第十二章 抗生素类药物的分析
主 要 内 容 第十二章 抗生素类药物的分析 第一节 概述 第二节 -内酰胺类抗生素分析 第三节 氨基糖苷类抗生素分析 第十二章 抗生素类药物的分析 主 要 内 容 第一节 概述 第二节 -内酰胺类抗生素分析 第三节 氨基糖苷类抗生素分析 第四节 四环素类抗生素分析
第三节 氨基糖苷类抗生素的分析
一、化学结构与性质 (一) 化学结构 链霉素 * * * 链霉糖 链霉胍 N-甲基-L-葡萄糖胺 链霉双糖胺
(一) 化学结构 庆大霉素 绛红糖胺 脱氧链霉胺 加洛糖胺 * * * * 三个结构类似的庆大霉素C1、C2、C1a组成的混合物 C1—R1=R2=CH3 ; C2—R1=CH3,R2=H ; C1a—R1=R2=H
(二) 性质 1. 氨基糖,氨基环醇——碱性 链霉素——2个胍基,1个氨基 庆大霉素——5个氨基 可与矿酸或有机酸成盐(临床使用硫酸盐) 2. 氨基糖,氨基环醇——旋光性
(二) 性质 3. 苷键——水解(不稳定性) 链霉素、巴龙霉素、新霉素等(双糖胺) 苷元与双糖胺之间的苷键在酸性或 碱性条件下可水解变为苷元与双糖胺 如, 链霉素——链霉胍和链霉双糖胺
(二) 性质 4. UV吸收 链霉素的链霉胍在230nm有UV吸收 庆大霉素、奈替米星等无UV吸收
二、鉴别试验 (一) 共同反应(类别试验) 1. 茚三酮反应 氨基糖苷结构 具羟基胺类和α-氨基酸的性质 可与茚三酮缩合成蓝紫色缩合物。
(一) 共同反应 2. Molish试验 五碳糖 糠醛 α-萘酚 红紫色 六碳糖 酸水解 羟甲基糠醛 蒽酮 蓝紫色
(一) 共同反应 樱桃红色 吡咯衍生物 缩合物 3. N-甲基葡萄糖胺反应(Elson-Morgan反应) II 甲基葡萄糖胺 N I ¾ 性醇溶液 对二甲氨基苯甲醛的酸 乙酰丙酮碱性溶液 ¾ ® - N I 樱桃红色 缩合物 吡咯衍生物
(二) 链霉素的特征反应 1. 麦芽酚(Maltol)反应
(二) 链霉素的特征反应 2. 坂口(Sakaguchi)反应
三、特殊杂质检查及组分分析 (一)链霉素中链霉素B 1. 来源——发酵过程产生的甘露糖链霉素 2. 活性——链霉素的20%~25% 3. 检查方法——TLC/水解,甘露糖为对照 4. 色谱条件——薄层板：硅胶G 显色剂：1,3-萘二酚-硫酸
三、特殊杂质检查及组分分析 (二)硫酸奈替米星中有关物质 1. 检查方法——TLC(或HPLC) 2. 色谱条件——薄层板:硅胶G; 显色剂:茚三酮 3. 溶液配制——供试品溶液:150mg/ml 标准溶液(1):1.5mg/ml 标准溶液(2):3.0mg/ml 标准溶液(3):1.44mg/ml西索米星 4. 杂质限度——西索米星1%; 其他1%,2%不多于1个
三、特殊杂质检查及组分分析 (三)组分分析——庆大霉素C组分 1. 检查方法 邻苯二醛 2. 检测条件 RP-HPLC USP(30): OPA柱前衍生/330nm/庚烷磺酸钠 BP(2005): 电化学/辛烷磺酸钠 ChP(2010): 蒸发光散射/三氟醋酸-甲醇/pH0.8~8.0 邻苯二醛
四、含量测定 微生物检定法 HPLC-检测器 无UV- 不能直接用UV、Flu检测器 柱前、后衍生化-UV检测器 电化学检测器 蒸发光散射检测器
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