缺 氧 实 验 (Hypoxia Experiment)

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缺 氧 实 验 (Hypoxia Experiment) 陆 源 浙江大学学院

一、中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响讨论 常压乏氧性缺氧实验的测定指标? 如何保证小鼠处于常压环境? 本实验采用哪种实验设计,目的是什么? 需要控制两组实验动物体重、性别?为什么? 本实验采用哪种统计方法? 本实验有哪些非处理因素? 耗氧量测定的原理? 从实验设计角度看,放置钠石灰的作用? 本实验方法可用于哪些研究?

二、缺氧动物模型的复制讨论 本实验复制血液性缺氧动物模型的方法? 本实验采用哪种实验设计方法? 本实验采用哪种统计描述、显著性检验方法? 动物乏氧性缺氧时的皮肤或粘膜的颜色?为什么? 动物NaNO2 、CO中毒时的粘膜或皮肤的颜色?为什么? NaNO2中毒的解救方法?机制? CO中毒的解救方法? 本实验方法的研究用途?

缺氧 指组织供氧不足或用氧障碍,从而引起其代谢、功能以致形态结构发生异常变化的病理过程。 缺氧 指组织供氧不足或用氧障碍,从而引起其代谢、功能以致形态结构发生异常变化的病理过程。 低张性缺氧(hypotonic hypoxia):动脉血氧分压降低引起的组织供应不足 血液性缺氧(hemic hypoxia):Hb的质或量改变,导致血氧容量降低或Hb结合的氧不易释出所引起的缺氧 循环性缺氧(circulatory hypoxia):组织血流量减少引起的组织供应不足 组织性缺氧(histogenous hypoxia):组织细胞利用氧障碍所至

小鼠性别判别 小鼠小鼠捉拿和常用给药方法 类 别 外生殖器与肛门之间 雄 性 距离长 ,有毛生长,无纵行沟 雌 性 类 别 外生殖器与肛门之间 雄 性 距离长 ,有毛生长,无纵行沟 雌 性 距离短,无毛生长,能见到一条纵行沟 小鼠小鼠捉拿和常用给药方法

一、中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响 The Effect of Central Nervous System Depression and Low Temperature on Hypoxia 目的 1.学习小鼠耗氧量的测定方法 2.观察中枢神经系统机能抑制和低温对缺氧的影响

1 材 料(materials) 1.1 动物 体重242g ICR小鼠(mouse)。 1.2 药品和试剂 氯丙嗪(chlorpromazine) 、钠石灰( soda lime)。 为中枢多巴胺受体的阻断剂: 抗精神病、镇吐、能增强催眠、麻醉、镇静作用、阻断外周α-肾上腺素受体 降温作用 抑制体温调节中枢,使体温降低,体温可随外环境变化而变化 “人工冬眠”:用较大剂量时,置患者于冷环境中(如冰袋或用冰水浴),可出现镇静、嗜睡、体温降低至正常以下(如34℃或更低)、基础代谢降低、器官功能活动减少、耗氧量减低而呈“人工冬眠”状态 CaO+NaOH+CO2 NaHCO3+CaCO3

1 材 料(materials) 1.1 动物 体重242g的雄性ICR小鼠(mouse)。 1.2 药品和试剂 钠石灰(soda Lime)、氯丙嗪(chlorpromazine) 、生理盐水。 1.3 装置 测耗氧装置(oxygen consumption gauge)

1 材 料(materials) 缺氧瓶 测量槽 1.1 动物 体重242g的雄性ICR小鼠(mouse)。 1.2 药品和试剂 钠石灰(soda Lime)、氯丙嗪(chlorpromazine) 、生理盐水。 1.3 装置 测耗氧装置(oxygen consumption gauge) 缺氧瓶 测量槽

1 材 料(materials) 起点 1.1 动物 体重242g的雄性ICR小鼠(mouse)。 1.2 药品和试剂 钠石灰(soda Lime)、氯丙嗪(chlorpromazine) 、生理盐水。 1.3 装置 测耗氧装置(oxygen consumption gauge) 起点

2 方法 2.1 常压乏氧性缺氧测定小鼠成活时间和耗氧量 2.1 常压乏氧性缺氧测定小鼠成活时间和耗氧量 2.2 分组 20只小鼠随机分为生理盐水组和氯丙嗪组,生理盐水组ip NS 0.1ml/10g,室温放置10~15min开始实验;氯丙嗪组ip 0.25%氯丙嗪 0.1ml/10g,冰浴10~15min,呼吸频率70~80次/min开始实验。 2.3 观察指标 2.3.1 耐缺氧时间 记录密闭测耗氧装置开始至小鼠死亡时间。 2.3.2 耗氧量 小鼠死亡时,测量槽中水的移动量,即为耗氧量。计算小鼠单位体重和时间的耗氧率。 2.5 统计处理 数据以x±s表示,统计学分析采用Student′s t- test方法。

3 结果(results) 4 讨论 (discussion) 5 参考文献(references) 3.1 小鼠耐缺氧时间 氯丙嗪组在125ml缺氧瓶中的成活时间x1±s(s)显著长于生理盐水组x2±s(s) (p<0.05),见表1。 3.2 小鼠耗氧率 氯丙嗪组在125ml缺氧瓶中的耗氧率x1±s (ml/g/s)显著低于生理盐水组x2±s (ml/g/s) (p<0.05) 。 4 讨论 (discussion) 5 参考文献(references)

二、缺氧动物模型的复制 The Establishment of Animal Models of Hypoxia 目的 复制乏氧性、血液性缺氧动物模型及NaNO2中毒的解救方法。 观察不同类型缺氧在缺氧过程中黏膜和血液色泽的变化。

1 材 料(materials) 2 方法 (methods) CO 1.1 动物 体重242g的ICR小鼠(mouse)。 1.2 药品和试剂 钠石灰(soda lime) 亚硝酸钠( sodium nitrite ) 、亚甲基蓝(美蓝)(methylene blue,MB)、 0.9%NaCl (physiological saline solution) 、 CO(carbon monoxide)。 2 方法 (methods) 2.1 将20只小鼠随机分为乏氧性缺氧组和一氧化碳组。乏氧性缺氧组小鼠放入含有5g钠石灰的500ml密闭瓶中,注入10ml 空气;一氧化碳组小鼠放入500ml密闭瓶,注入10ml CO气体。 CO

2 方法 (methods) 2.2 将20只小鼠随机分为亚硝酸纳组和亚硝酸纳治疗组。亚硝酸纳组小鼠腹腔注射50g/L亚硝酸纳0.2ml后即刻腹腔注射生理盐水0.2ml ;亚硝酸纳治疗组小鼠腹腔注射50g/L亚硝酸纳0.2ml后即刻腹腔注射10g/L亚甲基蓝0.2ml 。

2 方法 (methods) 3 结果(results) 2.3 记录实验前和实验过程中小鼠行为(挣扎、痉挛)和耳、唇、尾的颜色。记录30min中小鼠死亡数和死亡小鼠肝脏颜色。 2.4 数据 小鼠死亡率用百分率表示,统计学分析采用Fisher确切概率法。 3 结果(results) 3.1 小鼠一氧化碳中毒的死亡率 一氧化碳组小鼠30min内的死亡率(p)显著高于乏氧性缺氧组的死亡率(p1)(p<0.05)。 3.2 小鼠亚硝酸盐中毒的死亡率 亚硝酸盐组小鼠30min内的死亡率(p)显著亚硝酸盐加美兰组的死亡率(p1)(p<0.05)。

3 结果(results) 表2 不同类型缺氧肝脏颜色比较 类 别 血液或肝脏的颜色 乏氧性缺氧 一氧化碳中毒 亚硝酸盐中毒 3.1 乏氧性缺氧死亡的小鼠血液呈暗红色,一氧化碳中毒死亡小鼠的血液呈…… 表2 不同类型缺氧肝脏颜色比较 类 别 血液或肝脏的颜色 乏氧性缺氧 一氧化碳中毒 亚硝酸盐中毒