第五章 精液检查

学习目标 1. 熟悉精液检查的目的和标本送检的 注意事项 2. 学会精液一般性状检验的方法 3. 能进行精液显微镜检验 4. 掌握精液正常参考值及临床意义 返 回

精液检查 一、标本收集和送检 二、一般性状检查 三、显微镜检查 四、精子功能检查 五、计算机辅助精子分析 六、练习题 返 回

概 述 精液主要由精子和精浆两部分组成 精子是男性的生殖细胞，约占精液的5% 精浆是运送精子的载体，约占精液的95% 返 回

概 述 精浆是由精囊液、前列腺液、尿道球腺及尿道旁腺等多种腺体分泌的混合液体。 概 述 精浆是由精囊液、前列腺液、尿道球腺及尿道旁腺等多种腺体分泌的混合液体。 精囊液中含有大量维持精子生命活动的物质，其中果糖为精子提供营养及活动能量， 凝固酶可维持精液的粘稠度。 前列腺液为弱碱性乳白色液体，含多种营养物质，其中纤溶酶（液化因子）可使精液在短时间内液化为稀薄的液体，有利于精子运动。 返 回

精液检验的目的 ①评估男性生育功能，为不育症的诊断和疗效观察提供依据； ②协助诊断男性生殖系统疾病； ③输精管结扎术后疗效观察； ④计划生育科研； ⑤为体外受精和精子库筛选优质精子； ⑥法医学鉴定。 返 回

精液标本送检的注意事项： ①采样前禁欲3～5天； ②采样后立即送检； ③送检时间不超过1h； ④传送时注意保温； ⑤精液标本按照潜在生物危害物质处理。 返 回

精液检查项目 精液常规检查（简便实用的传统项目） 精子功能检查 精浆生化分析 免疫学检查 微生物学检查 遗传基因检查 计算机辅助精子分析系统。 （其他检验项目目前多只在专门的男性实验室中进行） 返 回

精液检查项目 { 一般性状检查 精液常规检验的内容包括 显微镜检查 一般性状检查主要包括精液外观、量、粘稠度、液化时间、酸碱度； 显微镜检查主要有精子活率、精子活动力、精子计数、精子形态观察、精液细胞学检查等。 显微镜检查 返 回

精液一般性状检查 （一）精液外观 正常人刚排出的精液呈胶冻状有高度的粘稠性；外观呈灰白色或乳白色不透明的液体；自行液化后为较稀薄的半透明乳白色；久未排精者可略带灰黄色。 血性精液见于生殖系统急性炎症、结核、肿瘤等。 脓性精液见于精囊炎或前列腺炎时。 返 回

精液一般性状检查 （二）精液量 将液化的精液用小量筒或移液管测定全部精液量，以毫升数报告。 正常人一次排出精液约为2～5ml，精液量＜1ml或＞8ml，即可视为异常。 返 回

精液一般性状检查 精液量减少：占男性不孕症的22%。见于前列腺和精囊病变、射精管阻塞，先天性精囊缺如等。 精液量增多：占男性不育症的5%。此可因垂体前叶促性腺素的分泌功能亢进，使雄激素的水平升高所致。 返 回

精液一般性状检查 指排精后精液自行从胶冻状转变为流动状所需的时间。 液化时间观察标本应放在37℃，每10min观察一次。 （三）精液液化时间 返 回

精液一般性状检查 （三）精液液化时间 正常精液是一种均匀粘稠的液体，射精后立即凝固，5～10min后开始液化，30min完全液化。 超过60分钟不液化，视为异常；24小时不液化者，为不育原因之一，可直接报告24小时不液化。 返 回

精液一般性状检查 （三）精液液化时间 前列腺炎症时，因炎症破坏纤溶酶，可导致精液不液化或液化不完全，抑制精子活力，从而减少受孕机会。 返 回

精液一般性状检查 （四） 精液粘稠度 指完全液化后的粘度。 在精液全部液化后，可用直接玻璃棒法测定：用玻璃棒提拉粘液丝，正常粘丝长度不超过2cm。粘稠度增加时，精液悬滴可形成长于2cm的长丝。 返 回

精液一般性状检查 粘稠度测定可分为3级： Ⅰ级，为30min基本液化，用玻璃棒提拉精液呈细丝状粘液丝； Ⅲ级，为24h仍不液化，无法用玻棒提拉起，粘稠度高，涂片困难。 返 回

精液一般性状检查 精液粘稠度增高见于前列腺炎症，常伴有不液化，可阻抑精子活动力。 粘稠度减低见于先天性无精囊腺及精子浓度太低或无精子症。 返 回

精液一般性状检查 （五）精液酸碱度 用精密pH试纸测定精液的pH值。正常为弱碱性，pH为7.2～8.0。 返 回

精液一般性状检查 返 回

精液显微镜检查 （一）精子存活率 （二）精子活动力 （三）精子计数 （四）精子形态观察 （五）精液细胞检查 返 回

精液显微镜检查 方法： 待精液完全液化、充分混匀后，取适量标本涂于载玻片上，直接湿片观察。 通常先在低倍镜下粗略观察有无精子。 如果镜下未见精子，应将全部精液离心，取管底沉淀物再涂片观察，如仍无精子，则报告“查无精子”，可判定为无精子症，不必继续镜检。 返 回

精液显微镜检查 直接涂片观察有无精子，可判断输精管结扎术是否成功，一般于手术后第6周开始检查，每周1～2次，连续观察3次，查无精子则手术成功。 返 回

精液显微镜检查 （一）精子存活率 以活精子所占精子总数的百分率来表示。 返 回

精液显微镜检查 （一）精子存活率 检查方法 1.直接涂片法 -湿片法： 1.直接涂片法 -湿片法： 取液化精液一滴涂于载玻片上，高倍镜下直接观察5～10个视野， 计数活动精子百分率 返 回

精液显微镜检查 （一）精子存活率 检查方法 2.伊红染色法 -干片法 2.伊红染色法 -干片法 在载玻片上加新鲜精液和5g/L伊红Y染色液各1滴，混匀，30s后推成薄片高倍镜下直接观察。 活精子不着色，死精子染成红色。 （精子死亡后，细胞膜的完整性受损，失去屏障功能，易于着色） 返 回

精液显微镜检查 （一）精子存活率 参考值 精子活率≥75%（伊红染色法） 临床意义 主要用于男性不育症的检查 返 回

精液显微镜检查 （二）精子活动力 是指精子向前运动的能力。 WHO把精子活力分为a、b、c、d四级 返 回

精液显微镜检查 （二）精子活动力 结果判断 a级：快速向前运动 b级：慢速或呆滞的向前运动 c级：非前向运动 d级：不动 返 回

精液显微镜检查 方 法 （二）精子活动力 取10l标本涂片，连续观察至少5个视野，计数同一视野内各级精子数量。 （至少对200个精子进行分级） 返 回

精液显微镜检查 （二）精子活动力 参考值 a级精子≥25% 或a级+b级精子之和≥50% （正常精液采集后60min内） 返 回

精液显微镜检查 （二）精子活动力 临床意义 主要用于男性不育症的检查。 返 回

精液显微镜检查 （三）精子计数 是指每升精液中的精子数量，即精子浓度。 返 回

精液显微镜检查 （三）精子计数 原理 用碳酸氢钠破坏精液的粘稠性，以甲醛固定精子，稀释后充入计数池内计数。 返 回

精液显微镜检查 （三）精子计数 试 剂 精子稀释液：碳酸氢钠5g，40%甲醛溶液1ml， 蒸馏水加至100ml，待完全溶解过滤后使用。 试 剂 精子稀释液：碳酸氢钠5g，40%甲醛溶液1ml， 蒸馏水加至100ml，待完全溶解过滤后使用。 返 回

精液显微镜检查 （三）精子计数 操 作 1. 取精子稀释液0.38ml， 2. 加液化并充分混匀的精液20l，摇匀。 操 作 1. 取精子稀释液0.38ml， 2. 加液化并充分混匀的精液20l，摇匀。 3. 充池，静置1～2min， 4. 在高倍镜下以精子头部做为基准计数。 （计数区域一般为中央大方格内的5个中方格） 返 回

精液显微镜检查 （三）精子计数 计 算 精子数/L =5个中方格所数精子数×5×10×20×106/L =5个中方格内精子数×109 返 回

精液显微镜检查 第3版《全国临床检验操作规程》规定： 如每个中央中方格内﹥40个精子， 应计数5个中方格 每个中央中方格内10～40个精子，计数10个中方格 每个中央中方格内﹤10个精子，计数25个中方格 返 回

精液显微镜检查 （三）精子计数 参考值 正常精子浓度≥20×109/L 返 回

精液显微镜检查 （三）精子计数 临床意义 精子计数＜20×109/L为精子数量减少，可影响受孕。 注意 正常人精子数变化较大，出现一次异常结果，应隔1周后复查，反复查2～3次方能得出比较正确的结果。在临床实践中少数计数偏低者，仍有生育能力，故判断一个男性的生育能力应经多次检验后，结合精液检验的其他指标综合分析。 返 回

精液显微镜检查 精子数量减少的原因： ①精索静脉曲张；②先天性或后天性睾丸疾病，如睾丸畸形、萎缩、结核、淋病、炎症等；③输精管或精囊缺如；④重金属损害，如铅、镉中毒或放射性损害；⑤某些药物，如抗癌药等；⑥50岁以上男性精子数逐年减少。 返 回

精液显微镜检查 （四）精子形态检查 方法一：直接涂片高倍镜下观察（湿片法） 方法二：瑞-姬染色法（常用的染色法） 方法三：改良巴氏染色法（男性实验室常采用） 返 回

精液显微镜检查 （四）精子形态检查 方法 1.瑞-姬染色法： 取液化混匀的精液1滴涂片，干燥后行瑞-姬氏 染色，油镜下观察并计数100～200个精子， 报告正常或异常精子百分率（%）。 返 回

精液常规检查 精液显微镜检查 精子形态 正常精子形似蝌蚪状，分头、体、尾三部分，头部呈卵圆形或梨形，体部轮廓直而规则， 尾部细长约50～60m。 返 回

精液显微镜检查 异常精子包括头部异常、体部异常、尾部异常及混合异常。 头部异常如大头、小头、双头、不规则头、头部边缘不齐等； 体部异常如双体、体分支、体部短小、体消失等； 返 回

精液显微镜检查 2.改良巴氏染色法 （四）精子形态检查 在载玻片上滴1滴精液，约5～20l制片，待干后，用95%乙醇和乙醚等量混合液固定5～15min；行改良巴氏染色，在油镜下观察100～200个精子。 返 回

精液显微镜检查 （四）精子形态检查 参考值 正常形态精子为82%～94% 临床意义 正常精液中异常精子应＜20%，如超过20%为不正常。感染、外伤、高温、放射线、酒精中毒、药物、精索静脉曲张均可造成畸形精子数量增加。 返 回

精液显微镜检查 （五）精液细胞检查 1.未成熟生殖细胞 是指各阶段发育不完全的生精细胞， 包括精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞及 发育不全的精子细胞。 这些细胞的形态、大小及核的形态、大小均不规则。 返 回

精液显微镜检查 （五）精液细胞检查 参考值 未成熟生精细胞＜1% 临床意义 正常人成熟精细胞＞99%，在病理情况下，当曲细精管受损（药物或他因素），精液中可出现较多的未成熟生精细胞。 返 回

精液显微镜检查 返 回

精液显微镜检查 2.红细胞、白细胞 正常精液中可存在少量的红细胞、白细胞。精液中白细胞主要是中性粒细胞，在直接涂片镜检时易将生精细胞与白细胞混淆，可用过氧化物酶染色法加以鉴别，前者为阴性，后者为阳性。 返 回

精液显微镜检查 （五）精液细胞检查 参考值 正常精液中红细胞偶见、白细胞＜5/HP。 临床意义 精液中红细胞、白细胞增高，可见于生殖道炎症、结核、恶性肿瘤等。 （按WHO标准，精液中白细胞＞1×109/L的不育症患者称为白细胞精子症） 返 回

精液显微镜检查 返 回

精液常规检查参考值及异常情况归纳表 检查项目 参考值 异常情况 外观 精液量 液化时间 粘稠度 酸碱度 精子活率 精子活动力 （60min内） 精子计数 精子形态 红、白细胞 灰白色或乳白色 脓性或血性 2～5 ml/1次 ＜1ml或＞8ml 30min完全液化 ＞60min不液化 Ⅰ级、粘丝长度＜2cm Ⅱ级或Ⅲ级、粘丝长度＞2cm pH值7.2～7.8 pH＜7.0或pH＞7.8 ≥75%（伊红染色法） ＜60% a级精子≥25%， 或a级+b级精子之和≥50% a级＜25%； 或a级+b级精子＜50% ≥20×109/L ＜20×109/L 正常形态精子82%～94% 异常精子＞20% ＜5/HP ＞5/HP 返 回

四、精子功能检查 （一）体内穿透试验 在排卵期或近排卵期性交后数小时，检查宫颈口粘液活精子数量、活率及活动力，从而评价精子穿透宫颈粘液的能力。本试验标本的采集时间必须是女方排卵期或近排卵期。 【正常参考区间】 性交4～6h后，可见正常活动度精子数＞25 / HPF；6～8h后，＞70 / HPF。 返 回

四、精子功能检查 （一）体内穿透试验 【临床意义】 结果取决于精子与宫颈粘液的相互关系。其中任何一方异常均可影响实验结果。①宫颈粘液中如存在抗精子抗体或精子表面结合有抗精子抗体，精子将出现凝集现象；②精子本身若有遗传或代谢障碍、逆行射精等，精子亦不能穿透宫颈粘液；③宫颈粘液异常，如宫颈疾病（炎症、粘连、囊肿等）所致、或粘液粘滞度大、酸性粘液、脓性粘液等，均可导致本试验异常。 返 回

四、精子功能检查 （二）体外穿透试验 1．精子-宫颈粘液玻片穿透试验 【操作】 在一块洁净的玻片上相距约 4mm 处，分别滴排卵期宫颈粘液和液化精液 1 滴，轻轻加上盖玻片，使两液滴慢慢接触而形成交界面，然后置 37℃孵育10～15min，取出镜检。以紧邻界面的第一个高倍视野设为 Fl ，靠近 Fl 的第二视野为 F2 ，分别记录 Fl 和 F2 中活动的精子数。 返 回

四、精子功能检查 （二）体外穿透试验 1．精子-宫颈粘液玻片穿透试验 【结果判断】 ①正常：精子穿透粘液，并90%以上精子呈直线运动；②较差：精子能穿透粘液，但运动距离小，离开粘液与精液界面＜500m；③异常：精子穿透粘液后．很快失去活力或仅有摆动；或精子不能穿透以上界面或于界面精液侧出现凝集。 返 回

四、精子功能检查 （二）体外穿透试验 1．精子-宫颈粘液玻片穿透试验 【参考区间】 精子穿透粘液，且90%以上精子呈直线运动。 【临床意义】 由于精子-宫颈粘液玻片穿透试验操作尚未完全标准化，所以常有一定的主观性。如试验结果异常，应结合精液其他检查结果综合分析。 返 回

四、精子功能检查 2．精子-宫颈粘液接触试验 【操作】 取精液及近排卵期宫颈粘液等量混合，室温下静置30min ，观察并计数非正常运动（摆动）精子的出现率，以未与宫颈粘液混合的精液作对照，求出摆动精子的出现率（%）。摆动精子越多，意味着精子运动功能受损越严重。此外，可用其他供者的精液或宫颈粘液分别进行交叉试验，以确定抗精子抗体是来自精液或宫颈粘液。 返 回

四、精子功能检查 2．精子-宫颈粘液接触试验 【参考区间】 阴性（精子摆动出现率0～25%） 【临床意义】 试验结果阳性（﹥25%），提示精液或宫颈粘液中存在抗精子抗体。 返 回

四、精子功能检查 3．仓鼠卵-精子穿透试验 又称为精子穿透试验 （SPT ) ，是评价精子功能最常用的试验。 SPT 是测定精子获能、顶体反应和结合卵子能力的一种技术复杂而严格的生物学试验。试验结果用相差显微镜观察，计算卵子受精率和受精指数。 计算公式：受精率（%）=受精卵数/卵细胞总数×100%； 受精指数=穿透卵细胞的精子数/卵细胞总数 返 回

四、精子功能检查 3．仓鼠卵-精子穿透试验 【参考区间】 受精率≥10 %；受精指数≥5 。 【临床意义】 受精指数＜5 ，示生育力下降。 SPT 试验结果与体内、外穿透实验结果有良好的相关性，对不育症的诊断符合率达 90 % ，可作为测定精子功能的基础试验。SPT不仅可用于原因不明不育男子的诊断依据，而且可作为评价人工授精试验的依据．但试验影响因素较多，必须加强质量控制。 返 回

四、精子功能检查 4．精子低渗肿胀试验（HOS） 【试剂】 膨胀液：枸橼酸钠0.735g，果糖1.351g，加蒸馏水至100ml。分装，-20℃冷冻保存，使用前解冻，并充分混匀。 返 回

四、精子功能检查 4．精子低渗肿胀试验（HOS） 【结果判断】 a 型，未出现肿胀； b 型，尾尖肿胀； c 型，尾尖弯曲肿胀； d 型，尾尖肿胀伴弯曲肿胀； e型，尾弯曲肿胀； f 型，尾粗短肿胀； g 型，全尾部肿胀。 返 回

四、精子功能检查 4．精子低渗肿胀试验（HOS） 【参考区间】 尾部肿胀精子 ＞60%。 【临床意义】 HOS 试验可以预测精子膜有无损害，由于操作简便、快速，且与其他精子功能试验有良好的相关性，常用来判断精液中是否存在 AsAb 。 返 回

五、计算机辅助精子分析 计算机辅助精子分析（CASA）技术是通过一台高分辨率的显微摄像系统，采集精子形态图象和精子运动图象，用计算机和专用精液分析软件对图象进行处理和分析，能自动测试近20项精液分析指标，包括精子浓度、精子活率、活力、精子运动速度、精子运动方式、精子头运动轨迹图和力度等一系列“运动学”参数，有些仪器还可以检查精子形态学参数等。特别是对精子运动的分析有快速、直观、准确的特点。 返 回

总结 精液常规检查包括一般性状检验及显微镜检验两大方面。 具体内容：①精液外观；②精液量；③精液粘稠度；④精液液化时间；⑤精液酸碱度；⑥精子活动率；⑦精子活动力；⑧精子计数；⑨精子形态观察；⑩精液细胞学检查 返 回

总结 正常精液常规检查报告示例： 灰白色；3 ml；液化时间30min；粘稠度Ⅰ级；pH值7.5；精子活率80%；精子活动力a级+b级精子占70%；精子计数60×109/L；正常形态精子85%；红细胞1～2/HP 、白细胞3～5/HP 返 回

练习题 返 回

单项选择题 1.精液标本采集禁欲时间为 A.1d B.2d C.3～5d D.8d E.10d √ 返 回

单项选择题 2.精液标本送检时间不能超过 A.10min B.30min C.40min D.1h E.2h √ 返 回

单项选择题 3.精液液化延缓或不液化常见于 √ A.前列腺炎 B.精囊炎 C.睾丸结核 D.睾丸炎 E.附睾炎 返 回

单项选择题 4.精液中为精子提供能量的主要物质是 √ A.果糖 B.葡萄糖 C.麦芽糖 D.蔗糖 E.糖原 返 回

单项选择题 5.b级精子活动是指精子呈 A.快速前向运动 B.慢速或呆滞前向运动 C.原地打转 D.非前向运动 E.不动状态 √ 返 回

√ 6.正常精液pH为 单项选择题 A.4.0～5.0 B.5.5～9.0 C.6.3～6.5 D.6.5～7.0 E.7.2～8.0 返 回

7.刚排出的精液具有高度的粘稠性，这种粘稠性与哪种物质的存在有关 单项选择题 7.刚排出的精液具有高度的粘稠性，这种粘稠性与哪种物质的存在有关 A.维生素C B.纤溶酶 C.酸性磷酸酶 D.果糖 E.凝固酶 √ 返 回

8.正常精液排出体外可自行液化，主要与 哪种物质的存在有关 单项选择题 8.正常精液排出体外可自行液化，主要与 哪种物质的存在有关 √ A.纤溶酶 B.凝固酶 C.酸性磷酸酶 D. 果糖 E.精子顶体酶 返 回

单项选择题 9.观察精液液化时间标本应放置在 A.20℃ B.25℃ C.28℃ D.37℃ E.2-8℃ √ 返 回

10.精液液化时间超过多少可报 不液化或液化不完全 单项选择题 10.精液液化时间超过多少可报 不液化或液化不完全 A.20min B.25min C.60min D.80min E.120min √ 返 回

单项选择题 11.正常精液液化时间一般不超过 A.10min B.20min C.30min D.40min E.60min √ 返 回

12.判断结扎手术是否成功，一般于术后第6周开始检查，每周1～2次，连续多少次查不到精子则手术成功 单项选择题 12.判断结扎手术是否成功，一般于术后第6周开始检查，每周1～2次，连续多少次查不到精子则手术成功 A.1次 B.2次 C.3次 D.4次 E.5次 √ 返 回

√ 13.关于精子的说法下列哪项不正确 单项选择题 A.精液主要由精子和精浆两部分组成 B.精液量2～5ml C.精液液化时间不得超过30min D.正常精子活率≥75% E.WHO将精子活动力分为5级 √ 返 回

14.精子原地打转、活动迟钝 应属于精子活力哪一级 单项选择题 14.精子原地打转、活动迟钝 应属于精子活力哪一级 A.a级 B.b级 C.c级 D.d级 E.e级 √ 返 回

1.正常刚排出的精液具有高度的_______性, 30min后可自行_______。 粘稠 液化 填空题 1.正常刚排出的精液具有高度的_______性, 30min后可自行_______。 粘稠 液化 返 回

2.正常精液量约_______ml，少于____ml或大于____ml视为异常。 2～5 1 8 填空题 2.正常精液量约_______ml，少于____ml或大于____ml视为异常。 2～5 1 8 返 回

3.观察精液液化时间标本应放在______℃，每______min观察一次。正常精液液化时间不超过_____min。 10 30 填空题 37 3.观察精液液化时间标本应放在______℃，每______min观察一次。正常精液液化时间不超过_____min。 10 30 返 回

4.正常精液采集后60min内精子活率_____%， 精子活动力 _______________________________ 填空题 ≥75 4.正常精液采集后60min内精子活率_____%， 精子活动力 _______________________________ a级精子≥25%或a级﹢b级精子≥50% 返 回

5.正常精液精子浓度_____________，异常精子应少于______% ≥20×109/L 填空题 5.正常精液精子浓度_____________，异常精子应少于______% ≥20×109/L 20 返 回

指新排出的精液从胶冻状转变为流动状所需的时间. 名词解释 1.精液液化时间 指新排出的精液从胶冻状转变为流动状所需的时间. 返 回

名词解释 2.精子活动力 是指精子向前运动的能力。 WHO将其分为a、b、c、d四级。 返 回

名词解释 3.精子活率 是指活精子占精子总数的比例. 返 回

1.简述精液检查的目的 ①评估男性生育功能,为不生育症诊断和疗效观察的提供依据 ②辅助诊断男性生殖系统疾病 ③输精管结扎术疗效观察 问答题 1.简述精液检查的目的 ①评估男性生育功能,为不生育症诊断和疗效观察的提供依据 ②辅助诊断男性生殖系统疾病 ③输精管结扎术疗效观察 ④计划生育科研 ⑤为体外授精和精子库筛选优质精子 ⑥法医学鉴定 返 回

问答题 2.试述精子计数的原理 用碳酸氢钠破坏精液的粘稠性，以甲醛固定精子，稀释后充入计数池内计数。 返 回

3.试述精子计数的方法 ①于小试管内加精子稀释液0.38ml，吸取 液化后并充分混匀的精液20μl，摇匀； 问答题 3.试述精子计数的方法 ①于小试管内加精子稀释液0.38ml，吸取 液化后并充分混匀的精液20μl，摇匀； ②充分摇匀后，充入计数池内，静置1～2min，以精子头部做为基准进行计数； ③在高倍镜下计数中央大方格内5个中方格 （RBC计数区）内的精子数。 返 回

问答题 4.试述精子计数的结果计算 精子数/L=5个中方格所数精子数 ×5×10×20×106/L 返 回

问答题 5.试述精子计数的参考值 精子计数≥20×109/L 返 回

再 见！