第四組 B9732066 洪瑋靖 (乙) B9732068 徐筱筑 (乙) B9732084 徐名慧 (乙) 指導老師：駱錫能老師 柑橘萃取物抑制酪胺酸酶活性之探討 第四組 B9732066 洪瑋靖 (乙) B9732068 徐筱筑 (乙) B9732084 徐名慧 (乙) 指導老師：駱錫能老師 2011/04/25

大綱 前言 黑色素的生成機制 酪胺酸酶的抑制機制 具抑制酪胺酸酶功能的酚類化合物 柑橘類水果抑制酪胺酸酶活性之酚類化合物 結論

前言 自古以來大多女性總認為一白遮三醜，使市售保養品多以美白作其宣稱。 在近年來人們越來越注意健康的狀況下，美白產品以添加天然成分為主流。 因此，我們以如何抑制黑色素之生成來進行討論。

黑色素生成機制 圖1. 皮膚中黑色素生成結構圖

圖2. UV刺激黑色素生成

圖3. 黑色素生成反應機制圖

酪胺酸酶的抑制機制 抑制黑色素之生成有阻隔UV及抑制酪胺酸酶等方式。 抑制酪胺酸酶之機制有三類： 第一類為酪胺酸酶去活化，即螯合銅離子 第二類為黑色素還原作用 第三類為促進表皮內黑色素脫落

螯合銅離子抑制 銅離子是酪胺酸酶催化反應中的輔酶，若能利用試劑抑制銅離子與酪胺酸酶結合，即可有效阻止黑色素的生合成。 酪胺酸酶上銅離子為活性中心，故由與銅離子結合或競爭達到抑制酪胺酸酶活性。 代表性成分為麴酸(Kojic acid)

黑色素還原作用 將L-Dopaquinone還原成L-Dopa，進而抑制黑色素形成，或將深色的氧化型黑色素還原成淡色的還原型黑色素。 代表性成分為維生素C (L-ascorbic acid)

促進表皮內黑色素脫落 藉由角質細胞的新陳代謝將黑色素自然代謝脫落。 若能抑制黑色素細胞產生黑色素顆粒或加速角質細胞的新陳代謝即可減少黑色素的生成。 代表性成分為對苯二酚。

具抑制酪胺酸酶功能的酚類化合物 除了抑制酪胺酸外，亦可藉由抑制黑色素轉換酶以及黑色素刺激素(a-MSH)等，來達到美白之功效。

鞣花酸 ( Ellagic acids ; EA ) 在漿果、綠茶和石榴中發現具抗氧化及抑制酪胺酸酶活性之多酚物質。 美白效果為螯合銅離子在酪胺酸酶活性位上，以抑制黑色素合成。

阿魏酸 ( Ferulic acid ) 屬於羥基肉桂酸衍生物。 以非競爭型抑制酪胺酸酶，來抑制 L-Dopa的氧化。

沒食子酸 ( Gallic acid ) 及其衍生物 IUPAC：3,4,5 - trihydroxybenzoic acid 來源：綠茶 為一強酪胺酸酶抑制劑 其烷基鏈酯長度與酪胺酸酶抑制活性有關 C＞10：抑制酵素，但無色素生成 C＜10：被酪胺酸酶氧化，生成黃色氧化產物

麴酸 ( Kojic acid ) 及其衍生物 IUPAC：5-hydroxy-2-(hydroxymethyl)-4H-pyran-4-one 來源：真菌，如Aspergillus 和 Penicillium 功能：螯合銅離子和清除自由基 會引起過敏反應

柑橘類水果抑制酪胺酸酶活性之酚類化合物 Hesperidin Kaempferol Naringin Neohesperidin Nobiletin Quercetin

橙皮苷 ( Hesperidin ) 以非競爭型抑制酪胺酸酶

Figure 4. Lineweaver-Burk plots of hesperidin inhibition on diphenolase activity of tyrosinase with substrate, L-DOPA (0.125mM, 0.25mM, 0.5mM, 1mM). Five curves of five concentration of hesperidin are: 0, 0.96mM, 1.93mM, 2.89mM and 3.85mM, respectively. The inset is the secondary plots of the intercept versus concentration of inhibitor (hesperidin) and slope versus concentration of hesperidin.

川陳皮素 ( Nobiletin ) 為柑橘類水果中主要的多甲氧基黃酮 以競爭型抑制酪胺酸酶

Figure 5. Lineweaver-Burk plots of nobiletin inhibition on diphenolase activity of tyrosinase with substrate, L-DOPA (0.125mM, 0.25mM, 0.5mM, 1mM). Five curves of five concentration of hesperidin are: 0, 0.26mM, 0.52mM, 0.77mM and 1.03mM, respectively. The inset is the secondary plot of the intercept versus concentration of inhibitor (nobiletin).

結論 據文獻指出，Nobiletin抑制酪胺酸酶之效果優於Arbutin。 以市售價格相對低廉的柑橘類水果開發為保養品，將會有利於提升其附加價值。

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