日期:2013/10/07 課程:生物化學實驗 指導老師:蔡美玲 老師

Slides:



Advertisements
Similar presentations
選修生物(上) 細胞是生物體的基本單位,那細 胞又是由哪些物質構成的呢?構成細 胞的成分除了水和無機鹽外,主要為 醣類、蛋白質、脂質和核酸等有機 物。 1-2 細胞的化學組成.
Advertisements

 1. 在下列几种物质中,从物质的组成分析其 中和另外三种物质不相同的是( ) A. 四氧化三铁 B. 河水 C. 稀盐酸 D. 高锰酸钾制氧气后的剩余物  2. 有浓盐酸、硫酸铜、氯化铁三种溶液,可 以把它们区别开的性质是( ) A. 状态 B. 气味 C. 颜色 D. 以上三者都可区别.
玉田三中 化学组. 生活中的这些物质 …… 酸的 食醋、酸奶和某些水果都是 酸的,你是如何知道的?
生物化學精要 ch7, 7.5, page 234 原核生物 DNA 片段 mRNA 轉譯蛋 白質 A 、 B 、 C 核糖體 多肽鏈 A 多肽鏈 B 多肽鏈 C 蛋白質 A 基因 A 基因 B 基因 C RNA 聚合酶 依憑 DNA 的 RNA 聚合酶轉 錄基因 A 、 B 、 C 之 DNA 核糖體轉譯.
第 2 节 生物体中 的有机化合物. 实验 2.1 有机物的鉴定 一、糖类 二、脂质 三、蛋白质 四、核酸 五、维生素.
老年性阴道炎 湘乡市人民医院妇科 湘乡市人民医院妇科 郭雨良. 病因 1 、发病原因 主要原因是因卵巢功能衰退,体内雌激素 水平低落或缺乏,阴道上皮细胞糖原减少, 阴道内 pH 值呈硷性,杀灭病原菌能力降低。 同时,由于阴道粘膜萎缩,上皮菲薄,血 运不足,使阴道抵抗力降低,便于细菌侵 入繁殖引起炎症病变。另外,个人卫生习.
第二十二章 碳水化合物 Carbohydrates. 碳水化合物 ( 糖 ) 是非常重要的一类天然有 机物,广泛存在于自然界。 概述: 葡萄糖、果糖、蔗糖、淀粉、纤维素等都 是碳水化合物。 对于一切生物而言,最重要的是葡萄糖。
药物溶媒 生理盐水还是葡萄糖?.
果糖(fructose , C6H12O6): 果糖是甜度最高的天然糖,一般認定是蔗糖的1.73倍。
中二綜合科學科 單元十:常見的酸和鹼.
细胞生活的环境 内环境稳态的重要性.
腰部劳损.
妇产科 主讲教师:张佳.
第十章 酶工程技术 第一节 酶的发酵生产 第二节 酶的分离纯化 第三节 酶分子的改造.
第二章 发酵工程基础知识.
carbohydrate and 1ipids
Enzyme 2-1:澱粉酶活性之測定 2017/3/12.
課程名稱:元素與化合物 編授教師: 中興國中 楊秉鈞.
The Structure and Function of Large Biological Molecules
高血脂 CHENDEFANG
碳水化合物(carbohydrate) 單醣(monosaccharide)是具有許多-OH基的aldehyde或ketone。具aldehyde的單醣稱aldose,具ketone則稱ketose。 當化合物的對掌碳(chiral carbon)為n個時,其立體異構物(stereoisomer)則有2n個。如n.
推测:胃液中一定存在 能消化肉块的物质. 推测:胃液中一定存在 能消化肉块的物质 第5章 细胞的能量供应和利用 第1节 降低化学反应活化能的酶.
第1节 降低化学反应活化能的酶.
心痛 中医内科学.
高淳区沧溪中学初一备课组. 高淳区沧溪中学初一备课组 蝌蚪能够变成青蛙,刚出生的婴儿会吮吸乳汁,还有人遇到寒冷的刺激会打哆嗦,引起上述行为的是一种物质——激素。 激素是由人体的内分泌腺分泌的一些物质。
營養與健康 2 明道大學 洪奇楠.
陈旧性会阴Ⅲ度裂伤 护理查房 妇科一病区.
实验六 手工制香皂.
1.还原糖 2.脂 肪 3.蛋白质 10叶绿素 4.质流动 5.分 裂 6.酶温度 7.酶- PH 8.酶效率 9.酶水解 11.分 离 12.复 原 13.取DNA.
第一章 細胞 (Cell).
第七章 糖类 油脂 蛋白质 人类重要的营养物质 第一节 葡萄糖、蔗糖.
第 3 章 生物體與營養 活動3-1 食物中澱粉與糖的測定.
13-14学年度生物学科教研室总结计划 2014年2月.
必修1 分子与细胞 第二章 第三节 细 细胞溶胶 内质网 胞 核糖体 质 高尔基体 线粒体 第一课时 浙江省定海第一中学 黄晓芬.
第十五章 糖类化合物习题解答 1. (1) (2) (3) (4) (6) (5) CH2OH HOCH2 CH2OH HO H H HO
1 - 2 細胞的化學組成.
食物中主要成分的检验.
食物中主要营养成分的检验 上海市第二初级中学 王颖. 食物中主要营养成分的检验 上海市第二初级中学 王颖.
· 全球变暖 · 臭氧的破坏与保护 · 酸雨危害与防治
常见离子的检验方法的实验探究 常见离子的检验方法的实验探究 南航附中化学组:呼俊江 Na+ Mg2+ K+ H+ Ca2+ H+ OH-
生 物 化 學 【第5版】 CH07 碳水化合物與醣類生物學.
The Determination of Magnesium by Direct Titration
碳水化合物 Carbohydrates From Mr. Lung T.P..
生物化学实验讲义 主编 龚美珍 刘士平.
第一次實驗課程- 市售果汁之還原糖定量 (DNS法)
8-2 生物體中的大分子 澱粉與纖維素 蛋白質 核酸.
單元十三 陰離子第一屬分析 臺北市立松山工農化工科教師謝榮忠製作.
Chapter 7 PartII 第十一組 0993B006 楊育真 0993B037 劉家薰
基于高中生物学理性思维培养的实践性课例开发
6-1 元素與化合物 課文重點: 1.化學反應的變化 2.物質的分類.
實驗三 牛奶成份分析.
第二节 离子反应 离子反应及其发生的条件 儋州第一中学 梁维.
2-2.1 原核生物界 1、全為單細胞,缺少核膜以及膜狀胞器, 例如:細菌和藍綠藻。.
生物科技與生命倫理 ~DNA的真相~ 6/5科學實作練習活動.
Chymotrypsin Catalytic Mechanism A1
電子圖 (Electron Diagram) 上一堂的重點: 陽離子 火焰顏色 焰色測試 (Flame Test) 鉀離子 (K+) 鈉離子
Carbohydrate Metabolism
離子化合物 (Ionic Compounds) 上一堂的重點: 族 I II III V VI VII
Protein蛋白質2-Bradford定量分析
18-3 課堂整理 第十五組 0993B010 張維哲 0993B042 游博雄.
陕西省陕建二中 单 糖 授课人:庄 懿.
O-linked High mannose Glycoprotein N-linked Complex Hybrid Versican
實驗八 溶解度積之測定.
107學年度第二學期 生活科技課課程簡介 化工科.
離子發電廠 電解值導電度探討.
細胞.
課程名稱:常見物質的化學式 編授教師: 中興國中 楊秉鈞.
國中常見正負離子表 正離子 正離子團 H+、Li+、Na+、K+、Ag+、Mg2+、Ca2+、Ba2+
碳水化合物的测定 1 概述 2 食品中还原糖的测定 3 总糖的测定.
生物技術 Ch10.生物轉化技術 阮雪芬 Nov19&20, 2002 NTUT
Presentation transcript:

日期:2013/10/07 課程:生物化學實驗 指導老師:蔡美玲 老師 還原醣之鑑定實驗 日期:2013/10/07 課程:生物化學實驗 指導老師:蔡美玲 老師

醣類定義 Carbohydrate是地球上含量最豐富的一種生物分子。由碳、氫、氧三大元素所組成,分為醛醣酮糖及其衍生物。

醣類分子的生理功能 作為生物體體內能量的來源:生物體內能將植物澱粉與動物肝醣快速轉換成glucose作為代謝來源。 構成訊息傳遞分子:ribose與deoxyribose分別構成了RNA與DNA的部分結構。

作為生物保護結構:多醣類通常是細菌及植物細胞壁的主要成分。 潤滑與附著:醣類分子能與protein、lipid等其他生物分子加以結合形成glycoprotin、glycolipid等。

醛糖 glyceraldehydes 酮糖 glyceraldehydes

不對稱碳中心:以碳原子為中心,其所連接的四個原子基團皆不同而稱之,會因連接基團的強弱產生不同旋光角度,分為左旋(l)和右旋(d)。 單醣類的變旋作用:糖類分子溶於液體中時會形成半縮醛或半縮酮的結構,更進一步直鏈形成環狀結構,而第1個碳上的氫氧基方向不同,便會產生α與β不同型式的結構。

單糖衍生物:單糖分子能與其他化學取代基相結合產生許多糖類衍生物,如:胺基榶(aminosugar)、去氧醣類(deoxysugars)、酸性醣類(acidic sugars)等。 還原性:醣類分子本身可被中性溫和的氧化試劑如Fe2+及Cu2+加以氧化,故可做為還原劑加以使用。

雙醣及寡醣 雙醣及寡醣主要是以醣甘鍵將兩個或是兩個的以上分子以α-1,4、 α-1,6、β -1,4 、β -1,6方式鍵結,且有直鏈及支鏈的差異。 常見雙醣有麥芽糖、蔗糖、乳糖等。比較特別的是蔗糖為非還原糖。 常見的寡醣則有Mannotriose(甘露糖)、 Rhamninose(鼠李糖)、 Raffinose(棉子糖)等。

多醣 多醣類在生物體內扮演了結構支撐與能量儲存這兩項重要的生理功能。 也參與了一些自然發生之碳水化合物分子角色扮演,如:骨骼連接之潤滑劑、血型的決定、植物及細菌的細胞壁等。 常見的多醣類有澱粉、肝醣、纖維素、幾丁質等。

澱粉(starch) α-D-glucose又稱為葡聚糖(glucosan)。 為許多植物的主要碳水化合物,不溶於水,遇碘液呈藍紫色反應。 結構由直鏈(amylose)及支鏈(amylopectin)所組成。

肝醣(glycogen) α-D-glucose又稱動物性澱粉。 為動物體內肝臟及肌肉的主要存在碳水化合物型式。 其結構類似amylopectin的樹狀結構,但分支更多,分子量約在1x106~3x106 Da。 不具還原性,遇碘液呈紅色。

纖維素(cellulose) 由α-D-glucose 以β-1,4鍵結合成。 為植物及細菌的細胞壁組成成分。

幾丁質(chitin) 為β-D-N-acetyl-glucosamine以β-1,4的方式連結而成的線狀結構。 為昆蟲及甲殼類之外骨骼的主要成分。

還原醣之鑑定實驗

本實驗利用簡易之化學反應區分醣類的結構特性,針對各種結構特性於呈色型態、時間快慢等物理或化學性質加以鑑定。 實驗如下: (1) Benedict Test (2) Barfoed Test

綱要 原理 試劑 步驟 結果 討論

單醣和某些雙糖是還原劑 葡萄糖和其他糖類可以還原銅離子,因此稱為還原糖(reducing sugars)。 還原糖的還原力來自於游離的醛基或酮基。

斐林反應(Fehling reaction) 裴林試劑是含有硫酸銅與酒石酸甲鈉之NaOH 溶液,硫酸銅與NaOH 溶液混合加熱會生成氧化銅沉澱,若加入還原醣則產生黃色或磚紅色的氧化亞銅沉澱。

醛糖 (glucose) 酮糖 (fructose)

斐林試劑缺點:在強鹼性條件下使醣產生分解、氧化、還原等作用,造成測試醣含量之靈敏度較低。

(1) Benedict Test 實驗原理 :本法源自Fehling Tset,但將其中試劑變成單一溶液,使用上更方便且穩定。具有游離或游離趨勢醛或酮基之醣類會將鹼性之銅還原(或醣被氧化)而形成有色(黃至橘紅色)之氧化亞銅,具此種特性之醣類稱還原糖。 醛醣氧化成aldonic acids 及其他產物,酮醣氧化成低分子量之氧化產物之混合物。 目的:該反應可區別醛糖和酮糖。

試劑 1. Benedict 試劑,含: (1) 10 % 無水 Na2CO3 (碳酸鈉,sodium carbonate) (2) 0.025 % K4〔Fe(CN)6〕(亞鐵氰化鉀, Potassium ferrocyanide) (3) 20 % Na 或 K-citrate (檸檬酸鈉/鉀) (4) 1.8 % 無水 CuSO4 (硫酸銅) →須精秤 (5) 12.5 % KSCN 硫氰酸鉀 (Potassium thiocyanate)

試劑 2. 1% 糖試液: (1) Glucose (葡萄糖) (2) Fructose (果糖) (3) Maltose (麥芽糖) (4) Lactose (乳糖) (5) Sucrose (蔗糖) (6) Starch (澱粉)。

步驟 1. 取 2 ml 之糖試液於試管中(6管)。 2. 加入 2 ml Benedict 試劑完全混勻。 3. 所有試管同時置於沸水浴中,2~3分鐘後觀察。

結果 如果溶液中還原糖含量較低,產生的氧化亞銅便會相應減少,因此試驗後可能只會出現綠色、混濁的黃色或橙色沉澱物。

討論 1. 沸水須加入沸石,以防突沸。 2. 此試劑鹼性來自 NA2CO3 (pH10.5) 。 3. 若試劑不加入Na-citrate則會有部分CuCO3沉澱,因為 Cu2+ 與 Citrate 形成可溶而穩定之錯合物。 4. 本實驗可用於病理學上,尿中糖量之檢查。 5. 沉澱顏色不同,乃因還原醣之濃度之故。 6. 50 mg 之葡萄糖可還原 25 ml 之 Benedict試劑。 7. 本實驗受尿酸和肌酸之影響甚少。

(2) Barfoed Test 原理:本實驗原理類似 Benedict test,唯一不同之處在於所用溶液為酸性,且銅離子可於雙醣存在下測出單醣。 單醣在 Barfoed 試劑的作用下,約 5 分鐘左右能將 Cu2+ 還原成橘紅色的氧化亞銅,而 10 分鐘左右有大量沉澱產生即為雙醣。 目的:該反應可用於區別單醣和雙醣。

試劑 1. Barfoed試劑 (Tauber-Kleiner modification) : 4.8 % 醋酸銅溶液 (Copper acetate)。 *分子式:(CH3COO)2Cu·H2O 2. 1%糖試液: (1) Glucose (葡萄糖) (4) Lactose (乳糖) (2) Fructose (果糖) (5) Sucrose (木糖) (3) Maltose (麥芽糖) (6) Starch (澱粉)

步驟 1. 各試管中加入 2 ml 糖試液。 2. 各管加入 2 ml 之 Barfoed 試劑混勻。 3. 將所有試管同時置入沸水浴中。 4. 沸水浴 15 分鐘取出試管,放置20分鐘以上,觀察紀錄每個試管顏色變化與先後順序。

討論 1. 若有混濁產生,請記下時間。 2. 加熱時間控制須準確,若加熱過長則雙醣產生水解,也會得 到與單醣類似之結果。 3. 酸性使試劑還原作用減弱,只有單醣類有作用,但若加熱時 間延長,則雙醣水解,亦有陽性反應。 4. 單醣為直鏈式才有還原力。 5. 5~7分鐘內有橘紅色沉澱者為單醣;7~12分鐘內有大量沉澱產 生者為雙醣 (但蔗糖則不發生沉澱)。

注意事項 1. 酮基本身並沒有還原性,只有在變為烯醇式後,才顯示還原作用。 2. 醣的還原作用生成氧化亞銅沉澱的顏色決定於顆粒的大小,Cu2O顆粒的大小決定於反應速度。 3. 反應速度快時,生成的Cu2O的顆粒較小,呈黃綠色;反應慢時,生成的Cu2O顆粒較大,呈紅色。

注意事項 4. 有保護膠體存在時,常生成黃色沉澱。實際生成的沉澱含有 大小不同的Cu2O顆粒,因而每次觀察到顏色可能略有不同。 5. 溶液中還原糖的濃度可以從生成沉澱的多少來估計,而不能 依據沉澱的顏色來區別。 6. Barfoed 反應產生的Cu2O沉澱聚集在試管底部,溶液仍為深 藍色。 7. 應注意觀察試管底部紅色的出現,它與一般還原性實驗不相 同,觀察不到反應液由藍色變綠色變黃或變紅的過程。