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分子医学基本知识 分子医学发展史 分子医学研究内容 分子医学研究技术 分子医学研究现状 实验室安全 实验报告书写规范 课程要求及考核方案

分子医学基本知识 Molecular Medicine

发展简史 19世纪末，发现核素 1944年，确认遗传的物质基础是DNA 1953年，双螺旋模型发现

1994年2月，美国国立卫生研究院((NIH) 卡普((Karp) , 布罗德((Broder) 《癌研究》 “分子医学的新方向 ”

分子医学 从基因的角度重新认识疾病，运用基因技术预防和治疗疾病、鉴定身份，器官再造，运用基因技术防止新生儿疾病，培育新的动植物品种等。 目前基因技术大多数尚待完善，前景却未可限量。 随着基因技术日益深入、广泛地干预生命，许多人也产生了诸多忧虑，从伦理、道德、法律、社会的角度来重新审视基因技术的应用。

目前，医学对某些还缺少有效的治疗方法，就是因为对病因缺乏深入的认识。 1 疾病的分子机理 探索疾病的原因，是有效治疗疾病的前提。 目前，医学对某些还缺少有效的治疗方法，就是因为对病因缺乏深入的认识。 基因科学的发展，为人类从细胞内部的微观生理学和分子生物学水平上寻找病因提供了新的思路。

尿黑酸症 1898年： 尿液 黑色 tyrosine 尿黑酸 氧化分解 接触空气 尿黑酸氧化酶 常染色体隐性遗传病 先天性缺乏尿黑酸氧化酶基因表达

1949年波林发现镰刀型细胞贫血症（病人的红细胞为镰刀形）与血红蛋白结构异常相关。 正常成人Hb (HbA)β亚基 N-val · his · leu · thr · pro · glu · glu · · · · · · C 肽链 CTC GAG 基因 镰形红细胞贫血病人Hb (HbS) β亚基 N-val · his · leu · thr · pro · val · glu · · · · · · C 肽链 CAC GTG 基因

镰形红细胞 正常血细胞

                                                                                          血友病 基 因 英国女王维多利亚。她带有血友病基因，并将其传给了她的儿女。血友病是一种遗传性凝血障碍疾病，患者可能因很小的伤口而出血不止导致死亡。血友病在女性一般表现为隐性遗传，较少发病，但会传给后代；在男性则表现为显性遗传，显示出病症。维多利亚女王在科堡主持的一次欧洲王室成员集会，与会者有17人是她的后裔，其中有她的孙女亚历山德拉（21），她同俄国沙皇尼古拉二世结婚，导致他们的儿子患有血友病。

2 疾病的基因诊断 从广义上讲，大多数疾病都可以从遗传物质的变化中寻找出原因。而从技术上看，只要找到了与疾病相关的基因，基因诊断便立即可以实现。随着“人类基因组计划”的进程，将大大加快疾病相关基因的发现与克隆，基因诊断将成为疾病诊断的常规方法。   单基因疾病的诊断：一般可在临床症状出现之前作出诊断，不依赖临床表型。 有遗传倾向的疾病：易感基因的筛查，如高血压，冠心病，肥胖等。   外源性病源体：如病毒、细菌、寄生虫等引起的传染病。

美国前副总统汉弗莱<Humphrey) 在1967年发现膀胱内有一肿物，病理切片未发现癌细胞 良性“慢性增生性囊肿”，未进行手术治疗。 九年后，他被诊断为患有“膀胧癌”，两年后死于该病。

P53抑癌基因 1994年，研究者用灵敏的PCR技术对上述汉弗莱1967年的病理切片进行了P53抑癌基因检查，发现那时的组织细胞虽然在形态上还没有表现出恶性变化，但其P53基因的第227个密码子已经发生了一个核苷酸的突变。就是这个基因的微小变化，使其抑癌功能受损，导致九年后细胞癌变的发生。这说明，在典型症状出现之前的很长时间，细胞癌变的信息已经在基因上表现出来了

DNA指纹                                                                                            

3 疾病的基因治疗 基因疗法，即是通过基因水平的操作来治疗疾病的方法。目前的基因疗法是先从患者身上取出一些细胞（如造血干细胞、纤维干细胞、肝细胞、癌细胞等），然后利用对人体无害的病毒当载体，把正常的基因嫁接到病毒上，再用这些病毒去感染取出的人体细胞，让它们把正常基因插进细胞的染色体中，使人体细胞就可以“获得”正常的基因，以取代原有的异常基因；接着把这些修复好的细胞培养、繁殖到一定的数量后，送回患者体内，这些细胞就会发挥“医生”的功能，把疾病治好了。

美国医学家W·F·安德森等人对腺甘脱氨酶缺乏症（ADA缺乏症）的基因治疗，是世界上第一个基因治疗成功的范例。                                                                          1990年9月14日，安德森对一例患ADA缺乏症的4岁女孩谢德尔进行基因治疗。这个4岁女孩由于遗传基因有缺陷，自身不能生产ADA，先天性免疫功能不全，只能生活在无菌的隔离帐里。他们将含有这个女孩自己的白血球的溶液输入她左臂的一条静脉血管中，这种白血球都已经过改造，有缺陷的基因已经被健康的基因所替代。在以后的10个月内她又接受了7次这样的治疗，同时也接受酶治疗。经治疗后，免疫功能日趋健全，能够走出隔离帐，过上了正常人的生活。 谢德尔，1999

美国队长

4 疾病的基因预防 1990年沃尔夫（WOff）等发现，将带有甲型流感病毒核蛋白编码基因的质粒注射到小鼠肌肉内，可使小鼠能经受致死剂量的甲型流感病毒的攻击。这种裸露的DNA通过滴鼻和肠道也可以进人细胞，并获得成功的保护性免疫。这种具有疫苗作用的裸露DNA称之为“基因疫苗”（gene vaccine）。 整株疫苗→成分疫苗→基因疫苗

　 基因疫苗的安全性极高，一是无直接副作用，二是无间接副作用，不存在对人体的毒性，机体耐受性好，输注疫苗不引起其它疾患。1995年4月，经美国FDA批准进行了首例应用基因疫苗的人体临床试验。因而，可以看到其实际应用已指日可待了。

爱滋病基因疫苗

but the truth is I carry a “faulty” gene, BRCA1, which sharply increases my risk of developing breast cancer and ovarian cancer. My doctors estimated that I had an 87 percent risk of breast cancer and a 50 percent risk of ovarian cancer, although the risk is different in the case of each woman. Only a fraction of breast cancers result from an inherited gene mutation. Those with a defect in BRCA1 have a 65 percent risk of getting it, on average. My chances of developing breast cancer have dropped from 87 percent to under 5 percent.

时钟基因与抗衰老 人类从公元3500年前就开始寻找长生不老药。老化的原因有多种因素，如蛋白质损伤、DNA损伤、细胞膜损伤、细胞内积累废弃物、端粒缩短等。 　　提升寿命上限的目标可以通过多种方法实现，除了治疗疾病、均衡营养、减少环境污染、适量运动等方法外，发掘控制衰老或长寿的基因成为最有潜力的途径之一。

“时钟基因”： 破坏“时钟1基因”（clock 1 gene）可使线虫的寿命延长1.5倍。科学家们发现，人类也有与时钟1基因大致相同的基因。 “年龄1基因”（age 1）、“daf-2”等受损会延长寿命的基因。人类的DNA中原来就有负责化解活性氧毒性的基因，我们也可以采取活化该基因的办法，以防止老化。 　 热量限制可以延长包括哺乳动物在内的许多物种动物的生命周期。限制热量摄入而延长生命的现象与一种叫作SIR2基因有关。 “我还活着”基因一旦发生改变，就会使果蝇寿命延长一倍。 人体内也存在这种基因，它是通过改变新陈代谢来发挥作用的。

                                                                         DNA缠绕成的染色体末端，有称做端粒（telomere）的区域。控制着细胞的分裂次数，端粒随着细胞分裂每次变短，短到某个程度，细胞将不再分裂。人的一生中，细胞大约能分裂50～60次。因此端粒是控制生理寿命的生物钟，而端粒长短就成为表示细胞“年龄”的指标。如果加入一种“端粒酶”阻止它缩短，就可使细胞保持年轻，人就像吃了“唐僧肉”一样实现长生不老的梦想。

分子医学的社会、伦理问题   分子医学与传统医学最根本的区别在于前者可在基因水平上对疾病进行操作。对遗传物质操作可能引发的后果一开始就是科学界和公众关注的问题。 利用基因工程技术生产预定的蛋白质分子被证明是无害可行的，因而在80年代以来得到了迅速的发展，但将基因操作直接应用于人类疾病的治疗则与一般的基因工程不可同日而语。

分子医学技术

转基因生物是指用实验方法导入的外源基因在染色体基因组内稳定整和并能遗传给后代的一类动物。自从1982年Palmiter等首次将大鼠生长激素基因导人小鼠受精卵雄性原核中，获得了个体比对照组大一倍的转基因“超级小鼠”以来，这项高新技术受到各国重视，发展迅速，取得不少突破，全世界已申请的工程动物专利达到80多项。

                                                                                                                                                                     克隆羊“多利”

北京大学 邓宏魁 5月23日，国际学术权威杂志Science杂志（Science Express） 用小分子化合物诱导体细胞重编程为多潜能干细胞 ——“化学诱导的体细胞重编程 ”

“Seesaw模型”的landscape图 细胞命运决定的“跷跷板模型”

这只名叫“贝贝”的嵌合小鼠的出生意味着用化学方法将成体细胞重编程得到的“多潜能干细胞”具有和“胚胎干细胞”同样的分化发育的能力。 这只名为“青青”的小鼠的“母亲”是用小分子化合物诱导得到的多潜能干细胞

这是一个嵌合的小鼠胚胎，几乎完全由“化学诱导的多潜能干细胞”来源的细胞（被用红色荧光标记）所构成

实验室安全

实验报告书写规范

基本要求 实验的题目应该简练准确，尽量限制字数，并运用标准的关键词。 书写实验目的要明确、精练，对整个实验所要达到的目的加以阐述。 实验原理的书写要充分结合理论知识，对本次试验涉及的理论背景做明了的阐述。 实验步骤要详细、工整、清晰，并对操作过程中出现的现象做实时记录。 实验的结果及结论书写要真实、直观。 讨论的书写要包括对实验结果及结论的分析，尤其在实验结果并不理想的情况下，对实验过程中存在的问题做以详细的分析。

注意事项 进行实验前应对实验的理论知识及实验内容应进行预习，实验前要清楚本次试验要做什么，为什么要做，怎么做，做的时候应该注意什么，会得到什么样的结果。 在实验报告书写时，可参照实验指导进行书写，但切忌简单的全盘照抄。在书写实验原理、实验步骤、实验结果及结论和讨论中可以适当加入绘图、图表。 实验报告应该真实的反应实验当时的情况，切忌虚假的结果，培养尊重科学、严谨科研的精神。

本科生实验报告格式 1. 题目 2. 日期 3. 实验目的 4. 实验原理 5. 材料及试剂 6. 实验步骤 7. 结果及结论 8. 讨论