第七章 苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析 1

第一节 结构与性质 2 具有烃胺侧链，属于芳烃胺类药物。多数在苯环 上有 1  2 个羟基取代基。 HO HO CH O H CH 2 NHR

代表药物 3 肾上腺素 盐酸麻黄碱 盐酸克伦特罗

性质 ： 1. 酚羟基特性 邻苯二酚或苯酚结构，可与重金属离子络合呈色； 易被氧化呈色。 4 3. 具有旋光性 具有手性碳原子，具有光学活性。 4. 紫外特征吸收 2. 弱碱性 具有烃胺侧链（仲氨），显弱碱性。能与酸成盐。

第二节 鉴别试验 1 、三氯化铁反应 ( 酚羟基 ) ： 在 0.1mol/L 盐酸中与 Fe 3+ 显翠绿色，加氨试液后， 显紫色或紫红色 2 、甲醛 - 硫酸反应 本类药物与甲醛硫酸反应生成具有醌式结构的 有色物质 5

3 、还原性反应 4 、双缩脲反应：氨基醇结构与硫酸铜的反应 盐酸麻黄碱 + 硫酸铜 → 蓝紫色 + 乙醚 5 、 与亚硝基铁氰化钠的反应（ Rimini 试验） 脂肪伯氨 + 丙酮＋碳酸氢钠＋亚硝基铁氰化钠 → 红紫色 6 、紫外分光光度法与红外分光光度法

第三节、特殊杂质与检查 一、酮体杂质的检查

二、光学纯度的检查 方法： HPLC 或 HPCE 以高压电场作为驱动力，以毛细管为分离通 道，依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的 差异而实现分离的一种液相分离技术。是经典电 泳技术和现代微柱分离技术相结合的产物.

第四节、含量测定 一、非水溶液滴定法 非水溶剂总进行的酸碱滴定法。主要用来测定有机 碱及其氢卤酸盐、磷酸盐、硫酸盐、有机酸盐等。 非水溶剂：酸性溶剂 - 测定有机弱碱，冰醋酸 碱性溶剂 - 测定有机弱酸， DMF 两性溶剂 - 兼测酸、碱，甲醇 惰性溶剂 - 甲苯、丙酮等

本类药物分子中侧链脂烃胺显碱性非水碱量法测定。 溶剂：冰醋酸－醋酐；指示剂：结晶紫或电位法； 滴定剂：高氯酸 注意：氢卤酸盐药物若用结晶紫指示终点需用醋酸 汞消除干扰；含氨基的药物如果需加入醋酐，应在 加入冰 HAc 溶解放冷后再加醋酐，防止氨基被乙酰 化。

( 一 ) 基本原理： 在水中碱性较弱，不能顺利地进行中和滴定。在酸性非水介 质中（如 HAc 中），则能显示出较强的碱性，滴定突跃增大，可 以顺利地进行中和滴定。 当 HA 酸性较强时，反应不能定量 完成，必须除去或降低 HA 的酸性， 使反应顺利地完成。 BH +  A - + HClO 4 BH +  ClO 4 + HA 游离碱类盐被置换出的弱酸 因此，要根据不同情况采用相应测定条件。

( 二 ) 一般方法 供试品供试品 + 冰醋酸+⌒醋酐+醋酸汞冰醋酸+⌒醋酐+醋酸汞 10ml~30ml 若供试品为氢卤酸盐，若使用结晶 紫指示终点，再加 5% 醋酸汞的冰 醋酸液 3ml~5ml 结果结果 高氯酸滴定液滴定 以空白 试验校 正

1. 适用范围： 主要用于 K b ＜ 的有机碱盐的含量测定。 对碱性较弱的杂环类药物，只要选择合适的溶剂、滴定剂和终点 指示的方法，可使 pK b 为 8 ～ 13 的弱碱性药物采用本法滴定。 一般来说： K b 为 ～ 时，宜选冰醋酸作为溶剂； 药物的 K b 为 ～ 时，宜选冰醋酸与醋酐的混合溶液； K b ＜ 时，应用醋酐作为溶剂。 另外，在冰醋酸中加入不同量的甲酸，也能使滴定突跃显著增 大，使一些碱性极弱的杂环类药物获得满意的测定结果。 ( 三 ) 问题讨论

2. 酸根的影响： 无机酸类，在醋酸介质中的酸性以下列排序递减： 高氯酸＞氢溴酸＞硫酸＞盐酸＞硝酸 （ 1 ）氢卤酸盐的测定： 消除 HX 干扰的方法：①加 Hg(Ac) 2 ；②或者采用醋酐作 溶剂，电位法指示终点。 2B · HX + Hg(Ac) 2 → 2B · HAc + HgX 2 过量 (1 ～ 3 倍 ) 不影响测定结果

（ 2 ）硫酸盐类药物测定 硫酸是二元酸，在水溶液中能完成二级解离，生 成 SO 4 2- ，但在非水介质中，只显示一元酸解离为 HSO 4 ， 即只供给一个 H + ，所以硫酸盐类药物在冰醋酸中，只 能滴定至硫酸氢盐，因此可以用高氯酸滴定液直接滴 定。

硫酸奎宁测定： 奎宁为二元碱，其中喹核碱的碱性较 强，可与硫酸生成盐；而喹啉环的碱性极弱，不能与硫酸成盐， 而保持游离状态。

(C 20 H 24 N 2 · H + ) 2 SO 4 + 3HClO 4 → (C 20 H 24 N 2 · 2H + )·2ClO (C 20 H 24 N 2 · 2H + )·HSO 4 - ·ClO 4 - Ch.P 和 USP(24) 都采用此法测定硫酸奎宁和硫酸奎尼丁的含量。

+ 3HClO 4 + (C 20 H 24 N 2 · H + ) 2 SO 4 + 3HClO 4 → (C 20 H 24 N 2 · 2H + )·2ClO (C 20 H 24 N 2 · 2H + )·HSO 4 - ·ClO 4 -

（ 3 ）硝酸盐的测定 硝酸在冰醋酸介质中酸性不强，滴定反应可以进行 完全。 但是硝酸具有氧化性可以破坏指示剂使其变色，使 指示剂无法指示终点。因此采用非水溶液滴定法测定 硝酸盐时，一般不用指示剂法而用电位法指示终点。

3. 滴定剂的稳定性 水的膨胀系数是 0.21×10 -3 /  C HAc 膨胀系数是 1.1×10 -3 /  C ，较大，体积随温度变化 较大，且还具有挥发性。 测定样品与标定标准溶液时温度不同，应对浓度进 行校正。 配制时，根据 HAc 和 HClO 4 含水量，加入计算量的醋酐

4 、终点指示方法 最常用的指示剂是结晶紫，少量电位法 紫 蓝 蓝绿 绿 黄绿 黄 （碱性区） —————→ （酸性区） 终点的颜色应用电位法校准。

二、溴量法：以盐酸去氧肾上腺素为例。 1 ）原理： Br 2 +2KI→2KBr + I 2 I 2 + 2Na 2 S 2 O 3 →2NaI + Na 2 S 4 O 6 2) 操作要点 ①游离溴及碘极易挥散，操作过程中防逸失 ②不能加入太过量的溴液，以防酚羟基氧化或溴化。 ③平行条件作空白，校正操作中溴及碘挥发。 22

三、亚硝酸钠法 具有芳伯氨基药物，在酸性条件下与 NaNO 2 反应生成重 氮盐，根据消耗 NaNO 2 量，计算出含量。盐酸克伦特罗 分子结构中含有芳伯胺基，可用此法测定含量。 23

4 、紫外分光光度法与比色法 5 、高效液相色谱法 6 、体内药物分析 24 盐酸克伦特罗的测定：

猪肉中克伦特罗、沙丁胺醇、土霉素、四 环素残留量的 HPLC 同时测定方法研究 25 样品的提取与净化：准确称取 10.0g 绞碎的猪肉样品于 50mL 离心 管中，加入 5.0mL 0.01 mol/L EDTA-2Na 和 5.0 mL 0.3% 磷酸溶液， 混匀 2 min ，超声提取 15 min 后加 1.0 mL 高氯酸（ 1:1 ），混均 1 min ，于 4000r/min 离心 15 min ，收集上清液。残渣中再加入 5.0mL 0.01 mol/L EDTA-2Na 、 5.0 mL 0.3% 磷酸溶液、 1.0 mL 高 氯酸（ 1:1 ），混匀 1 min ，超声提取 10 min ，于 4000r/min 离心 10 min ，合并上清液备用。 分别用 10mL 甲醇、 10mL 蒸馏水先后淋洗 C18 柱，流速为 1.0 mL/min 。将上述提取液全部过 C18 柱，流速 0.1mL/min 富集，先 用 6mL 蒸馏水淋洗柱，流速 0.2mL/min ，再用甲醇洗脱，流速 0.2 mL/min ，收集洗脱液 15mL 于离心管中，于 40 ℃水浴中氮气吹干， 用 0.1mL 0.01 mol/L 盐酸溶解残渣，混匀 30s ， 4000 r/min 离心 10min ，上清液供液相色谱测定。

26 色谱条件： 流动相：乙腈∶ 0.02mol/L KH 2 PO 4 +30μmol/L EDTA- 2Na(pH=3.5) 梯度洗脱， 0min （ 12 ∶ 88 ） →6min （ 22 ∶ 78 ）； 流速： 1.0 mL/min ；柱温： 40 ℃； DAD 检测器波长编 程： 196nm (0 ～ 2.8min) ， 360nm (2.8 ～ 8.5min) ， 210nm (8.5 ～ 15min) ；进样量： 10μL