动物实验的基本操作方法
一、动物实验的常用方法 1、复制动物模型法; 2、切开、分离法; 3、切除和注入提取液法; 4、离体组织器官法; 1、复制动物模型法; 2、切开、分离法; 3、切除和注入提取液法; 4、离体组织器官法; 5、瘘管法; 6、移植法; 7、生物电、活性观察法; 8、病理解剖学、组织学观察法;9、免疫学观察法; 10、其它方法 如联体动物法,条件反射法、生物遗传法、放射生物法、药物化学法等。
二、实验动物的抓取固定方法 (一)小鼠抓取固定方法 小鼠温顺,一般不会咬人,抓取时先用右手抓取鼠尾提起, 置于鼠笼或实验台向后拉,在其向前爬行时,用左手拇指和食 指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤,将鼠体置于左手心中,把后肢 拉直,以无名指按住鼠尾,小指按住后腿即可。 尾静脉注射时,可用小鼠尾静脉注射架固定,先根据动物 大小选择好合适的固定架,并打开鼠筒盖,手提鼠尾巴,让动 物头对准鼠筒口并送入筒内,调节鼠筒长短合适后,露出尾巴, 固定筒盖即可进行尾静脉注射或尾静脉采血等操作。
(二)大鼠的抓取固定方法 大鼠的抓取基本同小鼠
(三)蛙类的抓取固定方法 蛙类抓取方法宜用左手将动物背部贴紧手掌固定,以中指、无名指、小指压住其左腹侧和后肢,拇指和食指分别压住左、右前肢、右手进行操作。
(四)豚鼠的抓取固定方法 一般抓取方法是:先用手掌迅速扣住鼠背,抓住其肩胛上方,以拇指和食指环握颈部,另一只手托住臀部。固定的方式基本同大鼠。
(五)兔的抓取固定方法 1、抓取:一般以右手抓住兔颈部的毛皮提起,然后左手托其臀部或腹部,让其体重重量的大部分集中在左手上。 2、 固定:一般将家兔的固定分为盒式、台式和马蹄形三种。 盒式固定,适用于兔耳采血、耳血管注射等情况;若做血压 测量、呼吸等实验和手术时,则需将兔固定在兔台上,马蹄形 固定多用于腰背部,用马蹄形固定器可使兔取用背卧位和腹卧 位,所以是研究中常采用的固定方法。
(六)狗的抓取固定方法 一般为头部固定和四肢固定。用布带迅速兜住狗的下颌,绕到上颌打一个结,再绕回下颌下打第二结,然后将布带引至头后颈项部打第三个结,并多系一个活结(以备麻醉后解脱)。注意捆绑松紧度要适宜。
三、实验动物编号标记方法 常用的标记法有染色、耳缘剪孔、烙印、 号牌等方法。 (一)颜料涂染 这种标记方法在实验室最常使用,也很方便。 编号的原则:先左后右,从上到下。
(二)烙印法 (三)号牌法 用刺数钳在动物耳上刺上号码,然后用棉签蘸着溶在酒精中的黑墨在刺号上加以涂抹,烙印前最好对烙印部位预先用酒精消毒。 用金属制的牌号固定于实验动物的耳上,大动物可系于颈上。 对猴、狗、猫等大动物有时可不做特别标记,只记录它们的外表和毛色即可。
四、实验动物被毛的去除方法 剪毛:固定动物后,用粗剪刀剪去所需部位的被毛。 脱毛:脱毛系指用化学药品脱去动物的被毛,适用于无菌手术野的准备以及观察动物局部皮肤血液循环和病理变化。 拔毛:兔耳缘静脉注射或取血时以及给大、小白鼠作尾静脉注射时,需用拇指、食指将局部被毛拔去,以利操作。
五、实验动物给药途径和方法 (一)皮下注射 (二)皮内注射 (三)肌肉注射 (四)腹腔注射 (五)静脉注射 (六)淋巴囊注射 五、实验动物给药途径和方法 (一)皮下注射 (二)皮内注射 (三)肌肉注射 (四)腹腔注射 (五)静脉注射 (六)淋巴囊注射 (七)经口给药 (八)其它途径给药 如呼吸道给药、皮肤给药、脊髓腔内给药、小脑延 髓池给药、脑内给药、直肠内给药、关节腔内给药等。
六、实验动物的麻醉 (一)常用的麻醉剂 1、挥发性麻醉剂;2、非挥发性麻醉剂; 3、中药麻醉剂。 (二)动物的麻醉方法 1、全身麻醉 1、挥发性麻醉剂;2、非挥发性麻醉剂; 3、中药麻醉剂。 (二)动物的麻醉方法 1、全身麻醉 (1)吸入法;(2)腹腔和静脉给药麻醉法 2、局部麻醉 3、麻醉注意事项 (1)静脉注射必须缓慢 (2)麻醉时需注意保温
七、实验动物采血方法 (一)小鼠、大鼠采血法 1、割(剪)尾采血 2、鼠尾刺血法 3、眼眶静脉丛采血 4、断头取血 5、心脏采血 6、颈动静脉采血 7、腹主动脉采血 8、股动(静)脉采血
(二)豚鼠采血法 1、耳缘剪口采血 2、心脏采血 3、肌动脉采血 4、背中足静脉取血 (三)兔采血法 1、耳静脉采血 2、耳中央动脉采血 3、心脏取血 4、后肢胫部皮下静脉取血 5、股静脉、颈静脉取血
(四)狗、猫采血法 1、后肢外侧小隐静脉和前肢内侧下头静脉采血 2、股动脉采血 3、心脏采血 4、耳缘静脉采血 5、颈静脉 (五)猴采血法 1、毛细血管采血 2、静脉采血 3、动脉采血
(六)羊的采血方法: 常采用颈静脉取血方法。 (七)鸡、鸽、鸭的采血方法 鸡和鸽常采用的取血方法,是从其翼根静脉取血。
十、急性动物实验中常用的手术方法 急性动物实验中常以血压、呼吸等为指标,以静脉注射、放血等为实验方法。
(一)兔、狗颈部手术 1、家兔背位固定于兔台上,颈部剪毛。 2、动物麻醉 3、气管及颈部血管神经分离术 ⑴气管暴露术 ⑵颈总动脉分离术 ⑶颈部迷走、交感、减压神经分离术 ⑷颈外静脉暴露术 4、气管及颈部血管插管术
(二)兔、狗股部手术 1、动物背位固定于兔台上,腹股沟部剪毛。 2、用手指触摸股动脉搏动,辨明动脉走向,在该处作局部麻醉并作方向一致长约4-5cm的切口。 3、用止血钳细心将股神经首先分出,然后分离股动、静脉间的结缔组织。 4、在动物行肝素化后作股动、静脉插管。
十一、实验动物的处死方法 (一)蛙类 常用金属探针插入枕骨大孔,破坏脑脊椎的方法处死。 (二)大鼠和小鼠 1、脊椎脱臼法;2、断头法;3、击打法; 4、急性大失血法;5、化学致死法。 (三)狗、猫、兔、豚鼠 1、空气栓塞法;2、急性失血法; 3、破坏延脑法;4、开放性气胸法; 5、化学药物致死法。