药物分析学

盘点2008年药品安全事故： 虎头蛇尾的免疫球蛋白 ：5月22日至28日，先后有6名在南昌大学第二附属医院就诊的患者，在使用标识为江西博雅生物制药公司生产的批号为20070514、规格为5％2.5g的静脉注射用人免疫球蛋白（PH4）（液体）发生死亡。 “刺五加”陷完达山药业禁足 ：云南省红河州6名患者使用了标识为黑龙江省完达山制药厂生产的两批刺五加注射液(批号：2007122721、2007121511，规格：100ml/瓶)出现严重不良反应，其中有3例死亡。 茵栀黄：2008年10月19日，卫生部通报了陕西省延安市志丹县医院因使用山西太行药业股份有限公司生产的茵栀黄注射液(批号为071001)后，有4名新生儿发生不良反应，其中1名出生9天的新生儿于10月11日死亡。

药者，民之大事，国之重也，不可不察，不可不慎！！！

第一节 药物分析的性质和任务 一、制定药品质量标准的目的意义 药品是指用于预防、治疗、诊断人的疾病，有目的地调节人的生理机能，并规定有适应症、用法和用量的特殊的商品。 药品特殊，必须安全有效。

什么是药物分析？ 药物分析（pharmaceutical analysis） 是分析化学在药学中的应用。 分析化学（analytical chemistry）是研究物质化学组成的分析方法及有关理论的一门科学。

药物分析中常用的分析方法 经典化学分析 现代仪器分析技术 重 量 分 析 法 光 谱 分 析 法 容 量 分 析 法 色 谱 分 析 法 法 电 化学 分 析 法

药物分析：全面质量控制，主要运用物理、化学、物理化学或生物化学的方法与技术，研究已知药物及其制剂的质量控制问题和方法。 新型制剂（靶向、缓释）的发展，基因工程药物，检测方法提高。 现代生物技术研制的生化药物和基因工程药物可能含有与非基因产品不同的有害物质，在检测方法上，更是离不开现代的分析技术。

学习药物分析有什么用？ 药品质量监督，药品不是一般商品，一 定要确保质量，要发展药物质量控制方法。 药学发展的工具、眼睛 与生产单位结合，从事生产全过程的质量控制。 与供应管理部门协作，注意药物储存过程的质量考察，以进一步研究改进药物的稳定性，配科学合理的管理条件与方法，以保证和提高药品质量。

二、药物分析方法： 高灵敏、专属性和准确度，自动化和智能化 药品的常规理化检验和质量标准 体内药品动态分析研究

第二节 药物分析与药品质量标准 一、我国药品质量标准体系 第二节　药物分析与药品质量标准 一、我国药品质量标准体系 药品质量标准：对药品质量规格和检验方法所作的技术规定，是药品生产和质量管理的组成部分。是药品生产、供应、使用、检验和监督共同遵循的技术标准，是药品生产和临床用药水平的标志。

药品质量标准体系： 法定标准和非法定标准； 临时标准和正式标准； 内部标准和公开标准。

（一）法定药品质量标准 “三级标准”体系： 中华人民共和国药典 国家药品食品监督管理局药品标准 省（自治区、直辖市）药品标准

中华人民共和国药典 中国药典ChP －由国家药典委员会编纂、国家药品食品监督管理局批准并颁布实施的记载药品标准的法典，是国家监督管理药品质量的技术标准。有法律效应，凡生产、销售和使用质量不符合药典标准规定的药品均为违法行为。

局颁标准（国家药品监督管理局标准）： 主要收载新药标准（包括暂行、试行和正式标准）、新版药典未收载但尚未淘汰的药品标准和原地方标准规范整理后适用于全国范围的药品标准。 我国制定药品质量标准的指导思想：中药标准立足于特色，西药标准立足于赶超。

省（自治区、直辖市）药品标准 自2001年12月1日起施行的《药品管理法》规定“药品必须符合国家药品标准”。明确取消了地方药品标准。 从2001年12月1日起至2002年11月30日， SFDA对《药品管理法》修订前按照当时实行的地方药品标准批准生产的药品品种，逐个进行审查，对符合规定的，纳入国家药品标准，可以继续生产；对不符合规定的，立即停止该品种的生产并撤销其批准文号。   

（二）临床研究用药质量标准（新药） SFDA批准的临时性、非公开质量标准，仅在临床试验期间有效。 仅供研制和临床试验单位用。

（三）暂行或试行药品标准 1~3类新药临床试验或报试生产——暂行药品标准 该标准两年后，药品质量稳定，转入正式生产——试行药品标准。 两年后药品质量还稳定， SFDA批准转为局标准。 4~5类新药没有“暂行药品标准”这一阶段其他要求同1~3类新药。 1999年4月25日，国家药品监督管理局公布《新药审批办法》。在这份《新药审批办法》中，按审批管理的要求，国家药品监督管理局将中药新药和化学药品新药分别分为五类。具体内容如下： 一、 中药 第一类： 1. 中药材的人工制成品。 2. 新发现的中药材及其制剂。 3. 中药材中提取的有效成分及其制剂。 4. 复方中提取的有效成分。 第二类： 1. 中药注射剂。 2. 中药材新的药用部位及其制剂。 3. 中药材、天然药物中提取的有效部位及其制剂。 4. 中药材以人工方法在动物体内的制取物及其制剂。 5. 复方中提取的有效部位群。 第三类： 1. 新的中药复方制剂。 2. 以中药疗效为主的中药和化学药品的复方制剂。 3. 从国外引种或引进养殖的习用进口药材及其制剂。 第四类： 1. 改变剂型或改变给药途径的制剂。 2. 国内异地引种或野生变家养的动植物药材。 第五类：增加新主治病证的药品。 二、化学药品 第一类：首创的原料药及其制剂。 1. 通过合成或半合成的方法制成的原料药及其制剂。 2. 天然物质中提取的或通过发酵提取的有效单体及其制剂。 3. 国外已有药用研究报道，尚未获一国药品管理当局批准上市的化合物。 1. 已在国外获准生产上市，但未载入药典，我国也未进口的药品。 2. 用拆分、合成的方法首次制得的某一已知药物中的光学异构体及其制剂。 3. 国外尚未上市的由口服、外用或其他途径改变为注射途径给药者，或由局部用药改为全身给药者（如口服、吸入等制剂）。 1. 由化学药品新组成的复方制剂。 2. 由化学药品与中药新组成的复方制剂并以化学药品发挥主要作用者。 3. 由已上市的多组份药物制备为较少组分的原料药及其制剂。 4. 由动物或其组织、器官提取的新的多组分生化药品。 1. 国外药典收载的原料药及其制剂。 2. 我国已进口的原料药和/ 或制剂（已有进口原料药制成的制剂，如国内研制其原料药及制剂，亦在此列）。 3. 用拆分或合成方法制得的某一已知药物中国外已获准上市的光学异构体及其制剂。 4. 改变已知盐类药物的酸根、碱基（或金属元素）制成的原料药及其制剂。此种改变应不改变其药理作用，仅改变其理化性质（如溶解度、稳定性等），以适应贮存、制剂制造或临床用药的需要。 5. 国外已上市的复方制剂及改变剂型的药品。 6. 用进口原料药制成的制剂。 7. 改变剂型的药品。 8. 改变给药途径的药品（不包括第二类新药之3 ）。 第五类：已上市药品增加新的适应症者。 1. 需延长用药周期和/ 或增加剂量者。 2. 未改变或减少用药周期和/ 或降低剂量者。 3. 国外已获准此适应症者。（完）  

（研究阶段） 临床研究用药品标准 1、2、3类 4、5类 两年 暂行药品标准 试行药品标准 （试生产） （正式生产） 两年 局标准

（四）企业标准 又称企业内部标准，企业内控标准。由药品生产企业自己制订，仅在本厂或本系统的管理上有约束力，属非法定标准。 一种是检验方法不够完美，但能够达到某种程度的质量控制 另一种是高于法定标准的要求，主要是增加了检测项目或提高了限度标准。

二、《中国药典》与国外药典 《中国药典》共9版（1953，1963，1977，1985，1990，1995，2000，2005，2010）。在各版之间有增补本。 内容有凡例、正文、附录和索引等四部分。

凡例（General Notices） 把一些与标准有关的的问题，以及采用的计量单位、符号与专门术语等，用条文加以规定，以避免在全书中重复说明。凡例是进行质量鉴定的基本原则，规定具有法定约束力。 正文（Monographys） 是药典的主要内容，为所收载药品或制剂的质量标准。 （名称、性状、鉴别、含量测定、类别、剂量、注意、规格、储藏、制剂）

药典是国家关于药品标准的法典，是国家管理药品生产与质量的依据，和其他法令一样具有约束力。 分为一、二两部。还有配套的《药品红外光谱集》、《临床用药须知》、《中药薄层色谱彩色图集》；《中国药品通用名》等。

附录（Appendix）包括制剂通则、通用检测方法和指导原则。一般杂质检查方法、一般鉴别试验、有关物理常数测定法、试剂配制法以及色谱法、光谱法等内容。 索引（Index）除正文之前有中文的品名目次外，书末还有汉语拼音排序的中文索引和英文索引。

国外药典 　进出口药品检验、仿制国外药品检验、赶超国际水平时，可供参考的国外药典有：

美国药典（The United States Pharmacopoeia ， USP） 2000年为24版 美国国家处方集（ The National Formulary， NF）2000年为19版 二者合并为一册，缩写为 USP（24）—NF（19） USP（25）—NF（20）为2002年亚洲版专版药典首版

英国药典（Brish Pharmacopoeia ， BP） 欧洲药典（European Pharmacopoeia ， PH.Eup）第三版2000年增补版 国际药典（ International Pharmacopoeia， Ph.Int）由世界卫生组织（WHO）颁布 日本药局方（JP14）

药品质量管理规范 1.〈药品实验研究管理规范 〉（GLP） 2.〈药品生产质量管理规范〉（GMP） 3.〈药品经营质量管理规范〉（GSP） 4.〈药品临床试验管理规范〉（GCP） 5.〈分析检验质量管理规范〉（AQC）

1.GLP（Good Laboratory Practices） 是为提高药品非临床研究的质量、确保实验资料的真实、完整、可靠，保证用药安全。 适用：为申请药品注册而进行的非临床研究 2.GMP（Good Manufacturing Practices） 适用：药品制剂生产的全过程，是药品生产和质量管理的基本准则。

3.GSP（Good Supply Practices ） 包括医药商品进、存、销三环节的质量要求的硬件设施、人员资格、职责等 4.GCP（Good Clinical Practices ） 保证临床实验过程规范、保护受试者的权益和安全。 凡是进行各期临床实验均须按此规定进行。 5.AQC（Analytical Quality Control ） 药物分析保证用药安全、合理、有效 哪里有药物，哪里就有药物分析。

第三节　药物分析学的主要内容 药品的质量检验 药品质量标准的研究和制定 药物的生物体分析方法学的研究和体内过程监测

一、药品检验工作的基本内容 药品检验目的保证用药安全有效 检验人员工作态度和知识 基本程序：取样、性状检查、鉴别试验、含量测定、检验报告

评价药品质量的三种分析手段 鉴别（identification）解决真伪，与定性相似，但较简单，如果是伪，不问是什么。 检查（test for purity） 含量测定（assay） 解决优劣 三者同等重要。

（一）原料药的检验 1.取样（Sampling）要考虑取样的科学性、真实性与代表性。 基本原则 均匀、合理 基本原则 均匀、合理 特殊装置 如固体原料药用取样探子取样

取样量 设样品总件数为N （１）总件N≤3时，每件取。 （２） N为4～300时，抽样量为 ＋1。 （３） N＞ 300时，抽样量为 /2 ＋1。

2.性状 外观（晶形、色、味）、溶解度、熔点等。 3.鉴别 依据药物的化学结构和理化性质进行化学反应或测定某些光谱或色谱特征，来判断药品的真伪。每一项检验都是否定性试验。 官能团、离子反应、母体结构、IR、UV。

4.检查 包括有效性、均一性、纯度要求及安全性四个方面 纯度要求即药物的杂质检查，亦称纯度检查（Detection of Impurities） 纯度检查：一般杂质和特殊杂质 铁盐、硫酸盐、重金属、水分 合成中间体、副产物、异构体

5.含量测定（Assay） 准确测定有效成分的含量 化学分析、仪器分析或生物测定法。 判断一个药物的质量是否符合要求，必须全面考虑鉴别、检查与含量测定三者的检验结果。

6.检验报告 完整、清晰的原始检验记录，不得任意涂改 检验人、复核人员及部门负责人签名或盖章。

涂改方式：划两条细线，在右上角写正确数字，并签名 例 9.6543 -8.1270 1.5272 2 例 0.1031 张杰 3 05 例 消耗22.31ml 张杰 张杰

（二）药物制剂的检验 符合质量标准的原料药 不同制剂 赋形剂、稀释剂 附加剂 （稳定剂、防腐剂、着色剂）

药物制成制剂的目的： 为了防治和诊断疾病的需要； 为了保证药物用法和用量的准确； 为了增强药物的稳定性； 为了药物使用、贮存和运输的方便； 为了延长药物的生物利用度； 为了降低药物的毒性和副作用。

1.形状 外部、内部（包衣片的片芯颜色） 2.鉴别 附加剂对鉴别干扰（主药含量低） 专属性或选择性强：色谱法或UV

3.检查 一般原料药项下的检查项目不需重复检查，只检查在制备和储运过程中产生的杂质及制剂相应的检查项目。

特殊：杂质检查（阿司匹林原料检查水　　杨酸，片剂还要） 杂质限量的要求不同 　阿司匹林 “水杨酸”≤0.1% 　阿司匹林片 “水杨酸”≤0.3% 检查装量差异、溶出度、崩解时限、无菌、含量均匀度

4.含量测定 （1）含量限定 制剂主要成分的含量限度较原料药为宽。 片剂的含量限度一般为标示量的95.0%~105.0%。

（2）含量测定方法 不采用容量分析法（滴定分析法） UV HPLC 复方制剂的含量测定： HPLC （3）含量测定结果 标示量%＝（实测含量x单位制剂重量或体积／标示量）x100%

（三）生化药物的检验 生化药物指从动植物、微生物中提取中，亦可用生化-半合成或用现代生物技术制得的生命基本物质。如氨基酸、多肽、酶、蛋白质、多糖、核苷酸等，他们的衍生物、降解物和结构修饰物。 生化药物要进行分子量的测定 制备中易导致失活——检查生物活性 特殊杂质，安全性检查：热原、过敏、异常毒性。

1.鉴别试验 （1）酶法 尿激酶：牛纤维蛋白溶酶原－链激酶 （2）电泳法 肝素：酸性粘多糖，其水溶液带负电荷。Agaros Mark 电泳鉴别 肝素标准品对照 （3）生物法 利用生物体进行试验鉴别。

家兔惊厥试验来鉴别胰岛素。 胰岛素降血糖　　家兔惊厥　　静注葡萄糖注射液　　　　　　　　惊厥停止 2.杂质检查 胰蛋白酶：动物胰脏中提取，靡蛋白酶杂质——N-乙酰-L-酪基酸乙酯底物

3.安全性检查 药物中残留异性蛋白质或致病微生物。 热原、过敏试验、降压物质、无菌检查。 4.含量（效价）测定 生化药物的含量表示：一种用百分含量（与化学药物测定法相同），适用于结构明确的小分子药物或经水解后变成小分子的药物；另一种是用生物效价或酶活力单位表示，适用于酶类、蛋白质等药物（用酶测定）。

酶法两种类型 酶活力测定法：以酶为测定对象的测定方法，测定样品中某种酶的含量或活性的高低。 酶分析法：以酶为测定工具或测定试剂的测定方法，用酶试剂测定样品中酶以外的物质含量。

（1）酶活力测定法 酶活力：指酶催化一定化学反应的能力。速度 酶反应的速度：单位时间反应底物的减少或产物的增加来表示。正比于酶活力。 测定酶活力，可用物理法、化学法或酶分析法等。 （2）酶分析法 　分析的对象是酶的底物、辅酶活化剂或酶的抑制剂。

（四）医院药房制剂的快速化学检验 常规检验不适合 药房制剂分析：根据药房的工作特点和要求，用化学、物理分析法对药房的制剂和配方进行鉴别和含量测定 药房制剂是已知的，鉴别方法简单，含量测定为限度试验。 快速检验：速度快、检品消耗量少、效率高

1.鉴别试验 一般鉴别试验１分钟 1~2个简单的化学反应 供试品量少，纸上点滴反应。 强酸、强碱、强氧化剂或沉淀反应：点滴板、小试管或玻片。 复方制剂的鉴别试验：不经分离即可鉴别的专一反应。

2.含量测定 快速检验的含量测定：滴定分析法 取样量少 滴定液的浓度：0.1mol/L 　体积1~5ml。 含量测定为限度试验：测定药物的含量在规定的高、低限度之间即可。

二、生物药物分析 （体内药物分析） 药品的体外常规检验结果不能完全保证药品进入体内后的安全、有效。 生物药物分析（或体内药物分析）：生物药品中的药物及其代谢物的检测

（一）常用样品的种类、采集和贮藏 生物样品：生物体液和组织，血液（血浆、血清或全血）、尿液和唾液。 1.血样 血浆（plasma）和血清（serum）是体内药物分析最常采用的样本，其中选用最多的是血浆。 因血浆中的药浓可反映药物在体内（靶器管）的状况。

2.唾液（saliva） 唾液中的药物浓度通常与血浆浓度相关。 样品易得，取样无损害，尤易为儿童接收。 有些可从药物唾液浓度推定血浆中游离药物浓度。 但有些蛋白结合率较高的药物在唾液中的浓度比血浆浓度低得多，需高灵敏度的方法才能检测。

3.尿液（urine） 尿样测定主要用于药物剂量回收研究、药物肾清除率和生物利用度等研究，以及测定代谢物类型等。 体内药物清除主要是通过尿液排出，药物可以原型（母体药物）或代谢物及其缀合物形式排出。

（二）生物样品的预处理 考虑：待测药物的理化性质、生物样品种类、测定方法等三方面因素。 1.去除蛋白质 （１）加入与水混溶的有机溶剂 乙醇过量存在时，能使与蛋白结合状态的药物释放可将混合物离心，取上清液（含药。

（２）加入中性盐 中性盐能将与蛋白质水合的水置换出来，从而使蛋白质脱水而沉淀。饱和硫酸钠、镁盐等。 （３）加入强酸 当pH低于蛋白质的等电点时，蛋白质以阳离子形式存在。此时加入强酸，可与蛋白质阳离子形成不溶盐而沉淀。

（４）加入含锌盐及铜盐的沉淀剂 当pH高于蛋白质的等电点时，金属阳离子与蛋白质分子中带阴电荷的羧基形成不溶性盐而沉淀。 （５）酶解法 在测定一些酸不稳定及蛋白结合牢的药物时，常需用酶解法。 它不仅可使组织酶解，并可使药物析出。

2.缀合的水解 尿中药物多数呈缀合状态。 一些含羟基、羧基等的药物，可与内源性物质葡萄糖醛酸形成缀合物； 还有一些含酚羟基、芳胺及醇类药物与内源性物质硫酸形成硫酸酯缀合物。

由于缀合物较原型药物具有较大的极性，不易被有机溶剂提取。 为了测定尿液中药物总量，无论是直接测定或萃取分离之前，都需要将缀合物中的药物释出。 有些药物仅需较温和条件即可使药物游离，有些则需较剧烈的方法，常用酸水解或酶水解的方法。

3.溶剂萃取 提取的目的是为了从大量共存物中分离出所需要的微量组分----药物及其代谢物，并通过溶剂的蒸发使样品得到浓集。 提取法包括液-液提取法和液-固提取法。

4.被测成分的浓集 挥去溶剂后，再加入小体积溶剂重溶的方法。

5.化学衍生化 分离前将药物进行化学衍生化的目的是： （１）使药物变成具有能被分离的性质； （２）提高检测灵敏度； （３）增强药物的稳定性； （４）提高对光学异构体分离的能力等。 药物分子中含有活泼Ｈ者均可被化学衍生化，如含有－ＣＯＯＨ、－ＯＨ、ＮＨ２、、－ＮＨ 等。

三、药品质量标准的制定 （一）制定原则 坚持质量第一，充分体现“安全有效、技术先进、经济合理、不断完善”的原则 1、安全有效 毒副作用小 疗效肯定 2、先进性 赶超世界先进水平 同一药品不同标准，取高标准

3、针对性 注射用药＞内服用药＞外用药 麻醉用药 4、适用性 反映新技术的应用和发展，符合国情。

（二）研究和制定药品质量标准的基础 文献资料的查阅及整理 对有关研究资料的了解 （三）药品质量标准制定工作的长期 质量标准将伴随产品终身。 一个药品的质量标准仅在某一历史阶段有效，而不是固定不变。

（四）药品质量标准的主要内容与制定 原则 一、名称 1. 药品名称： 药品的名称包括中文名、汉语拼音名和英文名三种。药品名称经SFDA批准，为法定的（通用名称）。 按WHO编订的《国际非专有药名》（INN）命名的原则确定英文名和拉丁名，再译成中文正式品名。 中文名按国家药典委员会编撰的《中国药品通用名称》。

化学名按中国化学会编撰的《有机化学命名原则》，母体的选定与Chemical Abstract（CA）一致。 2.药品的名称应明确、简短、科学，不用代号、政治性名词、容易混同或夸大疗效的名称。 3.仿制药物的中文名称，可根据药物的具体情况，采用： 音译 如：Morphine 吗啡 意译 音意合译 如：Chloroquine 氯喹

4. 对属于某一相同药效的药物命名，应该采用该类药物的词干以显示其与同类药物的关系。 如：头孢氨苄、头孢唑啉、头孢尼西 5. 对于一些化学结构不清楚或天然来源的药品，可以以该药品来源或化学分类来考虑。 如： 罂粟中提取的罂粟碱。 6. 复方制剂中含有2个或2个以上的药物成分，可以采用简缩法来命名。

7. 制剂名称的命名应与原料药名称一致。 如：乙酰水杨酸→阿司匹林 乙酰水杨酸片→阿司匹林片 8.避免采用有关解剖学、生理学、病理学、药理作用和治疗学给患者以暗示的药名。如：风湿灵、抗癌灵。 9. 某些药物在使用上有不同要求时，名称也应作不同的规定。如：乙醚和麻醉乙醚 。通过灭菌者，应标明。如：灭菌结晶磺胺

10.对沿用已久的药名，一般不轻易变动，如必须变动，应将原有名作为副名过渡，以免造成混乱。 11.药品可有专用的商品名（中文、外文、外文译名），但不能作为通用名。

二、化学结构式的书写 化学结构式采用推荐的“药品化学结构式书写指南”书写

三、性状 聚集状态 一般以白色或类白色的结晶或结晶性粉末居多数。 色泽 药物的化学结构与它的色泽具有非常密切的关系。 外观形状 　1、 聚集状态 一般以白色或类白色的结晶或结晶性粉末居多数。 色泽 药物的化学结构与它的色泽具有非常密切的关系。 嗅味 嗅应是指药物本身固有的味道，如出现不应有的异臭，就说明其质量存在问题。但毒、剧、麻药除外。

允许有一定的差异， 无法定意义 外观、嗅味 溶解度 溶解度是药品的一种物理性质，药物的化学结构与溶剂的特性对溶解度具有很重要的关系。 溶解度 　2、 溶解度是药品的一种物理性质，药物的化学结构与溶剂的特性对溶解度具有很重要的关系。 允许有一定的差异， 无法定意义 外观、嗅味 溶解度

3、 药物的物理常数是检定药品质量的重要指标，它包括：熔点、馏程、相对密度、凝点、比旋度、折光率、黏度和吸收系数等。 测定方法均收载于药典“附录”中。

①熔点 定义：ChP（2000）规定：熔点系指一种物质由固体熔化成液体的温度，熔融同时分解的温度，或在熔化时自初熔至全熔的一段温度。 法定测定方法： 毛细管测定法和差示热分析法

比旋度是手性药物特有的物理常数。测定比旋度可以检查药品的纯度或测定含量。 ②比旋度 比旋度是手性药物特有的物理常数。测定比旋度可以检查药品的纯度或测定含量。 奎宁和奎尼丁结构相同，奎宁是左旋体，治疗疟疾，奎尼丁是右旋体治疗心律不齐，心房性纤维性颤动。

③吸收系数 吸光物质在单位浓度、单位液层厚 度时的吸收度 摩尔吸收系数 百分吸收系数

④晶型 用X-射线衍射法测定 不同晶型的药物其生物利用度有很大的差异。

⑤相对密度 相对密度系指在共同特定的条件下,某物质的密度与水的密度之比。除另有规定外,温度为20℃。 测定相对密度，可以区别或检查药品的纯杂程度。 液体药品的相对密度，一般用比重瓶进行测定；测定易挥发的液体的相对密度时，可用韦氏比重秤进行测定。

⑥馏程（液体） 馏程系指一种液体照下述方法蒸馏，校正到标准压力[101.3kPa(760mmHg)]下,自开始馏出第5滴算起，至供试品仅剩3～4ml，或一定比例的容积馏出时的温度范围。测定馏程可以区别或检查药品的纯杂程度。 纯度高的药品馏程短，纯度低的药品馏程长

⑦ 凝点 凝点系指一种物质由液体凝结为固体时，在短时间内停留不变的最高温度。 某些药品具有一定的凝点，纯度变更，凝点亦随之改变。测定凝点可以区别或检查药品的纯杂程度。 ⑧折光率 利用折光率，可以鉴定未知化合物，也用于确定液体混合物的组成。 阿贝折光仪

四、鉴别 用可靠的理化方法来证明药物的真伪。 常用的方法有：化学法、光谱法、 色谱法及离子反应、仪器分析法、生物检定法。 选择原则：1）专属性、灵敏性、便于推广 2）化学法与仪器法相结合 3）尽可能采用药典中收载的方法。

五、检查 有效性、均一性、纯度与安全性 杂质检查内容分为有机杂质和无机杂质。、 杂质检测方法要求有基本有原理、专属性、灵敏性和实验条件的最佳化。 确定杂质检查及其限度的基本原则是保证用药的安全和有效。

六、含量测定 对药品中有效成分含量的检测和确定，在鉴别无误、杂质检测合格的基础上进行。 1、含量测定常用的方法包括化学分析法和仪器分析法。 光谱法 容量法 仪器分析法 化学分析法 色谱法 重量法

2、含量测定方法的选择 原料药含量测定应首选容量法 制剂的含量测定应首选色谱法 创新药物的含量的测定应选用原理不同的两种方法进行对照测定。

3、含量测定中分析方法的验证 对实验室的要求 分析方法的效能指标

4、含量限度的确定 根据不同的剂型：口服低于注射液，外用药限度放宽。 根据主药含量：含量低的片剂限度适当放宽。 主药含量大的，含量限度为标示量的95%~105% 主药含量居中，含量限度为标示量的90%~110% 主药含量小，含量限度为标示量的80%~120% 根据测定方法。 根据生产的实际水平。

七、贮藏 药品稳定性实验为药品的生产、包装、贮存、运输条件提供科学的依据，同时通过试验建立药品的有效期。 药品稳定性实验方法： 1、影响因素实验：高温实验、高湿度实验、强光度实验。 2、加速实验 3、长期实验

影响因素实验 高温实验 60℃放置10天，分别在第五和第十天各测一次。 高湿度实验 25 ℃、相对湿度90%±5%条件下放置10天。分别在第五和第十天各测一次。 强光度实验。 4500±500lx条件下放置10天。分别在第五和第十天各测一次。

加速试验 在上市药品的包装条件下，于温度为40℃±2 ℃、相对湿度为75% ±5%的密闭容器中，放置6个月，分别于第1，2，3和6个月测一次。 如不符合制定的标准，则降低温度和相对湿度为30℃±2 ℃、相对湿度为60% ±5%继续试验。

长期试验 在上市药品包装条件下，于温度为25℃±2 ℃、相对湿度为60% ±5%的接近实际贮存条件放置，分别于第1、3、6、12、18、24、36个月时间，按其考察项目进行检测。

第四节 药物分析的新技术与新方法 一、在体采样技术 常规：给药后处死动物，测体液或组织器官中药物及其代谢物浓度，药动学参数。 现采用载体留针技术、微电极探测技术或微透析在体采样技术，在活动物体内不同部位连续、多次取样，数据可靠、重现。

二、分析技术 （一）基质辅助激光解吸附质谱技术（MALDL-MS） 20世纪80年代未，基质辅助激光解吸离子化和电喷雾离子化出现，质谱技术应用在测定生物大分子方面。 基本原理是将分析物分散在基质分子中并形成晶体，当用激光照射晶体时，由于基质分子经辐射所吸收的能量，导致能量蓄积并迅速产热，从而使基质晶体升华，致使基质和分析物膨胀并进入气相。

（二）亲和色谱法 affinity chromatography 用连接在基体上的配位体作为固定相，使其与蛋白质或其他大分子发生可逆的高选择性的相互作用，利用不同亲和力进行分离的液相色谱法。 在生物体内，许多大分子具有与某些相对应的专一分子可逆结合的特性。例如抗原和抗体、酶和底物及辅酶、激素和受体、RNA和其互补的DNA等，都具有这种特性。

亲和色谱中两个进行专一结合的分子互称对方为配基。如抗原和抗体，抗原可认为是抗体的配基，反之抗体也可认为是抗原的配基。将一个水溶性配基在不伤害其生物学功能的情况下与水不溶性载体结合称为配基的固相化。

亲和色谱法的基本过程是： 1.配基固相化。将与纯化对象有专一结合作用的物质，连接在水不溶性载体上，制成亲和吸附剂后装柱（称亲和性）。 2.亲和吸附。将含有纯化对象的混合物通过亲和柱，纯化对象吸附在柱上，其他物质流出色谱柱。 3.解吸附。用某种缓冲液或溶液通过亲和柱，把吸附在亲和柱上的欲纯化物质洗脱出来。

特点：特异性、纯度高、灵敏度好。 应用前景：脱线亲和色谱和在线亲和色谱