第四章、细菌遗传学I 质粒分配与不相容性 内容 学习要求 介绍当前对质粒分配和拷贝数控制的调控机制的研究,(参考教材101页)

Slides:



Advertisements
Similar presentations
1 、谁能说说什么是因数? 在整数范围内( 0 除外),如果甲数 能被乙数整除,我们就说甲数是乙数的 倍数,乙数是甲数的因数。 如: 12÷4=3 4 就是 12 的因数 2 、回顾一下,我们认识的自然数可以分 成几类? 3 、其实自然数还有一种新的分类方法, 你知道吗?这就是我们今天这节课的学.
Advertisements

本校自民國 78 年於顏前校長世錫任內創設本系 設立鑑識科學學系大學部,專責鑑識人才之培養, 為目前國內唯一專門培育鑑識科學人才、研究鑑識 科學學術之大學學系,設系剛滿 20 年。自 85 年於姚 前校長高橋任內,設立鑑識科學研究所招收碩士生 ,民國 88 年於謝前校長瑞智任內先後獲內政部、教.
化疗知识讲座 台州博爱肿瘤医院 陈国卿. 一、化疗药物的抗癌机制 1 、抑制细胞增殖和肿瘤的生长是其主要作 用机理。 2 、对于新陈代谢旺盛的正常组织同样具有 毒性,如骨髓细胞,粘膜细胞。 3 、理想的药物 — 最大程度的抑制肿瘤细胞, 最小程度的影响正常细胞。 4 、基因药物是发展方向。
主题二 生命的基础 细胞的结构和功能. 细胞壁 细胞膜 细胞质 细胞核 化学组成 功能 成分 结构 基质 细胞器 结构 功能.
第四节 RNA 的空间结构与功能. RNA 的种类和功能 核糖体 RNA ( rRNA ):核蛋白体组成成分 转移 RNA ( tRNA ):转运氨基酸 信使 RNA ( mRNA ):蛋白质合成模板 不均一核 RNA ( hnRNA ):成熟 mRNA 的前体 小核 RNA ( snRNA ):
第二章:生物科學與食品 第三節:基因改造食品.
转基因动物和动物克隆 一、转基因动物(概念、研究、问题) 二、转基因的“动物药厂” 三、抗感染动物
神创造万物及人类.
Healthy Breakfast 第四組 電子一甲(電資一) 指導老師:高美玉 組長:B 侯昌毅
从诺贝尔奖到新世纪 生命科学发展趋势 尚忠林 河北师范大学生命科学学院.
十五條佛規 後學:張慈幸
心理学在初中英语教育、教学工作中的应用 盐城师范学院 戴 斌 荣.
生命科学发展趋势、优先发展领域与资助思考
基因工程及应用.
氨基酸脱水缩合过程中的相关计算 广东省德庆县香山中学 伍群艳 H O C H COOH R2 N NH2 C C 肽键 R1 H2O.
高二生物 绪论 制作人:李 绒.
分子生物学基础实验 指导老师:肖靓.
一轮复习 细胞的增值.
第二章 基因工程制药.
第3节 细胞核——系统的控制中心 肥西中学 蔡林.
方法规律.
§6.3 性别决定和伴性遗传. §6.3 性别决定和伴性遗传 人类染色体显微形态图 ♀ ♂ 它们是有丝分裂什么时期的照片? 在这两张图中能看得出它们的区别吗?
第十六章 基因表达调控 (Regulation of Gene Expression)
基因对性状的控制.
基因的表达 凌通课件.
mRNA 转录、翻译和DNA复制的区别 细胞核 细胞核 转录 翻译 DNA复制 场所 模板 原料 信息传递 时间 产物 生长发育过程中
13-14学年度生物学科教研室总结计划 2014年2月.
必修1 分子与细胞 第二章 第三节 细 细胞溶胶 内质网 胞 核糖体 质 高尔基体 线粒体 第一课时 浙江省定海第一中学 黄晓芬.
基因突变 授课人:羊金华
The regular mechanism of eukaryotic DNA replication
第四章 基因的表达 基因指导蛋白质的合成 (第二课时) 高二年级(理) 教师姓名:葛红.
第六章 外源基因的表达.
酵母双杂交系统 Yeast Two-hybrid System(interaction trap)
HBsAg阳性肝细胞的膜表面HBsAg抗原的检测
Vectors for Gene Engineering
Online job scheduling in Distributed Machine Learning Clusters
第三章 基因组的结构与功能.
胚胎原位杂交检测基因的时空表达模式.
统 计 学 (第三版) 2008 作者 贾俊平 统计学.
DNA, 核酸, 雙螺旋, 基因, 染色體 A T G C T C G A A T T G G C 組合單位 核苷酸
专项考能集训(四)  碱基含量及DNA复制有关的计算.
中国科学技术大学计算机系 陈香兰 2013Fall 第七讲 存储器管理 中国科学技术大学计算机系 陈香兰 2013Fall.
第十六章 基因表达调控 (Regulation of Gene Expression)
基因指导蛋白质的合成 淮安市洪泽湖高级中学:王建友. 基因指导蛋白质的合成 淮安市洪泽湖高级中学:王建友.
台州一模试卷分析 天台育青中学 厉瑞芳.
WPT MRC. WPT MRC 由题目引出的几个问题 1.做MRC-WPT的多了,与其他文章的区别是什么? 2.Charging Control的手段是什么? 3.Power Reigon是什么东西?
第3节 细胞核——系统的控制中心 本节聚集: 1.细胞核有什么功能? 2. 细胞核的形态结构是怎样的?
生物一轮复习系列课件 必修1 提升能力 夯实基础 新课标专用 2011高考 自动播放 共16套 作者:邵寄璋(生物特级教师) 新人教版
第二节 核酸与细胞核.
复习:蛋白质的形成 几条肽链盘曲折叠形成的蛋白质 氨基酸 …….
超越自然还是带来毁灭 “人造生命”令全世界不安
遗传信息的携带者——核酸 授课教师:王建友.
第一节 土地利用对生态系统的干扰与生态重建.
成绩是怎么算出来的? 16级第一学期半期考试成绩 班级 姓名 语文 数学 英语 政治 历史 地理 物理 化学 生物 总分 1 张三1 115
遗传物质--核酸 核酸分子组成 核酸分子结构.
正切函数的图象和性质 周期函数定义: 一般地,对于函数 (x),如果存在一个非零常数T,使得当x取定义域内的每一个值时,都有
§6.7 子空间的直和 一、直和的定义 二、直和的判定 三、多个子空间的直和.
磁共振原理的临床应用.
第五节 缓冲溶液pH值的计算 两种物质的性质 浓度 pH值 共轭酸碱对间的质子传递平衡 可用通式表示如下: HB+H2O ⇌ H3O++B-
基因 遗传物质的结构单位和功能单位 肤色 基因 有遗传效应的DNA片段 眼皮单双 血型 控制生物性状 在染色体上呈线性排列.
遗传信息的传递与表达.
名词从句(4) (复习课).
12.4 减数分裂(meiosis) 减数分裂概述 ◆发生分裂的细胞 生殖细胞进行的产生配子的分裂过程,
基因信息的传递.
BAFF在活动性SLE患者T细胞中的表达:
第三节 真核基因转录调节.
第三节 转录后修饰.
细胞分裂 有丝分裂.
第十一章 RNA的生物合成 (转录).
9.3多项式乘多项式.
Presentation transcript:

第四章、细菌遗传学I 质粒分配与不相容性 内容 学习要求 介绍当前对质粒分配和拷贝数控制的调控机制的研究,(参考教材101页) 认识质粒分配与不相容性

质粒 质粒是能独立于寄主染色体而自主复制并被稳定遗传的一类核酸分子 绝大多数的质粒是DNA型 知识点回顾 质粒 质粒是能独立于寄主染色体而自主复制并被稳定遗传的一类核酸分子 绝大多数的质粒是DNA型 目前已知只有酵母杀伤质粒(killer plasmid)是RNA型 绝大多数的天然DNA质粒为共价、闭合、环状的分子结构,即cccDNA (covalently close circular DNA ) 质粒DNA的分子量范围:1 - 200 kb

已学知识点回顾

一、质粒分配与不相容性

混合配对模型

Random positioning of incompatible plasmids. B. A large partition complex is more likely than a smaller one to activate and stabilize the positioning process. The plasmid with the larger centromere (circle) is thus more likely than that with the smaller one (ovoid) to be chosen for positioning and to be placed at the centres of the cell-halves; plasmids with smaller centromeres are more likely to wander and be lost. Note that repositioning will tend to moderate a preference for positioning plasmids with large centromeres/partition complexes. A. Sibling plasmids are initially paired, segregated and positioned along the cell. As fresh replicas are generated during the cell cycle, the positioning mechanism continues to be activated and to reposition plasmids two at a time, leading to asymmetric plasmid distribution and often to the absence of a plasmid from one cell-half.

ParB不直接相互作用的质粒间也可发生分配 Indirect pairing. Partition does not necessarily start by breaking the ParB–ParB interactions responsible for pairing partition complexes on sibling plasmids. Instead, ParA can be activated by a ParB–DNA entity that consists of either an isolated ParB–parS complex, a paired complex (as shown) or an ensemble in a plasmid cluster. Partition ensues when the activated ParA encounters another ParB–DNA entity, which may never have been in contact with the activating one. Thus, plasmids can be segregated as either clusters, pairs or individuals. 问题:细胞内的质粒是平均分配的么?

二、 质粒复制(拷贝数)与不相容性 质粒能利用寄主细胞的DNA复制系统进行自主复制,并赋宿主细胞特定的遗传性状. 根据在每个细胞中拷贝数的多寡,质粒可分为两大复制类型: ① 严紧型质粒(Stringent plasmid) ② 松弛型质粒(Relaxed plasmid) 一种质粒究竟是属于严紧型还是松弛型并不是绝对的,同一质粒在不同的宿主细胞中可能具有不同的复制型,这说明质粒的复制不仅受自身的制约,同时还受到宿主的控制,同宿主的状况有关。

(一)、质粒复制的调控 为与宿主稳定地共存并把代谢负担减至最低, 质粒必须控制自身的复制。在一定的生长条件下、在一定的宿主菌中, 某一质粒的拷贝数(N) 通常是一定的。 负调控模型 质粒刚移入新宿主时,负调节因子的浓度可忽略不计, 质粒能在短时间内达到正常拷贝数, 然后通过增加或减少每细胞周期每质粒拷贝的复制率来调节细胞中的质粒拷贝数(N), 使该菌群中各细胞的质粒拷贝数维持在平均值(Nav )附近的一个很小的波动范围内。 上述控制机制是由质粒自编码的负控制系统通过调控复制起始率而实现的, 其负控制元件就编码在质粒上 依所用负控制元件的类型不同, 质粒复制的控制系统主要有: 重复子控制和反义RNA控制

1、重复子控制 复制起始蛋白Rep 蛋白能以二体形式结合于启动子区, 反式作用, 对其合成进行自我调节; “手铐”模型( “handcuffing”model)

空间位阻模型 空间位阻模型认为, 决定质粒复制率的主要因素是重复子的浓度而不是Rep 蛋白的表达水平。当质粒拷贝数较低时, Rep蛋白与重复子结合并饱和, 促发复制起始; 随着质粒拷贝数的增加, 结合于某一起点重复子的Rep 分子, 开始与结合于另一起点重复子的Rep 分子相互作用, 并通过Rep- Rep 相互作用把2个环状质粒分子偶联起来, 形成“手铐”状的复合物, 导致这2个重复子区域之间出现空间位阻而阻断复制的起始。 在随后的细胞生长期间, 这种质粒对也逐渐分离, 使各质粒分子的复制起始潜力得以恢复。

⒉ 反义RNA控制 在这一模式中,由质粒编码的抑制因子(反义RNA)结合在复制起始区的特定靶位点上,对复制起负调控作用。 反义RNA : 小RNA 分子, 长35~150 nt, 有1~4个茎-环( stem-loop) , 其序列与靶转录物 5' 端的一个区域互补, 又称反转录RNA( countertranscribed RNA, ctRNA) 反义RNA的作用方式主要有以下两种: ⑴ 抑制引物RNA 加工 (以ColE1质粒为例来说明) ⑵ 抑制前导肽翻译 (以R1质粒为例来说明)

⑴抑制引物RNA 加工 ColE1 质粒的复制起始由一长为700 nt 的转录物RNAⅡ(preprimer)引发。RNAⅡ由宿主RNA 聚合酶合成, 经构象变化后, 与模板DNA在复制起始区附近偶联(coupling)形成RNAⅡ-DNA杂交物, RNase H切割其中的RNA 部分, 产生游离的3‘ - OH, 再在DNA 聚合酶Ⅰ的作用下, 从这个游离的3’ - OH开始DNA前导链的合成。 3‘ - OH的生成是复制起始的限速步骤, 受反义RNA(RNAⅠ)调控。RNAⅠ序列与RNAⅡ的前108 碱基序列完全互补, 互补区结合可改变RNAⅡ下游效应位点的二级结构, 使RNAⅡ的3’ 端不能与模板DNA偶联,RNase H 就不能对RNAⅡ进行加工, 从而阻断引物的生成, 抑制复制的起始。

RNAⅠ的启动子是组成型的, 故其数量与质粒拷贝数成正比, 但不稳定。 除RNA1以外还有Rop 蛋白强化这种抑制 控制复制引物与模板的结合 RNAⅠ的启动子是组成型的, 故其数量与质粒拷贝数成正比, 但不稳定。 在ColE1 中还有一个质粒编码的控制元件Rom 蛋白(又称Rop 蛋白) , Rop蛋白是RNA 结合蛋白, 它能增强RNAⅠ与RNAⅡ的相互作用, 稳定RNAⅠ- RNAⅡ复合物, 因而能加强对复制的抑制作用, 但在上述控制回路中只起辅助作用。

⑵ 抑制前导肽翻译 这种作用方式的例子是质粒R1(两种方式), 它的基本复制子含有可读框copB、tap 和repA, 分别编码转录阻遏蛋白CopB、前导肽TAP和起始必需蛋白RepA。tap 和repA 是翻译偶联的。RepA蛋白是复制的限速因子, 以顺式作用, 但不能重复使用, 其复制控制在转录和翻译两个水平上进行。主控制元件是RNAⅠ,从repA-mRNA 前导区的一段互补链转录而来, 长约90 nt。 质粒拷贝数(基因剂量)与RNAⅠ水平呈正相关

CopB可以二聚体形式阻遏repA始自PrepA启动子(位于copB下游)的转录。在稳态条件下,CopB呈饱和浓度,可充分阻遏repA始自PrepA的转录,使其维持在基线水平。此时,repA mRNA 主要以copB-tap-repA RNA 多顺反子形式合成。但在质粒定居的早期阶段,质粒拷贝数很低,CopB介导的阻遏失效。此时, PrepA启动子去阻遏,repA 转录为tap-repA mRNA,

2、 质粒不相容性 质粒不相容性的原因 质粒的不相容性现象主要是与质粒的复制调控和分离(segregation)机制有关,不能在同一细胞中并存的质粒是因为他们共享一个或多个共同的复制因子或相同的分配系统。(对于单拷贝质粒???) 当两种复制及调控机制毫不相干的质粒在同一个细胞中生存时,它们各自复制,再各自分配到不同的子细胞中,不会发生干扰。当两种复制及调控机制相关或相同的质粒在同一个细胞中生存时,质粒复制及调控机制就会把它们看做成同种质粒而将他们的拷贝数控制在一定的数目内。由于细胞时质粒在子细胞中分配不均匀的缘故,经过几十次的细胞分裂后,就会造成敏感质粒的分离丢失。

本节总结 不相容性的分子生物学基础是质粒的复制调控机制存在同源性,此外具有相同复制起始位点和分配区的两种质粒也不能共存于同一个宿主菌 影响不相容性的主要因素: ⑴质粒分离机制(segregation system) ⑵ 重复子 ⑶ 复制起始位点 ⑷反义RNA编码区