Thin-layer chromatography 基础化学实验Ⅱ （有机化学实验） 薄层色谱 Thin-layer chromatography
实验技能训练要点: 1 认识薄层色谱用各仪器名称 2 第一次训练薄层色谱规范操作及实验流程
内 容 提 要 一、实验目的与要求 二、实验原理 三、装置图 四、实验操作步骤及注意事项 五、实验讨论 六、实验思考问题 七、实验延伸
一、实验要求与目的 1、掌握色谱法的基本原理 2、学会利用薄层色谱分离 提纯有机化合物的规范操作
二、实验原理 1、基本原理： 2、分类： 柱色谱 解性能（即分配）的不同，或其他亲和作用的差异， 固定相 1、基本原理： 利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶 解性能（即分配）的不同，或其他亲和作用的差异， 使混合物的溶液流经该种物质，进行反复的吸附或分 配等作用，从而将各组分分开。 流动相 2、分类： 柱色谱 纸色谱 根据操作条件分为 薄层色谱 气相色谱 液相色谱
3、薄层色谱 （1）适用于挥发性较小或在较高温度易发生变化而不能 用气相色谱分析的物质 （2）是柱色谱的先导 （3）分类：吸附型（Al2O3、硅胶G等作吸附剂） 分配型（硅藻土、纤维素等作支持剂） = 比移值Rf=
（4）定义： 在洗涤干净的玻板（15×3cm）上均匀地涂上一层吸附剂或支持剂，待干燥、活化后将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄层板一端约1cm处的起点线上，晾干或吹干后，置薄层板于盛有展开剂的展开槽内，浸入深度为0.5cm。待展开剂前沿离顶端约1cm附近时，将板取出，干燥后喷以显色剂或在紫外灯下显色或直接观察。
4、主要试剂及其物理常数 偶氮苯 苏丹Ⅲ 硅胶G 羧甲基纤维素钠（0.5%水溶液） 粘合剂 硬板——含粘合剂 软板——不含粘合剂
三、装置图
四、实验操作步骤 1、制板（简易平铺法） （1）二块15×3cm玻片，洗净，控水 （2）调糊：3g硅胶G和8mL0.5%羧甲基纤维素 薄层板 干板 1、制板（简易平铺法） 平铺法—简易平铺法 湿板 （1）二块15×3cm玻片，洗净，控水 （2）调糊：3g硅胶G和8mL0.5%羧甲基纤维素 钠水溶液在小烧杯中搅匀 （3）用小勺取适量于玻片上粗铺平，手指轻弹 玻片，反复数次，使糊状物均匀地铺在玻 片上于室温下晾干，每人铺二块 （4）活化：将晾干的薄层板放在烘箱中，待烘 箱温度升至105-110度时记时0.5h 浸渍法
简易平铺法铺板、毛细管点样、倾斜上行法展开 2、点样： （1）画线——起始线和前沿线 （2）毛细管点样——斑点大小和斑点间间距 3、展开： （1）展开剂选择； （2）展开方法——倾斜上行法 4、显色： 直接观察并量取a、b值，计算比移值 简易平铺法铺板、毛细管点样、倾斜上行法展开
5、注意 1、制板和活化：铺板厚度0.25-1mm且均匀；晾干； 一块一块铺；活化时烘箱要从低温开始 2、点样：画线时不能将板划破；点样斑点直径小于 2mm，斑间距1-1.5cm，标准左样品右；点 样结束干燥后再进行下一步 3、展开：展开剂用9：1的苯和乙酸乙酯混合溶剂 一般原则：根据样品的极性、溶解度和吸附剂的活性 等因素考虑。溶剂的极性越大对样品的洗脱力越强。 4、显色：照原样画出斑点形状 5、要求在原始记录中画出板的真实展开情况并计算Rf值
6、提问 1、 色谱法的基本原理是什么？ 2、 展开剂应该如何选择？ 3、 制备薄层色谱板时，应注意哪些问题？
五、实验讨论 1 薄层色谱实验适用的对象 2 薄层色谱实验操作的关键点
六、实验思考问题 1、薄层色谱操作一般包括哪些步骤? 2、点样时应该注意哪些问题？ 3、点样前在距离板的一端一厘米处划线的目的是什么？ 4、Rf值的大小与哪些因素有关？ 5、制备好的薄层板为什么要经过活化后才能使用？ 不经过活化就使用，对分离结果有怎样的影响？ 6、薄层色谱分为几类? 7、在展开槽中为什么要放一张滤纸? 8、薄层色谱与柱色谱有什么异同?
七、实验延伸 参考书： （1）有机化学实验．兰州与复旦合编（第二版） 北京：高等教育出版社，1994． （2）有机化学实验．兰州大学（第三版） 北京：高等教育出版社，2010． （3）胡宏纹 有机化学(第3版)．南京大学 北京：高等教育出版社，2006． （4）魏青 基础实验Ⅱ（有机化学实验） 北京：科学出版社，2011.