<病原生物学与免疫学基础》 免疫学应用

免疫学检测 1、 抗原或抗体的检测 免疫学诊断

抗原抗体反应的原理 抗原的抗原决定簇与抗体的抗原结合部位之间的结构互补性。 两者相互结合，在适宜条件下，出现可见反应。

抗原抗体反应的特点 1、特异性 2、比例适合 3、可逆性

应 用 1、利用已知抗原检测未知抗体 （1）检测病原微生物的相应抗体以辅助诊断疾病： 伤寒病、流行性乙型脑炎、AIDS病等。 应 用 1、利用已知抗原检测未知抗体 （1）检测病原微生物的相应抗体以辅助诊断疾病： 伤寒病、流行性乙型脑炎、AIDS病等。 （2）检测自身抗体——诊断自身免疫病：SLE、类风湿性关节炎等 2、利用已知抗体检测未知抗原 （1）鉴定病原菌：诊断疾病 （2）检测肿瘤相关抗原：检测甲胎蛋白以诊断肝癌 （3）检测血型抗原、HLA抗原：鉴定血型，亲子鉴定 （4）检测药物半抗原： 确认运动员是否服用兴奋剂

抗原或抗体的检测方法 凝集反应 沉淀反应 补体参与的抗原抗体反应 免疫标记技术

凝集反应（agglutination） 颗粒性抗原（红细胞、细菌、 乳胶颗粒等）与相应抗体在一定条件下形成肉眼可见的凝集物。 1 、直接凝集 玻片凝集、试管凝集（肥大反应） 2、间接凝集 正向间接凝集反应（抗原致敏载体，检测未知抗体） 反向间接凝集反应（抗体致敏载体，检测未知抗原） 3、抗球蛋白试验（Coombs试验） 抗原与单价抗体（不完全抗体）结合不出现凝集块，再加入抗球蛋白后即形成凝集块。 用于检测抗Rh抗体以诊断新生儿溶血性贫血。

沉淀反应 1、单向免疫扩散（single immunodiffusion）： 常用于测定IgG、IgM、IgA、C3、C4等。

双向琼脂扩散试验 应用： 检测未知抗原或者抗体 抗原性质分析 抗体效价测定 抗原抗体纯度坚定

免疫标记技术

免疫标记技术 用标记物标记抗体或抗原进行抗原抗体反应借以提高免疫学诊断的敏感性 放射性同位素： 125I、131I 酶：辣根过氧化物酶、硷性磷酸酶 荧光素 ：异硫氰酸荧光素、 罗丹明 酶免疫检测法（EIA） 免疫荧光检测法（IFA） 放射免疫检测法（RIA） 液相（ELISA）、固相（免疫组化技术）

流式细胞仪

临床应用 T、B细胞及其亚群的鉴定 血清中自身抗体的检测 组织中Ig及补体组分的检测 肿瘤抗原的检定 细菌和病毒的快速检定 特异的组织固定抗体检测

淋巴细胞的测定

(一)淋巴细胞的分离： 外周血葡聚糖-泛影葡胺密度梯度离心法 单核细胞 吸附分离 白膜层 B 淋巴细胞 过尼龙毛柱分离 T

细胞免疫功能的检测 淋巴细胞的分离 1500rpm, 20度, 30min

T细胞功能测定 ◆ 淋巴细胞转化试验 ◆ T细胞介导的细胞毒试验原理 ◆ T细胞功能的体内检测法

（1）T细胞增殖试验（淋转） 丝裂原、抗CD3单克隆抗体等能非特异地激活T细胞，使之发生转化增殖，计算淋巴母细胞转化率（正常值65~80%） 。 ①形态学观察法 ②3H-TdR渗入法：用液体闪烁仪测定样品的β射线放射活性 ③MTT法

（2）细胞因子检测： 鉴定分离的淋巴细胞亚群，监测某些疾病状态的细胞免疫功能。IL-2、IL-2R、rIFN 、TNF等检测 ①ELISA法 ②生物活性测定法 ③聚合酶链反应（PCR）法

B细胞功能测定 （1）B细胞增殖试验：LPS、SPA刺激，检查抗体形成细胞的数目 （2）抗体形成细胞测定—— 溶血空斑试验 （hemolytic forming cell assay，HFC）计算HFU/ml

免疫预防

问题： 1.你知道注射“乙肝疫苗、卡介苗、白白破三联疫苗”的目的是什么？机制？属于何种免疫？ 2.你知道注射“丙球、胎盘球蛋白、抗毒素、IL-2、IFN”的目的是什么？机制？属于何种免疫？ 3.注射疫苗和注射丙球等制剂获得免疫力的方式各有什么特点？ 4．请你举一个实例说明何时使用疫苗、何时使用丙球等制剂？理由及注意事项。

教学目标 1.掌握人工主动免疫（概念、特点、主要生物制剂的种类及应用意义，活疫苗及死疫苗的优、缺点）;人工被动免疫（概念、特点、主要生物制剂的种类及应用意义），及二者的区别。 2.了解免疫增强药物及免疫增强疗法;免疫抑制剂及免疫抑制疗法;生物应答调节剂（概念、种类及生物学功能）。

Jenner 和 Pasteur , 著名的免疫学家，公认为免疫接种和主动免疫的先驱。 Louis Pasteur Edward Jenner Jenner 和 Pasteur , 著名的免疫学家，公认为免疫接种和主动免疫的先驱。

狂犬病Rabies 天花Smallpox virus 脊髓灰质炎 Polio 风疹 Rubella Hepatitis A                                  狂犬病Rabies  天花Smallpox virus 脊髓灰质炎 Polio 风疹 Rubella Hepatitis A  Hepatitis B 流感Influenza 轮状病毒 Rotavirus 白喉 diphtheria Pertussis 百日咳

免疫预防 是控制和消灭传染病的重要手段 自然免疫: 自然主动免疫、自然被动免疫。 人工免疫 人工主动免疫、人工被动免疫

人工主动免疫 给机体输入抗原物质，使免疫系统因抗原的刺激，产生类似感染时所发生的免疫过程，从而产生特异性免疫力。

人工主动免疫制剂 1．灭活疫苗 2．减毒活疫苗 3．类毒素 4．亚单位疫苗 5．结合疫苗 6．合成肽疫苗 7．基因工程疫苗

死疫苗和活疫苗的比较 种类 死疫苗 活疫苗 制剂性状 灭活的病原体 毒力减弱（无毒）的活病原体 接种次数及量 2-3次，用量大 （间隔7-10天） 1次，用量小 稳定性 稳定，易保存 稳定性差，不易保存 副作用 无毒力回复突变 有毒力回复突变

新型疫苗 亚单位疫苗 乙肝亚单位疫苗 脑膜炎球菌 合成肽疫苗 重组抗原疫苗 重组乙型肝炎病毒表面抗原 重组载体疫苗 转基因植物疫苗

禁忌症 免疫缺陷病、正使用免疫抑制剂 严重心、肝、肾病等 严重甲亢、糖尿病等 活动性结核、急性传染病 孕妇 女性月经期

人工被动免疫 将一个免疫了的供体（immune donor）的血清或免疫球蛋白（ gamma-globulins ）转入到一个未免疫的个体. 没有抗原刺激免疫系统 免疫细胞 ？

人工被动免疫生物制剂 1．抗毒素 2.正常人血浆丙种球蛋白和胎盘丙种球蛋白： 3.细胞因子与单克隆抗体

疫苗的基本要求与应用 疫苗的基本要求 疫苗的应用 1．安全性 2．有效性 3．实用性 1、抗感染 2、抗肿瘤 3、计划生育 4、防止免疫病理损伤

复 习 题 一、名词解释 凝集反应、沉淀反应、人工主动免疫、 人工被动免疫、类毒素 二、问答题 1、简述抗原抗体反应的特点。 复 习 题 一、名词解释 凝集反应、沉淀反应、人工主动免疫、 人工被动免疫、类毒素 二、问答题 1、简述抗原抗体反应的特点。 2、何谓免疫标记技术？常用的标记物有哪些？ 3、试比较人工主动免疫与人工被动免疫。 4、简述人工主动免疫常用的生物制剂。