CIK A-NK CTL TSuM-DC

CIK （ Cytokine induced killer ） 细胞因子诱导的杀伤细胞。通过IFN-γ、anti-CD3McAb、IL-1和IL-2等共培养PBMC，诱导获得的一群具有抗肿瘤活性的异质细胞群。 CIK细胞是一类非主要组织相容性复合物（MHC）和非T细胞受体（TCR）限制性的免疫活性细胞，其细胞表面既有T淋巴细胞标志（CD3），也有NK细胞表面标志（CD56），因而兼有T淋巴细胞的抗肿瘤活性和NK细胞的非MHC限制性杀瘤优点。

NK细胞的作用机理 NK细胞的活化和靶向应答 NK细胞介导的细胞杀伤 NK细胞的活化及治疗运用的转化 参考文献：1、Gras Navarro A, Björklund AT, Chekenya M；Therapeutic potential and challenges of natural killer cells in treatment of solid tumors. Front Immunol. 2015 Apr 29;6:202. doi: 10.3389 2、Yoon SR, Kim TD, Choi I； Understanding of molecular mechanisms in natural killer cell therapy. Exp Mol Med. 2015 Feb 13;47:e141. doi: 10.1038/emm.2014.114.

NK细胞的体外扩增过程—— 免疫治疗 人源的NK细胞可以通过不同方式获得，例如外周血，脐血单个核，骨髓，动员的外周血或者胚胎干细胞；随后NK细胞能够从外周血或脐血单个核中被分离处理并进行体外扩增，除此以外，NK细胞也可以从CD34+的造血干细胞中产生，它主要是来源于脐血单个核，骨髓，动员的外周血或胚胎干细胞。 CD34+的造血干细胞通过CD122+NK前提细胞分化成CD56+成熟NK细胞。最终，成熟出的NK细胞以过继性免疫治疗的方式回输到病人体内发挥靶向效应功能。

CTL （ Cytotoxic T cell ） 是在体外激活和扩增的杀伤性 T 淋巴细胞的技术。抽取少量外周血（50-100mL），经过14-21天培养，细胞数量达到2-10×109，效应细胞以CD3+CD8+细胞为主，比例80%以上。作为细胞过继性免疫治疗方法，可有效辅助恶性肿瘤和慢性传染性病毒感染的治疗。 CTL能降低肝癌手术后的复发率

CTL与CIK的比较 CTL细胞的主要成分与CIK不同：CTL细胞是以杀伤性T淋巴细胞为主的混合性T淋巴细胞和NK细胞群体；CIK是以CD3+CD56+为主要功能成分的混合性淋巴细胞群体。 CTL细胞治疗效果经过临床随机对照试验的证实：2000年，CTL细胞基本技术的发明者发表了历时10年针对肝癌手术后无其它治疗患者进行和不进行CTL细胞治疗的临床试验。结果显示，该治疗将早期复发、大量复发和全面复发的危险性分别降低41% (P=0.01)）、51%（p=0.005）和56%（p=0.03）；2007年，韩国FDA批准的IV期临床试验已经证实CTL细胞对肝癌手术后患者具有预防复发的作用。 CTL细胞采用无血清培养体系：避免了使用血清可能导致的细胞污染及其它对细胞生长的不利因素。

DC细胞 ——已知体内功能最强、唯一能活化静息T细胞的专职抗原提呈细胞，是启动、调控和维持免疫应答的中心环节。 近几年对DC疫苗的研究表明，DC疫苗主要是通过增强DC细胞的成熟、共刺激作用以及抗原呈递作用从而破坏肿瘤相关抗原的体内平衡。 血细胞分离机从病人外周血分离PBMC T cells DCs 细胞因子刺激

淋巴瘤的免疫治疗-CAR-T CAR-T(chimeric antigen receptor- T cell，嵌合抗原受体T细胞)： 优势： 将识别肿瘤相关抗原(TAA) 的单链抗体(scFv)和T细胞的活化基序结合为一体，即将抗体对肿瘤抗原的高亲和性和T淋巴细胞的杀伤机制相结合，通过基因转导方法转染T淋巴细胞，使其能特异性地识别和杀伤肿瘤细胞。 优势： 具有抗原特异性、无HLA限制性、抵抗免疫逃逸

三代CAR-T组成的模式图 Clin Cancer Res; 18(10) May 15, 2012

三代CAR-T的组成与特点 第一代CAR-T： 第二代CAR-T： 第三代CAR-T： 组成：scFv+CD3ζ链胞内区 组成：scFv+CD3ζ链胞内区+一种共刺激分子胞内区（CD28、 OX40、4-1BB） 特点：T细胞杀伤、扩增均可，但增殖能力有限 第三代CAR-T： 组成：scFv+CD3ζ链胞内区+二种共刺激分子胞内区 特点：T细胞杀伤、扩增与存活能力均较强，但靶向识别特异性降低，导致低亲和分子也可促进T细胞活化，产生细胞因子风暴（2例死亡）

CAR-T治疗代表性文献 Porter DL, Levine BL, Kalos M, Bagg A, June CH, Chimeric antigen receptor-modified T cells in chronic lymphoid leukemia. N Engl J Med. 2011,365(8):725-33. Kalos M, Levine BL, Porter DL, Katz S, Grupp SA, Bagg A, June CH, T cells with chimeric antigen receptors have potent antitumor effects and can establish memory in patients with advanced leukemia. Sci Transl Med. 2011,3:95ra73. Grupp SA, Kalos M, Barrett D,et al.,Chimeric antigen receptor-modified T cells for acute lymphoid leukemia. N Engl J Med. 2013 368(16):1509-18.