏水2ml稀释后，在常光及紫外光下观察颜色。
5. 取三七甲醇温浸液滴于滤纸片上，干后置紫外光下观察，显浅蓝色荧光。 6. 取伪品大黄乙醇液，点在滤纸上，干后置紫外光灯下观察显亮蓝紫色荧光。

14 (五) 微量升华 取大黄粉末少量，置微量升华金属圈中，上面覆盖一载玻片，徐徐加热，至载玻片上有淡黄色物质出现时，将之取下调换另一载玻片，如此连续调换3-4次，至生药粉末开始变焦为止。 在显微镜下观察各载玻片上微量升华结晶的颜色和形状、注意结晶形状的变化。 结晶滴加NaOH后，颜色有何变化。

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18 作 业 1. 记录显微化学试验的结果。 2. 列表记录荧光试验的结果。 3. 绘图标明不同时间收集的大黄微量升华物结晶形状的变化。

19 木质化细胞壁+间苯三酚+浓盐酸---紫红色
淀粉粒+碘试液—显蓝色 菊糖+ 10%α-萘酚+浓硫酸---显红色 糊粉粒：蓖麻胚乳切薄片+碘试液--显棕色； +苦味酸---显黄色。 白芨+10%墨汁—粘液细胞不被染色 生姜切片+苏丹Ⅲ试液—加热挥发油滴显红色 黄连粉+10%盐酸--黄色杆状或针状小檗碱盐酸盐结晶 肉桂氯仿液2滴+1%盐酸苯肼--可见桂皮醛杆状结晶。 大黄粉末置微量升华金属圈中，上盖一载玻片，加热至载玻片 上有淡黄色物质出现时，取下调换另一载玻片，如此连续调换 数次、至生药粉末开始变焦为止。观察各载玻片上微量升华结 晶的颜色和形状、注意结晶形状的变化。