大鼠脑的立体定位技术 浙江大学医学院生理学系 梁华为
目的 了解脑立体定位技术的原理,初步掌握确定某一中枢核团的方法
原理 某些颅外标记与颅内结构具有相对固定的位置关系 前囟(bregma):位于冠状缝和矢状缝的交接处 人字缝尖(lambda):位于后囟人字缝与矢状缝交会点
脑图谱
应用 核团微量注射 电位引导 核团的刺激或损毁
材料 大鼠,立体定位仪,哺乳类手术器械,牙科钻,20%氨基甲酸乙酯,生理盐水,2%滂胺天蓝溶液
方法和步骤 麻醉 固定 20%氨基甲酸乙酯 0.6 ml/100g, i.p. 将大鼠头部固定于脑立体定位仪上,门齿杆 -3.3 mm 3个标准检测是否固定成功(鼻对正中,头部不动,提尾不掉)
切头皮,剥开皮下组织, 将骨缝暴露清晰,用铅笔在前囟和后囟各做一标志 核团定位,做标志, 钻孔 LV(AP: -1.3 R 2.0 H: 3.5)mm 小心安放微量注射器,针尖斜面中点进入孔内时,记高度。缓慢进针至LV ,注入10 l 2%滂胺天蓝溶液(2 l/min),留针10 min后缓慢拔针
确定注射位置 取下动物,腹腔注射过量的20%氨基甲酸乙酯使动物死亡 以咬骨钳咬开颅骨,小心取出大脑,顺着注射点将大脑切开,观察染料是否在侧脑室内
注意事项 立体定位仪为精密仪器,实验时应小心操作,以免损坏 微量注射器取出后应立即清洗,以防堵塞