天然有机酸及活性腐植酸的家畜疾病预防和促进生长的效果(humic acid) (株) YG BIO KOREA Catholic University of Pusan 临床病理学科

天然有机酸 (Humic natural complex) 是什么 ? 古生代植物的残留物有机转化及碳化过程，在各过程中产生的产物 泥炭 : 作为碳化未成熟时期的产物，黑腐酸的含量通常在2%以下 黑腐酸 ：植物的残余物沉积并经历数千万年的分解过程，存在于沉积层。通过微生物活跃的作用，腐殖质和有机化合物在腐酸界最佳旺盛的转化产物。腐酸界份子有蒜种（黑腐酸，富里酸，核酸） 亞炭:  黑腐酸的碳化过程进一步进化，富里酸倍消灭形成风化亚碳随后形成亚碳。亚碳包含约5~10%的黑腐酸，是至今为止国内流通的大部分黑腐酸 燃料用石炭: 超越亚碳，碳化过程进一步进化，形成次沥青碳,进一步形成沥青碳。最终具有95%以上的碳素的分子量形成无限大的无烟碳.  

天然有机酸（富里酸）的作用 富里酸是为donor或receptor的电化学式均衡促进 含有天然原子团的抗氧化剂 成微生物及微量元素复合体 增强营养素，输送营养，增加同化，促进代谢 解毒污染物质，细胞分裂，强化肾脏，增加细胞膜的透过性 增加蛋白质代谢及在细胞内的维生素的触媒作用 治疗贫血，狹心症，动脉硬化，关节炎，火伤，血液凝固，癌等效果 治疗化学性热伤，慢性疲劳，慢性消化不良，慢性干癣，循环疾病等效果 治疗结肠炎，咽喉炎，皮肤炎，湿疹，浮肿，骨折，胆结石，胃炎等效果 治疗痛风，痔疮，高血压，低血糖，高血糖，偏头痛，多发性硬化症等效果 治疗筋痉挛，神经疾病，神经性胃痛，毒素蓄积，溃疡等效果 治疗寄生虫感染，酵母感染等效果 治疗HIV病毒，大肠疱疹等的等相同的有包膜病毒的效果 接着在此研究中，富里酸对HCV virus是否有扼制感染而且在什么条件下能够扼制下的研究下，得到了新型天然HCV治疗剂。其所拥有的 更高性能还有待进一步开发.

Isolation of Fulvic and Humic Acids - IHSS Extraction Method 研究开发的方法 Isolation of Fulvic and Humic Acids - IHSS Extraction Method 原料 0.1M HCl (10ml/原料1g) 不可用 可用 0.1M NaOH 6M HCl (pH 1-1.5) Ulmic acid 0.1M KOH+0.3M KCl 0.05M HCl-0.15M HF 透析, 冻结干燥 Humic acid Fulvic acid XAD-7树脂 阳离子交换树脂 冻结干燥 IHSS (International Humic Sustances Society) 4

Isolation of Fulvic and Humic Acids - Alkaine Exctraction Method 研究开发的方法 Isolation of Fulvic and Humic Acids - Alkaine Exctraction Method Raw Material (1 kg) Precipitate Insoluble Filtrate Soluble Supernatant 0.1 M NaOH 10 L Shaking for 2 hr 0.1 M HCl + 0.3 M HF Centrifuge 6 M HCl (pH 1.5), Centrifuge Humic Acid Fulvic Acid 0.5 M NaOH Dialysis, Freeze-drying Dialysis Freeze-drying 5

从HNC 分析fulvic acid和 humic acid的分析法 研究开发的方法 从HNC 分析fulvic acid和 humic acid的分析法

Humic Acids & Fulvic Acid from Law Materials (HNC) 研究结果 Humic Acids & Fulvic Acid from Law Materials (HNC) Humic acid Law material Fulvic acid 7

Size-Exclusion HPLC Analysis 研究结果 Size-Exclusion HPLC Analysis KSL is astructured in the aqueous medium and adopts an alpha-helical structure in the membrane environment. The molecule is not perfectly amphipathic; therefore, it is not likely that KSL forms pores in membranes. It is likely that KSL interacts with membranes by electrostatic forces or hydrophobic interactions leading to possible membrane damage. 8 8

Quantification of Humic Acid 研究结果 Quantification of Humic Acid KSL is astructured in the aqueous medium and adopts an alpha-helical structure in the membrane environment. The molecule is not perfectly amphipathic; therefore, it is not likely that KSL forms pores in membranes. It is likely that KSL interacts with membranes by electrostatic forces or hydrophobic interactions leading to possible membrane damage. 9 9

Calibration Curve of Humic Acid 研究结果 Calibration Curve of Humic Acid 10

Growth of Cells treated with fulvic acid 研究结果 Growth of Cells treated with fulvic acid

研究开发的方法 细胞增殖效果及细胞再生效果和抗病毒效果作用以前 肠内有益微生菌的活性化和扼制病原性细菌的效果 去除恶臭和改善环境的效果 细胞增殖效果及细胞再生效果和抗病毒效果作用以前   肠内有益微生菌的活性化和扼制病原性细菌的效果 去除恶臭和改善环境的效果 Virus

富里酸和黑腐酸的免疫调节效果 研究开发的方法 在vitro中的造设免疫和活性免疫的效果 在in vivo中的造设免疫和活性免疫的效果 扼制过敏和免疫过敏反应 B cell 活性 T cell 活性 调节免疫 活性免疫 扼制过敏 扼制过敏反应 B cell T cell

给家禽注射病原性微生物接种疫苗并采取可检物 研究开发的方法 给家禽注射病原性微生物接种疫苗并采取可检物 1 14 19 24 孵化 Infectin Sample collection HNC给予/促进生长效果 HNC给予/疾病发生和检查健康 饲料效率/生产效果

天然有机酸的扼制虫卵效果 Total numbers of fecal oocysts between day 6 and day 10 following Eimeria acervulina infection. NNC: non-mediated, non-infected control group, NIC: non-mediated, infected control group,  HNC0.5% : Humic acid 0.5% medicated, infected group, HNC1% : Humic acid 1% medicated, infected group. Chickens were infected orally with 1 × 104 oocyst of E. acervulina. Bars represent the means ± standard deviation of 5 groups which are consisted of three chickens. The asterisk(***) indicates significant increase of oocyst shedding compared to NNC(P < 0.001). The asterisk(*) indicate significant reduction of oocyst shedding compared to NIC(P < 0.05).

Body weight of chicken challenged with Eimeria acervulina following treatment with HNC. NNC : non-mediated, non-infected control group, NIC  : non-mediated, infected control group, HNC0.5% : Humic natural complex 0.5% medicated, infected group, HNC1% : Humic natural complex 1% medicated, infected group. Chickens were infected orally with 1 × 104 oocyst of E. acervulina. Bars represent the means ± standard deviation of 5 groups which are consisted of three chickens. The asterisk(*) indicate significant increase of body weight compared to NIC(P < 0.05).

HNC的增体效果 Relative body weight gain of chicken challenged with Eimeria acervulina following treatment with HNC. NNC : non-mediated, non-infected control group, NIC: non-mediated, infected control group, HNC0.5% : Humic nautral complex 0.5% medicated, infected group, HNC1% : Humic natural complex 1% medicated, infected group. Chickens were infected orally with 1 × 104 oocyst of E. acervulina. Bars represent the means ± standard deviation of 5 groups which are consisted of three chickens. The asterisk(*) indicate significant increase of body weight gain compared to NIC(P < 0.05)

HNC & MS Feed Additive Test （官能检查) 1. 调查对象人数:   20名                                                2. 调 查 项 目:  对照口(一般栏), 实验口分离 测试鸡蛋 3. 实 验 农 场:   牙山鸡林农场                                            4. 实 验 期 限:  2008.10.1~10.30                                           ■ 味道测试                                             项目           对照口  实验口                           有腥味    8      0                               没有腥味    5      15                              清淡淡白        8      12                               香  5      15                                                                               ■ 气味测试                                          项目            对照口  实验口                           有腥味    5      0                               没有腥味  5      15                              ■ 卵壳状态                                              粗糙         3      2                               柔滑         2      10                              一般       15     8      

在产卵鸡中测试 HNC TEST的结果 “1. 全面添加饲料添加剂的实验集群的鸡蛋可压倒性的再生成品质优秀的鸡蛋."                                           “1. 全面添加饲料添加剂的实验集群的鸡蛋可压倒性的再生成品质优秀的鸡蛋."                                            2.  HU变好可得到高等级的鸡蛋                                              3. 卵壳变硬，减少破卵率.(鸡蛋变)                                          4. 腥味消失，使鸡蛋爽口重新诞生                                          5. 集群消化全面变好，健康物异常 6. 原通风设施做的很好，所以此次实验中去除鸡粪味的实验检查并未做好.

研究结果 研究题目: 摄取天然有机酸的产卵鸡 生产品质优秀的鸡蛋并增加 免疫 1) 实验农场: 牙山鸡林农场 1) 实验农场:  牙山鸡林农场                                             2) 实验期间:  2008. 9. 1~ 10. 30 (2个月间)   3) 结果 全面添加天然有机酸的实验鸡群生产了优秀压倒性品质的鸡蛋 HU变得更好，生产出高等级的鸡蛋（蛋清很好的覆盖着蛋黄，蛋黄饱满） 蛋壳变得坚硬，破卵率降低（产卵时鸡蛋全面性的容易滑出）  集群消化全面变好，健康物异常(可以看出消化力和免疫力增强，疾病抵抗性提高) 研究题目: 摄取天然有机酸的肉鸡 成长促进效果 1) 试验农场:  井邑 金钟日农场                                            2) 实验期间:  2008. 8. 1~ 10. 30 (3个月间)   -全面添加天然有机酸的实验鸡群的生长率提高 -35天的出产时间提高到32天 -饲料要求率改善 -添加天然有机酸的鸡群中死亡率和疾病症状大大减少 -肉眼能看出投入天然有机酸的鸡群变得更健康(可以看出消化力和免疫力增强，疾病抵抗性提高) -鸡粪异味多少减少

给猪注射病原性微生物并采取可检物 研究开发的方法 1 14 19 24 Infectin Sample collection 1 14 19 24 Infectin Sample collection 给予天然有机酸/促进成长效果 给予天然有机酸/疾病发生并检查健康 饲料效率/生产效果

给牛注射病原性微生物并采取可检物 研究开发的方法 1 14 19 24 Infectin Sample collection 1 14 19 24 Infectin Sample collection 给予天然有机酸/促进成长效果 给予天然有机酸/疾病发生并检查健康 饲料效率/生产效果

投入天然有机酸的奶牛的变化 12/23기준 11/19 12/03 12/23 No. Parity DIM BW MY MF MP SCC 37 4 81 614 624 649 39 40 3.5 3.1 3.9 2.6 2.9 15 21 84 2 105 613 628 627 43 45 44 4.6 2.8 3.0 3.4 61 56 99 86 636 647 41 3.8 2.7 3.7 3.3 17 22 18 87 1 345 644 30 28 4.5 3.2 59 42 98 65 482 495 519 29 33 4.1 3.6 94 70 47 11 8 328 652 650 641 32 4.7 4.0 339 184 120 13 78 508 529 35 4.3 2.4 212 253 302 16 173 575 590 592 38 2.5 203 122 104 6 740 716 748 4.8 198 75 340 736 737 760 20 14 354 446 300 525 518 539 27 26 4.4 4.2 186 207 255 95 244 527 533 540 34 2.1 309 301 1098 134 396 697 701 720 236 175 161 168 630 36 569 389 449 89 393 645 661 646 24 4396 501 490 93 265 542 553 556 706 243 261

活用方案和期待效果(技术性 侧面) ○附加价值高的富里酸和黑腐酸的定制技术开发 ○自然天然有机酸的分析法开发  活用方案和期待效果(技术性 侧面) ○附加价值高的富里酸和黑腐酸的定制技术开发 ○自然天然有机酸的分析法开发 ○确立对被定制的天然有机酸的细胞免疫和活性的分析技术 ○导入天然有机酸的饲料添加剂并开发出病菌性疾病的防治法 ○导入天然有机酸的饲料添加剂并开发出双孢子球虫和寄生虫的扼制法 ○确立用定制的天然有机酸饮料代替抗生素的技术 ○将定制的天然有机酸的细胞免疫和活性应用于动物和人体 ○确立有关从动物和人中的天然有机酸的细胞免疫和活性化的基本材料

活用方案和期待效果(经济, 产业 侧面) ○ 具有生产原价低，销售价格高，市场需求广的倾向的有机饲料的生产 ○ 做出市场需求性高的有机家畜和家禽的生产贡献 ○ 减少幼家畜的死亡率，使其健康成长改良肉质的效果 ○ 确保家禽的健康，减或有效控制少传染性疾病 ○ 减少抗生物质和生长荷尔蒙的使用量和减少使用过多而引起的抗药性 ○ 做出生产安全品质的肉类和鸡蛋的贡献 ○减少饲养场内部的空气异味并净化 ○ 将被医药类污染的有毒环境中的有毒排泄物，有机转换成有利用价值的有机排泄物 ○ 将粪尿排泄物中的药物污染物有机转化并杀除霉菌 ○ 生产含有丰富腐殖质的优良价值的堆肥和液肥 ○ 减少堆肥的成熟时间，减少堆肥过程中因气体排泄而造成的空气污染 ○ 利用免疫界细胞活性的疾病预防，减少生产费用来创造高利润 ○ 利用所有动物和人体都可以使用的天然免疫活性新药的开发来确保国家竞争力 ○ 作为新次元的天然物质，检出细胞再生的效果后开发出多用途机能性药品替代物 ○ 利用免疫的活性化来减少抗生素的滥用