精品课程 项目十 观赏植物组织培养 咸宁职业技术学院
丽格海棠的组织培养 一、培养意义 丽 格 海 棠 二、培养方法
一、培养意义 丽格海棠又名玫瑰海棠，秋海棠科秋海棠属多年生草本植物。花色有红、黄、白等多种，其花色比球根海棠更加艳丽，花期可达3～5个月，具有较高的观赏价值。
一、培养意义 丽格海棠为雌雄异花植物，有性繁殖容易发生变异，难以保持原品种的特性；且种子完全依赖进口，价格昂贵，萌发率低，成本较高。而采用扦插繁殖，繁殖系数较低，难以满足市场的需求，因此植物组织培养快速繁殖技术是解决丽格海棠繁殖慢、质量差的最佳选择。
二、培养方法 培养方法 生 根 培 养 无性系的建立 继 代 繁 殖 试管苗的假植及管理
（一）无性系的建立 以展开的幼叶和幼嫩茎段为外植体。先用毛刷蘸洗衣粉水轻轻刷洗叶片和茎段，后用自来水冲洗，然后在超净工作台上，先用75％的酒精浸泡8～10s，接着用0.1％的HgCl2灭菌7～8 min，最后用无菌水冲洗5～6次，无菌纱布吸干叶片和茎段表面水分，把叶片切成2×2cm的小块，茎段带1～2个芽，把叶片和茎段接种到诱导培养基中进行培养。
（一）无性系的建立 诱导培养基：MS+BA0.5～2.0mg/L+ NAA0.1～0.5mg/L+30/L蔗糖+6.5～7g/L琼脂，pH5.6～5.8。 培养条件：光照强度2000～2500 Lx，光照时间10～12 h／d，温度25±2℃，接种30d后叶片和茎段不产生或仅仅产生少量愈伤组织而直接产生不定芽。
（二）继代繁殖 将获得的不定芽从原叶片或茎段上切下，接种到MS+BA0.2～1.0mg/L+NAA0.1～0.2mg/L+30/L蔗糖+6.5～7g/L琼脂，pH5.6～5.8的培养基上进行继代培养，30～40d后，可长出丛生芽。反复分切丛生芽在继代培养基中进行增殖培养，培养条件同上。增殖系数可达6～8倍，可满足快速繁殖的需要。
（三）生根培养 将具有2～3片叶，芽长3～5cm的无根苗切下，接入1/2 MS +IBA 0.1～0.5（或NAA0.1～0.2）mg/L+20 g/ L蔗糖＋7g/ L琼脂的生根培养基中培养。9～10 d后开始长根，3～4周后，幼根伸长到2～3cm左右就可移栽。一般每株根数达8～10条，生根率可达98％以上。
（四）试管苗的假植及管理 可用珍珠岩作为假植基质。将生根的试管苗在假植前放在炼苗室内（温度20～30℃，光照5000～10000Lx）练苗2～3 d（注意不要打开瓶盖）。然后取出试管苗，用清水洗去根部附着的琼脂，直接栽入珍珠岩苗床。苗床应设置在荫棚中，调节光照和温、湿度。光照应为5000～10000Lx，温度20～30℃，湿度在85％以上。2周后逐渐增加温度和光照，1个月后即可以进行常规水、肥管理。