实验一 利用紫外吸收光谱检查药物维生素C的纯度 一、实验目的 学习利用紫外光谱检查物质的纯度的原理和方法。 熟练紫外分光光度计的操作。
二、实验原理 当纯化合物与所含杂质的紫外吸收光谱有差别时，就可以利用紫外分光光度法检查纯度。检测的灵敏度取决于两者的摩尔吸收系数。 Vc在紫外区域有吸收，其水溶液的 =256nm；0.01mol/L HCl 溶液的 =244nm(见下页图)。而杂质(口服片中的赋形剂)在该区域没有吸收。通过比较相同浓度试样和标样在最大吸收波长出的吸光度，从而确定试样中Vc的含量。
维生素C的紫外吸收光谱 1. 水溶液; 2. 0.01mol/L HCl 溶液
三、仪器与试剂 1、UV-240型紫外分光光度计 2、石英比色皿 2个，10mL吸量管，100mL容量瓶2个 3、0.01 mol/L HCl 溶液 4、Vc标样(抗坏血酸片)，待测Vc药片
四、实验条件 1. 波长范围 200 ~ 350 nm 2. 参 比 0.01mol/L HCl 溶液
五、实验步骤 1．Vc 标样的配置 ： 称取 0.0800g Vc标样，用 0.01mol/L HCl 溶解并定容于 100mL容量瓶中，得到质量浓度为 0.8mg/mL 的Vc标样储备液。 2．Vc 试样的配置 ： 将5片口服Vc片置于研钵中研成粉末,并混合均匀.然后称取0.0800g,用0.01mol/L HCl 溶解并定容于 100mL 容量瓶中,必要时过滤除去不溶物，得到质量浓度为0.8mg/mL的试样储备液。
3．Vc 的纯度检查 ： (1) 分别取Vc标样储备液 1mL于2只100mL容量瓶中，用 0.01mol/L HCl 稀释至刻度。 (2) 以 0.01mol/L HCl 空白试剂为参比,在 200 ~ 350 nm区域,测绘 Vc标样的紫外吸收光谱,并在图中确定其最大吸收波长。 (3) 在上一步骤中选择的最大波长处，以 0.01mol/L HCl 空白试剂 为参比，分别测定Vc标样和试样的吸光度。
六、数据及处理 将Vc标样和试样的浓度和吸光度值填入下表，并计算Vc口服片中Vc纯度(即含量):
七、思考题 那些情况下可以用紫外吸收光谱进行物质的纯度检查？