第三章 血型与输血（2） 魏彦刚 菏泽医学专科学校

三、Rh血型系统 Rh阳性：含D抗原的红细胞 Rh阴性：不含D抗原的红细胞 汉族人中Rh阴性率﹤1%

（一）Rh血型系统抗体 1. Rh抗体的产生 Rh抗体绝大多数是通过Rh血型不合输血或妊娠产生的免疫性抗体，这些抗体均为IgG 2. Rh抗体的种类 主要有5种，即抗D、抗E、抗C、抗c、抗e，最常见的是抗D，凡被检红细胞和抗D血清凝集者为Rh阳性，不凝集为Rh阴性 3. Rh抗体的特性 为免疫性抗体IgG

（二）Rh血型鉴定方法及评价 1. 酶介质法 分为直接酶介质法、间接酶介质法 1. 酶介质法 分为直接酶介质法、间接酶介质法 2. 抗球蛋白试验（Coombs test） 分为直接抗球蛋白试验（DAT）和间接抗球蛋白试验（IAT） 3. 凝聚胺试验（polybrene test） 4. 人源盐水介质抗D试验 (临床应用广泛) 5. 低离子强度（盐）溶液试验

1. 酶介质法 在酶处理下 IgG抗体可凝集RBC

1. 酶介质法 阳性 阴性 37 ℃  37℃ 水浴30分钟 离心 看结果

2.抗球蛋白（Coombs）试验 DAT（直抗）:直接检测红细胞表面有无不完全抗体吸附的试验。 IAT（间抗）：通过体外致敏红细胞，再检测红细胞上有无不完全抗体吸附的试验。

IgM抗体凝集RBC示意图 在盐水介质中

在盐水介质中、 IgG抗体不凝集RBC

2.抗球蛋白试验 抗球蛋白

3.凝聚胺技术 原理 凝聚胺（Polybrene），一种高价阳离子季胺盐多聚物，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，能引起正常红细胞可逆性的非特异性凝集。如果是抗体致敏的红细胞被聚凝胺凝集，则凝集不可逆。

在凝聚胺处理下 IgG抗体可凝集RBC

4.人源盐水介质试验 临床应用广范 原理：加入蛋白变性剂，使IgG抗D抗体转变为类似大分子的“IgM”，在盐水中发生肉眼可见的凝集反应。

当溶液中离子增多时，抗原抗体之间的静电作用力减弱 5.LISS(低离子强度溶液)的原理 抗原 非离子 静电作用力 抗体 离子 当溶液中离子增多时，抗原抗体之间的静电作用力减弱 当溶液中缺少离子时，抗原抗体之间的静电作用力较强

（三）Rh血型鉴定的临床意义 1. 输血前的检查 2. 新生儿溶血病诊断 3. 协助治疗

医院坚持验血后输血 失血孕妇苦等6小时逝去 稀有血型孕妇董明霞在引产时出现大出血，家属要求先输血救命并愿意承担一切后果，但医院坚持严格按照法律规定输血。经过6个多小时的焦虑等待，这位山东济阳的孕妇终于9日下午在山东大学齐鲁医院含恨死去。（齐鲁晚报－ 2008年10月10日）

血液中心冷冻库提供的4个单位（800ml）RH阴性O型血浆，每个单位按照常规最快也要3个小时才能解冻，且不能满足需要，只能临时从稀有血型志愿者中采集7个单位（1400ml）的血液，这样的血液又需要3个小时的检验，待其筹足之时，抢救的最佳时间已经过去 。

尽管病人家属要求先输血救命并愿意承担一切后果，但医院仍坚持严格按照法律规定等到血液检验完毕才能输血。经过6个多小时等待后，引产大出血的济阳患者董明霞最终于9日下午不幸去世

一个省会所在的大医院，为什么自己不备有RH阴性O型等稀有血浆？为什么不建立稀有血型志愿者队伍？在紧急情况下，为什么不及时组织稀有血志愿者紧急采集 ？

四、红细胞血型系统交叉配血试验

交叉配血试验的原理 交叉配血试验中红细胞血型抗原与相应抗体的凝集反应，可用盐水配血试验、酶介质试验 、抗球蛋白试验、凝聚胺试验、低离子强度溶液试验及微柱凝胶试验进行观察。

盐水介质配血方法 阳性 阴性 患者 献血者 主侧 次侧 离心 看结果

交叉配血试验（盐水配血法） 原理 ：完全抗体分子链较长，在电解质学液中，能克服红细胞表面电荷排斥力，与相对应的抗原结合，使红细胞凝集，从而发现配血不合，有对应抗原抗体存在。 方法： 1、自被检者静脉采血2~3ml,分离血清，并配制5%红细胞悬液。 2、主侧：病人血清+献血员红细胞 次侧：献血员血清+病人红细胞 混匀，1000转/分，然后观察结果。

报告方式： 交叉配合试验（**法） 受血者***（*）型血清+***（*）型红细胞不凝集，无溶血。 受血者***红细胞+***血清不凝集。无溶血 结果判断： 同型配血，主侧、次侧均不凝集，表示无配血禁忌，可以输血；异型配血时，主侧无凝集，无溶血，次侧凝集，但效价<1：64，无溶血，可以输给少量，如次侧不凝集时，应追查原因。

大量交叉配血 献血员之间应进行交叉配备 如：献1血清+献2红细胞 献1红细胞+献2血清

抗球蛋白配血方法 患者 37 ℃  主侧 37℃ 水浴30分钟 三洗 次侧 献血者

抗球蛋白方法配血方法 阳性 抗球蛋白试剂 上海市血液中心血 加抗球蛋白 离心 看结果 阴性

酶介质配血方法 患者 献血者 主侧 次侧 酶 上海市血液中心血 主次侧 均加酶

酶介质配血方法 阳性 阴性 37 ℃  37℃ 水浴30分钟 离心 看结果

凝聚胺技术 原理 凝聚胺（Polybrene），一种高价离子季胺盐多聚物，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，能引起正常红细胞可逆性的非特异性凝集。如果是抗体致敏的红细胞被聚凝胺凝集，则凝集不可逆。

 聚凝胺(Polybrene)配血方法 Polybrene 患者 主侧 室温放置 主次侧均 1 分钟 加聚凝胺 次侧 献血者 上海市血液中心血  室温放置 1 分钟 主次侧均 加聚凝胺

聚凝胺(Polybrene)配血方法 阳性 阴性 重悬液 上海市血液中心血 离心 主次侧均 加重悬液 看结果 聚凝胺引起红细胞非特异性凝集

基本操作方法 1、试管中加入待检血清或血浆1滴 2、加入用LIM溶液配置的2~3的红细胞悬液2~3滴 3、摇匀，室温放置1分钟（时间长，效果好） 4、加聚凝胺试剂1滴，混匀后3400rpm离心15秒 5、轻摇观察由聚凝胺引起的红细胞非特异性凝集，若未见红细胞凝集则需重做试验 6、加入1滴重悬液，轻摇观察结果 由聚凝胺引起的非特异性凝集应在1分钟内完全散开，若是由免疫抗体引起的凝集反应则不会散开

微柱凝胶介质配血法 红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶介质中发生凝集发应

凝胶试验使用的试剂和器材

交叉配血试验的方法学评价 方法 优点 缺点 盐水配血试验 简单、快速 检不出IgG型抗体 酶介质试验 简便、经济 准确性、稳定性差 方法 优点 缺点 盐水配血试验 简单、快速 检不出IgG型抗体 酶介质试验 简便、经济 准确性、稳定性差 抗球蛋白试验 最准确、可靠 复杂、费时、试剂贵 凝聚胺试验 快速、准确 需特殊试剂及器材 微柱凝胶试验 灵敏 成本高

交叉配血的质量保证 ①检测前：标本、试剂及实验器材的要求 ②检测中：工作态度严谨，高度责任感 ③检测后：标本存放7天以上

交叉配血的临床意义 ① 保证输血安全 ② 发现亚型和不规则抗体

第五节 新生儿溶血病

(一)ABO新生儿溶血病 是由于母婴血型不合，母体的IgG抗A(B)经过胎盘进入胎儿血循环破坏胎儿红细胞所引起。

ABO溶血症 父母血型匹配，子女才能优生。 如果父母血型不匹配，子女很可能得母婴血型不合溶血症。 此种溶血症主要发生在母亲为O型，婴儿为A型或B型者。所以也叫ABO溶血症。 父母血型匹配，子女才能优生。 如果父母血型不匹配，子女很可能得母婴血型不合溶血症。

(二) Rh血型引起的新生儿溶血

分娩 时胎儿 红细胞大量进入母体使母亲受到免疫

HDN 的发病示意图

二、实验室检查（产前检查） 1. 血型鉴定 2.检查没亲血清中有无IgG性质的抗体并检测其效价 3.羊水分析

二、实验室检查 （患儿血标本检查） 直接抗球蛋白试验 红细胞抗体放散试验:与直接抗球蛋白相同，也是检测新生儿红细胞上是否存在免疫抗体。 游离抗体试验:是检测新生儿血清中的血型抗体。

三、新生儿溶血病治疗与预防 1.药物治疗与血浆置换 2. 提早分娩 3. 宫内换血 4.光照治疗与换血疗法 5.预防

第六节 自动化血型分析技术 1.微柱凝胶法 2.微板法(血站较普及) 3.全自动血型分析仪检测法

小结 本章节的重点内容是：ABO血型亚型、血型的鉴定、交叉配血的方法及临床意义！

课后练习 一、名词解释 血型 血型鉴正向定型 血型鉴反向定型 交叉配血试验 二、选择题 A IgM B IgG C IgE D 以上均是 血型 血型鉴正向定型 血型鉴反向定型 交叉配血试验 二、选择题 1、交叉配血时,当血清和红细胞发生肉眼可见的凝集反应,则血清中的抗体是 A IgM B IgG C IgE D 以上均是

2、ABO新生儿溶血症可见于母亲为O型,胎儿的血型可为 A A型 B B型 C A型和B型 D O型