Chap.9 传染与免疫 传染 非特异性免疫 特异性免疫 免疫学方法及其应用

意义： ----疾病的预防和治疗的基础 ----生物药物的研究和开发 ----现代分子的分析和测试技术

中国是免疫学的发祥地？

免疫技术的应用

§.1 传染 一、传染与传染病 传染：病原突破宿主的免疫防卫系统， 在宿主的特定部位生长繁殖并引起一 系列的病理生理变化过程。 §.1 传染 一、传染与传染病 传染：病原突破宿主的免疫防卫系统， 在宿主的特定部位生长繁殖并引起一 系列的病理生理变化过程。 传染病：能够从一个宿主传播到另一 个宿主的疾病。

二、决定传染结局的三大因素 （一）病原体 1、毒力 1）侵染力 吸附、侵入能力 繁殖扩散能力 抗宿主防御能力

2）毒素 外毒素：病原细菌在生长过程向外分泌的 一类毒性蛋白。 内毒素：G-细菌的脂多糖，仅在细胞死亡 后才裂解释放。 [类毒素：细菌外毒素脱毒失去毒性后，仍 保持免疫原性的生物制品。]

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沙门氏菌的侵染力和毒力

● 内毒素的测定---鲎试剂法 原理：内毒素激活变形细胞溶解物(LAL)中的B因子而引发系列的激活过程，使可溶蛋白凝固成为可见的 凝胶反应。

2、病原菌数量 3、侵入途径 （二）宿主的免疫力 （三）环境因素

三、传染的三种可能结局 ●隐性传染：病原侵入后很快为宿主消灭， 基本上不出现症状。 ●带菌状态：无明显感染症状的感染个体。 ●显性传染：病原侵入后使宿主细胞组织 损害，生理功能异常而出现 一系列的临床症状。

●非特异性免疫（nonspecific immunity）  §2.非特异性免疫 ●非特异性免疫（nonspecific immunity） 生物体在长期进化中形成，属于先天 即有、相对稳定、无特殊针对性的对付病 原体的天然抵抗力。 屏障结构 吞噬细胞的吞噬功能 正常组织和体液中的抗菌物质 炎症反应 ● 非特异免疫组成

一、表皮与屏障结构 1）机械性排阻 2）抗菌物质 3）正常菌群 1.皮肤和粘膜

2．血脑屏障和血胎屏障 ——血脑屏障 血脑屏障的细胞间连接紧，胞饮作用微弱等特点， 可阻挡病原菌及其毒物随血流 透入脑组织，从而 保护中枢神经系统。 ——血胎屏障： 由母体子宫内膜和胎儿绒毛膜共同组成。不 妨碍母子物质交换，但可能 防止病原体侵入。

二、吞噬细胞及其吞噬作用 人体血细胞有：红细胞、白细胞、血小板三种。 主要吞噬细胞：嗜中性粒细胞；巨噬细胞

1.嗜中性粒细胞及其吞噬作用 ●一种数量最多、血液中主要的小吞噬细胞。

2.巨噬细胞及其功能 存在于血液、淋巴液和各种组织中的大型单核细胞，具有吞噬和胞饮功能。

●功能：1）吞噬和杀菌作用

2）抗原递呈作用： 抗原信息加工、传递给T 淋巴细胞。 （MHC：主要组织相容性复合物） （TCR：T细胞抗原受体 ： CD4：T细胞表面特异蛋白）

3）免疫调节作用：分泌各种活性物质 4）抗癌作用：细胞毒作用

三、炎症反应 ①吞噬细胞聚集炎症部位 ②血流加速使抗菌因子、 Ab局部浓缩； ③死亡宿主细胞的堆集可 释放出抗M物质； ④氧浓度下降、乳酸积累， 可抑制多种病原菌生长； ⑤高温降低病原体生长速度。

四、正常体液或组织中的抗菌物 ●补体：一组非特异性血清蛋白,具有扩大 和增强抗体的功能。 ●补体的性质： 1）热不稳定 2）酶原 3）作用的非特异性

血清中主要9种补体蛋白的作用 识别单位 活化单位 膜攻击单位 替代途径 调节蛋白

● 干扰素(IFN)：病毒或干扰素诱生剂诱导 产生的蛋白，具有抑制病毒和增强机体的免疫功能。

●干扰素（IFNs）的特性 1）化学成分为糖蛋白: ,,, 2）广谱的抗病毒和免疫调节活性 3）诱导产生 4) IFN刺激细胞合成AVP降解mRNA产 生抗病毒作用

建议读物

§3特异性免疫 ●特异性免疫 生物体在生活过程中与抗原物质接触后 产生的一系列防卫功能。其特点是后天产生 的、特异性强、免疫能力具有个体的特异性、 包括体液免疫和细胞免疫。

一、免疫器官 1、中枢免疫器官： （发生、分化、成熟） 骨髓、胸腺、 法氏囊/类囊器官 2、外周免疫器官 （定居、应答） 淋巴结、脾脏

二、免疫细胞及其在细胞免疫中的作用 （一）T细胞 （胸腺依赖性细胞） 1． 来源 未分化淋巴细胞 血流 胸腺 成熟的T、B细胞 淋巴结 ● 多能干细胞 未分化淋巴细胞 血流 胸腺 成熟的T、B细胞 淋巴结 效应T细胞

● T细胞定位于周围淋巴结的副皮质区及脾脏白髓部分，并可经 血液、组织液、淋巴液释放到外周血循环中，当遇Ag刺激，T 细胞进一步分化、增殖，以发挥其特异性细胞免疫功能。

2．T细胞主要亚群（以功能划分） ①调节T细胞（ TR） 1)辅助性T细胞(TH)：辅助B细胞，产生抗体。 2)抑制性T细胞( TS)： 抑制TH，Tc和 B细胞 的功能。

②效应T细胞(TE) 1)迟发型超敏T细胞(TDTH )：释放淋巴因子，引起迟发型超敏反应。

2)细胞毒T细胞( TC)：直接杀伤带TC抗原的 靶细胞(分泌穿孔素引起被感染细胞溶解) Granzymes：颗粒酶 Perforin：穿孔素 apoptosis :凋亡

CD (白细胞分化抗原）： 白细胞不同分化阶段特有的膜表面分子，具有参与活化、介导细胞迁移等多种功能。

●表面受体： 3. T细胞表面标志： 绵羊红细胞受体（E受体），E玫瑰花结试验 （检测外周血T细胞数目，比例）。 有丝分裂原受体（例：PHA，Con A等）

●抗原受体： T细胞抗原受体(TCR) 识别由APC递呈的Ag

1．B细胞的表面受体 （二）B淋巴细胞（骨髓依赖性淋巴细胞） LPS受体 ●膜表面抗原受体： （膜表面免疫球蛋白：SmIg） ●补体受体： ●有丝分裂原受体： LPS受体 ●膜表面抗原受体： （膜表面免疫球蛋白：SmIg） ●补体受体： ● Fc受体：抗体可结晶段受体 SmIg与抗SmIg的抗体结合

2．B细胞的表面抗原： SmIg 3. B细胞的亚群和功能 B1: T细胞非依赖性亚群； B2: T细胞依赖性亚群

－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－ 小结： T细胞、B细胞表面抗原受体的比较 －－－－－－－－－－－－－－－－－－－－ T细胞 B细胞 1）识别、接受抗原作用， 1）识别、接受抗原作用,又称膜表面 称T细胞受体（TCR) 免疫球蛋白（SmIg） 2）不识别游离抗原， 2）识别游离抗原，但对TD抗原需要TH的帮助 而接受APC传递和加工的抗原 3）结构类似于Ig的Fab 3）结构为IgM或IgD 4）具抗原性，与相应的抗体结合 4）具抗原性，与相应的抗体结合 （抗相应的IgM或IgD的抗体） －－－－ －－－－－－－－－－－－－－－－

（三）其他淋巴细胞 1、K细胞：杀伤Ag-Ab复合体 2、NK细胞 3、NKT细胞 具T、NK细胞特性，与抑制自身免疫有关 大颗粒性淋巴细胞、可在无Ab/Ag致敏下， 杀伤某些肿瘤细胞或被病毒感染细胞。 3、NKT细胞 具T、NK细胞特性，与抑制自身免疫有关

三、免疫应答 2. 增殖分化阶段：成熟浆细胞、致敏淋巴细胞； 3. 效应阶段：分泌抗体、淋巴因子、执行免疫功能 ● 免疫应答的过程 1. 感应阶段：抗原识别、呈递 2. 增殖分化阶段：成熟浆细胞、致敏淋巴细胞； 3. 效应阶段：分泌抗体、淋巴因子、执行免疫功能

● TD抗原 胸腺依赖性抗原。多数天然抗原为TD抗 原。可引起体液和细胞免疫；产生IgG为 主的抗体；可产生免疫记忆。 ● TI抗原 非胸腺依赖性抗原。主要为细菌脂多糖等 类抗原。仅引起体液免疫；产生IgM抗体； 不产生免疫记忆。

免疫应答的类型和过程示意图

四、免疫分子 及其在体液免疫中的作用 （一）抗原（antigen，Ag） 一类能诱导机体发生免疫应答，并能与相

●抗原基本特性： ----免疫原性 ----反应原性 ●完全抗原 ●半抗原：只有反应原 性而无免疫原性 （邻苯二酚为半抗原）

2．免疫原性的物质基础 ①分子量：M＞１×104Da ②结构复杂：抗原性强弱依次为蛋白＞复杂 多糖＞核酸（半抗原），类脂一般不具抗原性。 ③异物性：异种/异体,种族关系越远，组织 结构差异 越大，抗原性越强。

3．抗原决定簇（抗原表位） 存在于抗原表面决定其抗原特异性的特定化 学基团。 ●抗原结合价： 与抗体分子相结合的抗原决定簇的总数。

抗原决定簇（表位）的数目是抗原的价

4．细菌的抗原

5.共同抗原与交叉反应 共同抗原： 某些天然抗原分子上含有相同抗原决定簇，能够促进机体产生 共同的抗体而产生交叉反应。 吸收反应： 利用交叉发应除去共同抗体，用于制备单价抗血清。

(二)抗体（antibody, Ab） 在抗原刺激下产生一类 能够与该抗原发生反应 的免疫球蛋白。 ( Immunoglobulin, Ig )

● Ab特征： 1）由脊椎动物浆细胞产生； 2）Ag刺激； 3）特异性结合； 4）一类具有免疫功能 的球蛋白（ Ig）； 5）抗抗体

Ig链： H链，L链 ●区：V区，C区，铰链区 ●类：IgG、 IgA、 IgM、 IgD、 IgE、 ●型：λ和κ型 2．免疫球蛋白的基本结构 Ig链： H链，L链 ●区：V区，C区，铰链区 ●类：IgG、 IgA、 IgM、 IgD、 IgE、 ●型：λ和κ型 ●肽链的a.a数： L：220； H：440

● IgG的酶解和化学分解片段 木瓜蛋白酶： Fab：抗原结合片段 FC(可结晶片段):结合补体,抗原种属特异性 胃蛋白酶：

●抗原种属的特异性： 来源同种动物的任何抗体免疫其 它动物产生的抗抗体均可与该动物 产生的任何抗体产生特异反应。

●Ig的体和抗原结合价： 单体： ----2价 双体： ----4价 五体： ----5价

● Ig的功能区 H链: L链: 抗原结合部位由VL、 CL、VH、CH1四个 功能区组成

Ag与Fab结合引起构象变化,利于补体的结合与作用 ● Ig的构象变化 Ag与Fab结合引起构象变化,利于补体的结合与作用

4．产抗体细胞的激活和抗体的形成 ●相关的细胞表面标志和受体 ----MHCII：主要组织相容性复合物II（抗原呈递） -----TCR：T细胞受体（识别特异性抗原） ----CD4：T细胞表面抗原（识别MHCII）

●参与的相关细胞及作用 （1）巨噬细胞：处理和传递抗原，但无特异 性识别抗原的功能 。 （2）T细胞：在抗体形成过程起调节细胞的作 用，有特异性识别抗原作用。 （3）B细胞：产生抗体的效应细胞，有特异识 别Ag的功能。

●抗体形成过程： 1、Mø抗原递呈作用 2、T细胞对B细胞激活 3、浆细胞产生抗体

5.机体产生抗体的一般规律 初次应答： 潜伏期长,效价低, IgM为主 再次应答： 潜伏期短,效价高, IgG为主

6.抗体形成的机制 ● Burnet的克隆选择学说 （识别•记忆•自身禁忌）

●抗体的多样性分子机制 －－－－抗体基因重排

7．淋巴细胞杂交瘤技术与单克隆抗体（McAb） ●常规技术制备的抗血清：多克隆抗体 ●单克隆抗体（McAb）： 由纯系B淋巴细胞克隆经分化、增殖的浆细胞 产生的单一成分、单一特异性的免疫球蛋白。

融合 ●淋巴细胞杂交瘤技术 骨髓癌细胞 （癌变的浆细胞， ● B淋巴细胞 （小白鼠脾脏，产生Ab，但无 法在体外繁殖、传代） 能在体内外大量 增殖 杂种细胞 骨髓癌细胞 （癌变的浆细胞， 快速繁殖，产生 Ig,但不能与Ag特异性结合） 能产生大量单克 隆Ab

●制备淋巴细胞杂交瘤的实验方法： 1）选择亲本 2）混合 3）促融 4）捡出 5）扩大培养

杂交瘤技术

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§3免疫学方法及其应用 一、抗原、抗体反应的一般规律 1）特异性 2）可逆性 3）定比性 4）阶段性 5）条件依赖性

●利用“两对半试验”检测乙肝病毒

1.抗原抗体主要反应 1）凝集反应 颗粒性抗原与抗体 产生可见的凝集块 现象。 ●直接凝集反应 ●间接凝集反应

2）沉淀反应 ：可溶性抗原与抗体发生可 见沉淀物的反应。 ●双向琼脂扩散法

●免疫电泳

3）补体结合实验

二.免疫标记技术 酶联免疫吸附法（ELISA） ●基本原理：酶与抗体（抗原）结合，不改 变Ag-Ab特异性和酶活性。当酶结合物与被 检样品相应抗原（抗体）结合后，形成Ag- Ab-酶复合物，在相应底物存在时，酶催化 底物反应。 ●标记物：HRP（辣根过氧化物酶） ●底物：DAP（二苯基联苯胺）

●酶联免疫吸附法测定方法 1）抗体包被 2）加待测抗 原 3）加酶联抗 体 4）加底物 5）检测