第二节 紫外可见分光光度方法 定性鉴别 纯度检查 一、定性分析 二、定量分析 单组分的定量方法 多组分的定量方法
一、定性鉴别 定性鉴别的依据→吸收光谱的特征 吸收光谱的形状 吸收峰的数目 吸收峰的位置（波长） 吸收峰的强度 相应的吸光系数
1．对照吸收光谱的特征数据 同一测定条件下， 与标准对照物谱图或标准谱图 进行对照比较
2．双吸光度(双吸收系数)比值对比法 例：
二、纯度检查 乙醇和环己烷中杂质苯的检查 1．杂质检查： 2．杂质的限量检测： 对于药物中的杂质，常常制定一个容许其存在的限量 肾上腺素中肾上腺酮的限量检查：将产品用0.05 mol·L-1HCl溶液配制成2 mg·L-1溶液，在1 cm的吸收池中，于310 nm处测定吸光度，并规定A值不得超过0.05，相当于肾上腺酮等杂质不超过0.06%
四、定量分析-单组分的定量方法 1．比吸光系数法 2．标准曲线法 3．标准对照法
三、单组分的定量方法 波长的选择 （1） （2）被测物如有几个吸收峰，可选无干扰、较高的吸收峰 （3）一般不选末端的吸收峰
溶剂的选择 测定波长大于溶剂的截止波长
1．比吸光系数法 已知标准纯品呋喃妥因(367nm) = 766。取呋喃妥因（M为238.16g·mol-1）样品0.500mg配制成100mL溶液，以1.00cm厚的吸收池在367nm处测得A= 0.370。求该样品中呋喃妥因的质量分数。
3．标准曲线法
2．标准对照法 前提：截距为0
（二）同时测定多组分的定量方法
（二）同时测定多组分的定量方法 1．两组分吸收光谱部分重叠 λ1→测A1→b组分不干扰→可按单组分定量测Ca λ2→测A2→a组分干扰→不能按单组分定量测Ca
（二）同时测定多组分的定量方法 3．两组分吸收光谱完全重叠——混合样品测定 （1）解线性方程组法 （2）等吸收双波长消去法 （3）系数倍率法
等吸收双波长法 波长的选择原则 选定的两个波长下干扰组分具有相同的吸光度 选定的两个波长下待测物的吸光度差值应足够大 干扰组分 待测组分
等吸收双波长消去法 b 为待测组分，a为干扰组分 a b
等吸收双波长消去法 a 为待测组分，b为干扰组分 a b
（三）可见分光光度法 可见分光光度法： 对于能吸收可见光的有色溶液的测定方法。 显色反应 许多不吸收 可见光的物质 有色物质
（三）可见分光光度法 显色反应（配位反应） （1）确定的定量关系 （2）稳定 （3）颜色差别明显 （4）摩尔吸光系数大（103～105） （5）选择性好
（三）可见分光光度法 显色反应条件的选择： 试剂与溶剂 酸碱度 时间 温度 测定方法：标准曲线法
邻二氮菲比色法测定水中的含铁量 一、标准曲线的制作 二、水样测定 在6只50mL的容量瓶中，用吸量管分别加入标准铁溶液0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL 再分别加入盐酸羟胺溶液1mL、邻二氮菲2mL、NaAc 5mL 稀释至刻度，摇匀 用1cm比色皿，以试剂溶液为空白，在500～520nm每隔2nm测定某一溶液的吸光度，找出最大吸收波长λmax λmax在下，以试剂溶液为空白，测定各溶液的吸光度 参比溶液 二、水样测定