实验二 细菌的培养与生化反应 【目的要求】 １．熟悉细菌培养的原理、方法，结果观察和实际用途。 实验二 细菌的培养与生化反应 【目的要求】 １．熟悉细菌培养的原理、方法，结果观察和实际用途。 ２．熟悉细菌分解代谢产物及常用于鉴别细菌的生化反 应。 ３．熟悉细菌分离培养的原理、方法、结果观察和实际 意义。
细菌培养箱
液体培养基： （混浊生长、表面生长、沉淀生长） 半固体培养基：（扩散生长、沿穿刺线生长） 一．示教内容： （1）常用细菌培养基：液体培养基、半固体培养基、 固体培养基（平板和斜面） （2）常用的细菌培养法和生长现象观察： 液体培养基： （混浊生长、表面生长、沉淀生长） 半固体培养基：（扩散生长、沿穿刺线生长） 平板培养基（菌落） 固体斜面培养基（菌苔） （3）常用于鉴别细菌的生化反应试验（吲哚试验、 甲基红试验、V-P试验、柠檬酸盐利用试验、单糖发酵试验、H2S试验和尿素分解试验） 固体培养基：
选择培养基 厌氧培养基 鉴别培养基 增菌（营养）培养基 基础培养基
培养基按照物理性状分类 液体培养基 半固体培养基 固体斜面培养基 固体平板培养基
Growth features of bacteria in liquid media 细菌在液体培养基中的生长情况 菌膜 对照 均匀浑浊 菌沉淀
Growth features of bacteria in semi-solid media 细菌在半固体培养基中的生长情况 1、3: 有动力 2: 无动力
Growth features of bacteria in solid plate media
单糖分解反应 左起1~5管分别为葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖阳性（黄色），第6管为阴性对照（紫色）
Indol test 吲哚试验 - + tryptophan色氨酸 indole吲哚 玫瑰吲哚 Kovac‘s reagent吲哚试剂（对二甲基氨基苯甲醛） E.coli 大肠杆菌：+ 产气杆菌：— - +
Methyl red test 甲基红试验 葡萄糖 丙酮酸 乙酰甲基甲醇 甲基红 － 葡萄糖 丙酮酸 甲基红 ＋ - + E.aerogenes 葡萄糖 丙酮酸 乙酰甲基甲醇 甲基红 － 葡萄糖 丙酮酸 甲基红 ＋ E.coli - +
Voges-Proskauer Test VP试 验 阴性 阳性 大肠杆菌：— 产气杆菌：+
Citrate utilization test 枸橼酸盐利用试验 E.aerogenes 铵盐 氨 + 唯一碳源：枸橼酸盐 唯一氮源：铵盐 E.coli: 不生长 - － +
IMViC试验(Indole Test; Methyl Red (MR) Test; Voges-Proskauer (VP) Test; Citrate Utilization Test) 大肠埃希菌 ＋ ＋ － － 产气杆菌 － － ＋ ＋
Urease Test 尿素酶试验 urea尿素 ammonia氨
H2S Production 硫化氢试验 PbS 含硫氨基酸 含硫无机化物 H2S Pb2+ （黑色） Fe2+ FeS 阳性
二．操作内容：细菌标本的分离培养 【材料】 1. 葡萄球菌和大肠杆菌混合菌液的棉拭子 2. 普通固体琼脂平板 3. 接种环、酒精灯等 【方法】细菌标本的分离培养 — 分区划线
2、什么叫菌落？为什么平板划线接种可分离纯培养？ 三、实验报告 1、液体、半固体、固体斜面培养基的接种方法和其上 （中） 的生长现象。 2、什么叫菌落？为什么平板划线接种可分离纯培养？ 3、细菌分离培养的方法、结果 每区分别见到的现象 菌落的特征描述