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蛋白定量 Bradford BCA UV light 三強鼎立，誰與爭鋒 上映日期: 西元 月 3日 吉時 導演: 李惟宇
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Bradford assay Van der Waals forces 謀略: 見縫插針
武器 破綻: 謀略: 陰陽調合 positive charges Basic buffer conditions Detergents (SDS ……)
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BCA assay 遙想公瑾當年…… Protein + Cu Protein-Cu2+ complex (biuret reaction) Protein-Cu Cu1+ + protein oxidation product OH- Aromatic amino acid
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錦囊妙計: 氧化還原反應 Cysteine 破綻: 還原劑 Mercaptoethanol (2-ME)
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UV Spectrophotometric assay
戰鬥力 OD275, OD280 比爾定律: Lambert-Beer law 破綻: OD280 吸光的物質
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別亂插!
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十萬個為什麼! 破壞的 SDS=界面活性劑=清潔劑=無止境的泡泡 R2, 怎麼那麼小? Loading 的量不同, 可以比較嗎?
雪特! 哪來的泡泡? 破壞的 團結就是 力量 無奸不成師 SDS=界面活性劑=清潔劑=無止境的泡泡
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UV Spectrophotometric assay
BCA assay E E E E E4 0.2% 1 % SDS 1 5 16 mM 2-ME 10 BSA S1 3 H2O 17 11 2 15 1mM 6 Reagent 加入後，離心，交給助教 30 min.，loading，等待結果 UV Spectrophotometric assay 三倍稀釋未知濃度蛋白(U) 專人伴你上機(問題補充到結報) 藉由標準曲線回歸濃度(紀錄本上) mg/ml OD280 0.375 0.29 0.75 0.568 1.5 1.159
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愛注意喔! 現場請處理乾淨 12/10 請交實驗一的結報 12/10 第一次小考，13:15 開考 下次上課前，實驗二的預報與問題要找到答案
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